Внутрилабораторный контроль качества неколичественных методов иммуноферментного анализа в лаборатории

898

О проведении внутрилабораторного контроля качества неколичественных методов иммуноферментного анализа

Внутрилабораторный контроль качества в лаборатории представляет собой систему процедур, для проведения которых используются контрольные материалы или статистический анализ результатов исследований проб пациентов. Целью осуществления такого контроля является оценка данных аналитического качества используемых методик исследования для удовлетворения требований по качеству и ежедневной проверки стабильности результатов.

Внутрилабораторный контроль качества, осуществляющийся в лабораториях с низкой частотой исследований, включает проверку чувствительности и специфичности анализа в каждой аналитической серии с помощью имеющихся в наличии контрольных материалов. В случае отсутствия таких материалов, можно провести внутрилабораторный контроль неколичественных методов способом построения р-карты частот выявления маркеров инфекционных заболеваний и последующего оперативного контроля.

Этот способ чаще всего применяется в тех лабораториях, где анализ того или иного маркера проводится каждый день. Если же в лаборатории подобный анализ осуществляется от одного до трех раз в неделю, то данный способ ВК контроля является практически не выполнимым. Главной причиной невыполнимости ВКК считается большая затрата времени (вплоть до нескольких месяцев) на построение контрольной карты.

Кроме этого, за столь длительный период истрачивается целая серия набора реагентов для определения маркера и появляется необходимость в использовании следующей, что требует решения вопроса о проведении новой установочной серии и так далее.

В этом случае контроль качества клинических лабораторных исследований может проводится двумя способами:

  • оценки внутрисерийной сходимости методики;
  • оценки чувствительности и специфичности анализа.

При использовании первого способа проводятся 10 измерений КО, которые содержат маркеры той или иной инфекции в одной аналитической среде. Здесь же измеряется КО с целью проверки чувствительности и специфичности анализа – КО, содержащих и не содержащих анализируемые маркеры, положительных и отрицательных соответственно.

Стоит заметить, что если КО положительные, то их оптическая плотность несколько выше ОП крит. Если же КО отрицательные, то оптическая плотность ниже ОП крит. В случае выявления противоположных результатов КО, их значения, а также значения других образцов, использовавшихся для исследования в этой же аналитической серии, не принимаются. Возникает необходимость нахождения и устранения ошибок и проведения повторного анализа всех образцов.

Если же значения КО и других использованных для анализа образцов отвечают заданным, то в этом случае они принимаются безоговорочно. На основе 10 значений оптической плотности КО необходимо провести расчет коэффициента внутрисерийной вариации методики CV10 и при использовании КО производства ЗАО «Вектор-Бест» сравнить с данными таблицы.

Таблица 1

Значения 95% доверительного интервала для индивидуальных значений коэффициента вариации CV, рассчитанные по результатам измерений определяемого показателя в контрольных материалах, содержащих маркеры гепатитов В и С, ВИЧ-инфекции, в лабораториях России в рамках программы внешней оценки качества ЗАО «Вектор-Бест»

Маркер

CV сход, %

CV воспр, %

HBsAg

11,3

14,2

Анти-ВГС

15,0

19,0

Анти-ВИЧ

15,0

19,0

Антипаллидум

15,0

19,0

При сравнении вычисленных значений со значениями в таблице можно убедиться в том, насколько правильно был выполнен анализ. Если CV10 имеет большее значение, чем приведено в таблице, то это значит, что при проведении анализа была допущена ошибка, которую необходимо найти и исправить. После чего анализ нужно провести повторно. Рекомендовано ежеквартальное проведение внутрисерийной вариации, хотя лаборатория имеет право самостоятельно принять решение о том, как часто проводить внутрилабораторный контроль качества измерений.

О проведении проверки чувствительности и специфичности анализа

В каждой аналитической среде проводится поверка чувствительности и специфичности анализа в лаборатории. Вместе с контролями реагентов в одну лунку вносится КО с положительным значением, а в другую – с отрицательным. Во все остальные лунки вносят исследуемые образцы крови больных.

Если результаты КО не являются такими, как следует, то значения исследуемых образцов этой серии анализа не принимаются. Сразу производится поиск и устранение ошибки, после чего анализ проводится повторно. В соответствии с инструкцией по применению реагентов значения исследованных образцов принимаются и оцениваются в том случае, если результаты КО отвечают заданным.

О частоте выявления маркеров

При отсутствии или недоступности контрольных материалов, внутрилабораторный контроль качества лабораторных исследований можно проводить на основе статистического анализа, воспользовавшись при этом рекомендацией ГОСТ Р 53022.2-2008 «Контроль качества клинических лабораторных исследований». В разделе 3.8 указано, что в случае использования неколичественных методов применяется оценка по частоте обнаружения с их помощью искомых составных для специфических форм патологии. Стоит заметить, что данный вид исследования предназначен именно для диагностики этих форм.

В ГОСТ Р 50779.42-00 «Статистические методы. Контрольные карты Шухарта» можно ознакомиться с построением р-карты частот. Используемое в этом случае понятие «альтернативные данные» полностью отражает полученные результаты неколичественных исследований.

Альтернативные данные – это наблюдения, фиксирующие наличие или отсутствие определенных качеств в каждом образце крови пациента аналитической серии. На основе альтернативных данных подсчитывают число единиц, для которых характерен или нехарактерен данный признак.

Для построения контрольных карт, использующих альтернативные данные, применяется специальная формула:

Внутрилабораторный контроль качества неколичественных методов иммуноферментного анализа в лаборатории

где Рср – среднее значение доли несоответствующих единиц (содержащих маркер);

σ – истинное внутригрупповое стандартное отклонение.

В табл. 2 приведены ретроспективные данные, полученные в клинико-диагностической лаборатории муниципальной инфекционной клинической больницы № 1 г. Новосибирска при исследовании образцов крови пациентов для выявления маркеров инфекционных заболеваний – антител к ядерному антигену вируса гепатита В класса М – анти-HBcIgM. Исследования проводились с использованием наборов реагентов одного изготовителя. Из данных таблицы видно, что число образцов крови пациентов, для которых выполнен анализ, варьирует от 38 до 88, т. е. может отличаться в два раза, а иногда и более. В таких случаях, когда объем подгруппы существенно меняется, стандартом предусмотрено нормирование переменных. Формула для нормирования переменных:

Внутрилабораторный контроль качества неколичественных методов иммуноферментного анализа в лаборатории

Двадцать – двадцать пять подгрупп (аналитических серий) объемом 4 или 5 (число образцов крови пациентов) рассматриваются как приемлемые для получения предварительных оценок. Предварительные данные должны быть собраны последовательно, пока не будет получено 20–25 подгрупп при непрерывном ходе процесса, который должен быть достаточно стабилен. Для уверенности в стабильности процесса необходимо использовать стандарты, контрольные материалы (слитые сыворотки) при выполнении 20 аналитических серий, по которым будет строиться р-карта частот, т. к. это повышает надежность установленных пограничных пределов.

Таблица 2

Частота выявления анти-НВсIgM в образцах крови пациентов, исследованных в 34 аналитических сериях, с 11.05.2012 по 23.01.2013, при использовании набора реагентов ВектоНВсАg-IgM

№ 

аналитической серии

Дата анализа

Количество исследо-ванных образцов (n)

Количество положи-тельных образцов (m)

Частота положи-тельных образцов (р = m/n)

Нормиро-ванная частота (z)

1

2

3

4

5

6

1

11.05.2012

53

12

0,23

2,29

2

16.05.2012

52

6

0,12

-0,20

3

23.05.2012

72

11

0,15

0,64

4

30.05.2012

79

7

0,09

-0,80

5

06.06.2012

58

7

0,12

-0,08

6

14.06.2012

44

5

0,11

-0,24

7

20.06.2012

38

6

0,16

0,76

8

27.06.2012

55

12

0,22

2,11

9

04.07.2012

60

13

0,22

2,07

10

11.07.2012

56

6

0,11

-0,38

11

17.07.2012

54

8

0,15

0,54

12

25.07.2012

64

6

0,09

-0,68

13

01.08.2012

56

9

0,16

0,82

14

08.08.2012

67

6

0,09

-0,78

15

15.08.2012

47

7

0,15

0,56

16

23.08.2012

62

8

0,13

0,11

17

29.08.2012

73

8

0,11

-0,33

18

05.09.2012

70

10

0,14

0,42

19

12.09.2012

59

10

0,17

1,02

20

19.09.2012

85

14

0,16

0,91

21

26.09.2012

71

15

0,21

1,95

22

03.10.2012

63

6

0,10

-0,65

23

10.10.2012

65

7

0,11

-0,37

24

17.10.2012

79

5

0,06

-1,36

25

24.10.2012

75

14

0,19

1,40

26

07.11.2012

51

10

0,20

1,61

27

14.11.2012

70

6

0,09

-0,86

28

21.11.2012

73

15

0,21

1,82

29

20.11.2012

76

11

0,14

0,46

30

05.12.2012

88

12

0,14

0,27

31

12.12.2012

88

10

0,11

-0,24

32

19.12.2012

54

5

0,09

-0,71

33

16.01.2013

56

5

0,09

-0,78

34

23.01.2013

62

7

0,11

-0,25

Для подобных исследований использовались наборы реагентов одного изготовителя. Ознакомившись с данными таблицы, можно сделать вывод, что число образцов крови пациентов, для которых выполнен анализ, варьирует от 38 до 88, то есть может отличаться в два и более раза.

В случаях, когда объем подгруппы подвергается значительным переменам, ГОСТ предусмотрено нормирование переменных, определяющееся с помощью формулы:

В табл. 2 рассматриваются данные исследований в 34 аналитических сериях, количество образцов в каждой составляет не менее четырех. Вычислив частоты выявления положительных образцов, которые содержат маркер, можно провести их нормирование, после чего построить р-карту частот. Составленная карта поможет провести внутрилабораторный контроль качества результатов по выявлению этого маркера.

В случае выхода частоты выявления положительных образцов за пределы нижних контрольных границ, производится поиск и устранение ошибок. После чего проводят повторный анализ отрицательных образцов. Если же частота выявления положительных образцов, в которых содержится маркер, превышает верхние границы, то также нужно проработать и устранить ошибки и повторно проанализировать положительные образцы.

Стоит отметить некоторые факторы, которые влияют на частоту выявления определенного маркера:

  • контингент обследуемых групп пациентов;
  • время обследования;
  • смена изготовителя наборов реагентов, используемых для выявления маркера;
  • ошибки при выполнении исследований и так далее.

Несмотря на то, что учет вышеперечисленных факторов является обязательным, стоит помнить о значимости р-карты, которая является тем инструментом, который позволяет преобразовать интуитивную оценку качества анализа в измеримые величины.

Проведение внутрилабораторного контроля качества с использованием контрольных материалов в тех лабораториях, где частота проведения анализов не превышает трех раз в неделю, при выявлении маркеров социально значимых инфекций нужно в обязательном порядке в каждой аналитической серии производить проверку чувствительности и специфичности лабораторного анализа с помощью контрольных материалов. Если же контрольные материалы недоступны или просто отсутствуют, можно использовать контрольную р-карту.

Используемые методы внутрилабораторного контроля качества дают возможность определить ошибки при проведении исследований и своевременно их устранить, обеспечив тем самым высокую точность показателей.



Подписка на статьи

Чтобы не пропустить ни одной важной или интересной статьи, подпишитесь на рассылку. Это бесплатно.

Мероприятия

Мероприятия

Повышаем квалификацию

Посмотреть

Самое выгодное предложение

Самое выгодное предложение

Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

Живое общение с редакцией

А еще...

Новые документы

Закупки по 44-ФЗ
Квалификация
Платные услуги
Популярное у экономистов медучреждений
Популярное у главных медсестер

Мероприятия





Интервью

Врачей обяжут сообщать о потенциальных донорах

Врачей обяжут сообщать о потенциальных донорах

Алексей ПИНЧУК: журналу «Здравоохранение». Главные темы беседы – изменение правового поля донорства в России





Наши продукты




















© МЦФЭР, 2006 – 2016. Все права защищены.

Портал zdrav.ru - медицинский портал для медицинских работников. Новости и статьи для главных врачей, медицинских сестер, заместителей главного врача, специалистов по качеству медицинской помощи, заведующих КДЛ, медицинских юристов, экономистов ЛПУ, провизоров и руководителей аптек.

Информация на данном сайте предназначена только для медицинских работников. Ознакомьтесь с соглашением об использовании.
Свидетельство о регистрации средства массовой информации Эл № ФС77-38302 от 30.11.2009


  • Мы в соцсетях
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
×
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
×
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
×