text
Портал для медицинских работников

Видовая идентификация бактерий

  • 4 декабря 2015
  • 1055

Работа по идентификации бактерий начинается еще до выделения чистой культуры. Ряд методов позволяет сделать предположение о видовой принадлежности микроорганизмов уже на этапе культивирования.

Идентификация микроорганизмов

Первичный посев биологического материала

В большинстве бактериологических лабораторий техника посева биологических образцов основана на ручном труде и регламентируется приказом Минздрава СССР от  22.04.1985 № 585 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в  клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений» и методическими рекомендациями Минздрава РСФСР от  19.12.1991

Внимание! Для скачивания доступна новая книга:  «Молекулярно-биологические исследования» ,

Методы бактериологического исследования

Видовая идентификация бактерийВ ряде лабораторий клинической микробиологии используют методики бактериологического исследования условно-патогенных микроорганизмов исходя из профиля обслуживаемых отделений, на основе региональных рекомендаций.

Технологические аспекты первичного посева материала

Технологические аспекты проведения качественного первичного посева биологического материала в последние годы связаны с использованием автоматизированных микробиологических комплексов:

  • Previ-Isola (BioMerieux);
  • Innova (Becton Dickinson);
  • Inocula (RIESTRA);
  • WASP (Copan).

Выделение чистых культур микроорганизмов и их идентификация являются ключевым звеном аналитического этапа микробиологического исследования.


Методы идентификации микроорганизмов

Работа по идентификации бактерий начинается еще до выделения чистой культуры. Культуральные свойства выращенных на плотной питательной среде бактериальных изолятов включают:

  1. форму;
  2. размер колоний;
  3. наличие пигмента;
  4. способность к росту при определенной температуре и при концентрации газа определенного состава.

У выращенных на жидкой среде бактерий можно изучить:

  • характер образования осадка;
  • оценить степень мутности;
  • газообразования;
  • изменения цвета питательной субстанции и т. д.

Кроме культуральных свойств, у колоний на средах первичного посева иногда могут быть определены:

  1. некоторые биохимические свойства
наличие ферментов
  1. антигенные свойства
в реакции агглютинации
  1. факторы патогенности
лицетовителлаза, ДНК-аза, фосфолипаза и пр.

Инновации в культивировании микроорганизмов

Одной из инноваций в области культивирования микроорганизмов является использование хромогенных питательных сред:

  • Oxoid;
  • BioMerieux;
  • HiMedia.

Видовая идентификация бактерийЭти среды имеют в своем составе специальные питательные субстраты, изменяющие цвет колоний при росте отдельных видов бактериальных патогенов, что позволяет уже на следующий день после первичного посева получить предварительный результат.

При работе в плановом режиме их можно использовать при проведении видовой диагностики микроорганизмов, что позволяет исключить:

  1. трудоемкие этапы приготовления питательных основ;
  2. постановки многочисленных биохимических дифференцирующих тестов, которые используют в классической схеме идентификации.

Идентификация микроорганизмовВ последние годы все чаще для дифференциации бактерий применяют готовые тест-системы, что позволяет не только повысить точность, сократить время анализа, но и унифицировать бактериологические методы для сопоставления результатов исследований, проводимых в лабораториях различных организаций. Инкубация посевного материала в таких тест-системах проводится в обычных термостатах с последующим учетом результатов и использованием кодовых книг. Наиболее удобным представляется использование автоматических бактериологических анализаторов (Bactek, Vitek, Vidas, WalkAway и др.) со считывающим устройством («ридером»), где в закрытом режиме происходят инкубация, считывание, анализ и архивация результатов.

В качестве перспективного метода идентификации бактерий в последнее время рассматривают определение нуклеотидных последовательностей консервативных генов, прежде всего генов 16SрРНК методом MALDI-TOFмасс-спектрометрии. Принципиальным преимуществом данного метода, кроме сокращения времени исследования (от 8 ч до нескольких минут), является низкая себестоимость расходных материалов.

Способы идентификации патогенов, не связанные с культивированием, преимущественно основаны на применении ПЦР для отдельных видов микроорганизмов, прежде всего вирусов, трудно культивируемых бактерий, возбудителей тяжелых нозокомиальных инфекций и сепсиса (представителей Enterobacteriaceae, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumanii, Enterococcus, Staphylococcus, Streptococcus).

Рекомендации по теме

Мероприятия

Мероприятия

Повышаем квалификацию

Посмотреть

Самое выгодное предложение

Самое выгодное предложение

Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

Мы в соцсетях
А еще:
Сайт предназначен для медицинских работников!


Чтобы подтвердить ваш статус, зарегистрируйтесь, и:

Читайте экспертные
материалы

Скачивайте готовые
формы и СОПы

Смотрите
бесплатные вебинары

13 000 статей

1 500 инструкций

200 записей

Абонемент в электронную медицинскую библиотеку в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Сайт предназначен для медицинских работников!


Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, зарегистрируйтесь, и:

Читайте экспертные
материалы

Скачивайте готовые
формы и СОПы

Смотрите
бесплатные вебинары

13 000 статей

1 500 инструкций

200 записей

Абонемент в электронную медицинскую библиотеку в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
×

×

Гость, вам предоставлен VIP-доступ к журналу «Справочник заведующего КДЛ»:
возможность скачивать шаблоны • доступ к видеотренингам • книги для КДЛ
Активировать доступ  
Сайт использует файлы cookie. Они позволяют узнавать вас и получать информацию о вашем пользовательском опыте. Это нужно, чтобы улучшать сайт. Посещая страницы сайта и предоставляя свои данные, вы позволяете нам предоставлять их сторонним партнерам. Если согласны, продолжайте пользоваться сайтом. Если нет – установите специальные настройки в браузере или обратитесь в техподдержку.