Качество питательных сред Эндо, представленных на отечественном рынке

543

Сравнительную оценку качества испытуемых препаратов осуществляли по основным биологическим показателям: чувствительность; стабильность основных биологических свойств микроорганизмов; дифференцирующие, ингибирующие свойства питательных сред. 

Питательные среды являются важнейшим элементом микробиологического исследования. Они разнообразны по целевому назначению и компонентному составу, используются для транспортировки, выделения, культивирования, идентификации и дифференциации микроорганизмов. Микробиологические среды отвечают своему назначению только в случае их соответствия стандартам качества.

Промышленное производство питательных сред осуществляется в соответствии с нормативно-правовыми актами, регулирующими производство, контроль качества и порядок государственной регистрации, который определен в постановлении Правительства РФ от 27.12.2012 № 1416 «Об утверждении порядка государственной регистрации медицинских изделий» (далее – Постановление № 1416). Ме­дицинские учреждения должны использовать в работе для целей лабораторной диагностики питательные среды, имеющие регистрационное удостоверение, и проводить внутрилабораторный контроль качества питательных сред.

Ранее нами были проведены сравнительные исследования качества питательных сред Федерального бюджетного учреждения науки Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии (ФБУН ГНЦ ПМБ) и импортного производства. Изучены биологические свойства питательного бульона, питательного агара, среды Эндо, SS-агара различных производителей – «HiMedia» (Индия), «Merck» (Германия), «Pronadisa» (Испания). Установлено, что отечественные препараты не только не уступают, но по ряду показателей превосходят импортные аналоги.

Особый интерес представляет среда Эндо, которая предназначена для диагностики заболеваний людей и животных, исследования обсемененности объектов внешней среды и пищевых продуктов патогенными энтеробактериями при первичном посеве биоматериала. Установлено, что для повышения достоверности бактериологических исследований при внутрилабораторном контроле качества питательных сред Эндо целесообразно контролировать биологические свойства сред, используя штамм S. dysenteriae I 1362. В соответствии с действующим МУК 4.2.2316-08 «Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Методы контроля бактериологических питательных сред» (далее – МУК 4.2.2316-08)], указанный штамм должен использоваться для определения чувствительности среды и стабильности основных биологических свойств микроорганизмов. Данный штамм в смеси с другим микроорганизмом – E. coli 3912/41(О5559) используется для определения дифференцирующих свойств среды.

Для изучения диагностической ценности питательной среды Эндо производства ООО «Биотехновация» («БТН-Эндо-агар. Питательная среда для выделения энтеробактерий и их дифференциации по признаку ферментации лактозы, сухая», серия № 4, дата изготовления 26.09.2013, годен до 26.09.2015) и Novamed, Израиль (Эндо-агар, разлитый в чашки Петри, представленный компанией ГЕМ, регистрационный номер декларации РОСС IL.АГ58.Д00224), в соответствии с требованиями методических указаний проведены сравнительные исследования их дифференциально-диагностических свойств в сравнении с отечественной средой Эндо-ГРМ 3 (ФБУН ГНЦ ПМБ – Эндо-ГРМ-агар, серия № 882, дата изготовления 22.07.2013, годен до 07.2016).

Сравнительную оценку качества испытуемых препаратов осуществляли по основным биологическим показателям: чувствительность; стабильность основных биологических свойств микроорганизмов; дифференцирующие, ингибирующие свойства питательных сред. Контролем питательных сред служили музейные тест-штаммы, полученные из Государственной коллекции патогенных микроорганизмов «ГКПМ-Оболенск». В работе использовали следующие тест-штаммы: E. coli 3912/41 (О5559), E. coli 168/59 (О11158), S. sonnei «S-form», S. flexneri 1a8516, S. dysenteriae I 136, S. aureus Wood-46, а также в смеси – S. sonnei «S-form» + E. coli 168/59 (О11158) и S. dysenteriae I1362 + E. coli 3912/41 (О5559).

Для проведения исследований использовали стандартную взвесь культуры каждого тест-штамма, содержащую 10 единиц по ОСО 42-28-85, доведенную до требуемой концентрации микробных клеток методом 10-кратных разведений. Посевная доза составляла 100 микробных клеток. Для определения дифференцирующих свойств готовили смеси лактозоположительных тест-штаммов эшерихий с лактозоотрицательными тест-штаммами сальмонелл и шигелл в соотношении 1:1.

Учет результатов проводили через 18–20 ч инкубации посевов при температуре 37 оС и визуально определяли количество, размер, морфологию и характер роста и дифференциацию выросших колоний.

БТН-Эндо-агар производства ООО «Биотехновация»

Четырнадцатого мая 2013 г. Росздравнадзором осуществлена государственная регистрация медицинского изделия под названием «Набор реагентов “ИПС-Биотехновация” питательные среды микробиологические, сухие по ТУ 9385-001-16542938-2012». В состав набора входит 23 наименования питательных сред различного назначения. Такая регистрация противоречила основным положениям Постановления № 1416.

Другим нарушением порядка регистрации питательных сред явилось то, что для всего набора реагентов указан класс потенциального риска – 1. Отметим, что номенклатурная классификация медицинских изделий утверждена приказом Минздрава России от 06.06.2012 № 4н. В соответствии с этим документом медицинские изделия для диагностики in vitro разделены на четыре класса. Медицинские изделия, предназначенные для выявления инфекционных агентов, которые могут стать причиной болезней, угрожающих жизни человека с высоким риском распространения, обеспечивающие получение решающей информации для постановки правильного диагноза относятся к классу 3. Другие питательные среды, используемые в медицинских исследованиях, следует относить к классу 2б.

В аналитическом паспорте питательной среды юридический адрес производителя не соответствует юридическому адресу организации, которой выдано регистрационное удостоверение.

Обращает на себя внимание и тот факт, что состав препарата, указанный в аналитическом паспорте данной серии, и состав препарата, указанный на этикетке, отличаются между собой. Из представленных данных непонятно, входит или не входит в состав питательной среды гидролизат сои.

В аналитическом паспорте дается ссылка на методы исследований МУК 4.2.2316-08. Проведенное сравнение данных аналитического паспорта и МУК 4.2.2316-08 показывает, что ни один из штаммов, рекомендованных методическими указаниями для контроля питательных сред, не используется в аналитическом паспорте. Вызывает недоумение использование для контроля следующих штаммов – E. coli К12 240367, S. sonnei 20044, S. flexneri 1355 и S. aureus 20044 и смеси S. sonnei 20044 + E. coli К12 240367.

Результаты биологического контроля качества испытуемых серий агара Эндо представлены в табл. 1, 2. Лактозоположительные тест-штаммы образовывали на всех образцах питательных сред розовые либо малиновые колонии с металлическим блеском или без него. Количество колоний различных штаммов колебалось от 60 до 90. Диаметр выросших колоний Е. coli, как правило, был не менее 1 мм. На среде БТН-Эндо-агар колонии E. coli 3912/41 (О5559) имели красную окраску, в то время как на Эндо-ГРМ-агаре они имели малиновую окраску с ярко выраженным металлическим блеском.

Таблица 1

Характеристика среды Эндо разных производителей по биологическим показателям

Наименование

штамма

Количество колоний, морфология, диаметр мм

БТН-Эндо-агар

Эндо-ГРМ-агар

E. coli 3912/41 (О5559) условно разведение 10-7

82

Рост колоний красного цвета со слабо выраженным металлическим блеском, диаметром 2,0–2,5 мм

90

Рост в виде круглых колоний малинового цвета с ярко выраженным металлическим блеском, диаметром 2,5–3,0 мм

E. coli 168/59 (О11158) условно разведение 10-7

59

Рост колоний розового цвета, диаметром 1,4–1,6 мм

56

Рост в виде круглых колоний малинового цвета с неясно выраженным металлическим блеском, диаметром 1,5–2,5 мм

S. sonnei «S-form» условно разведение 10-7

Рост в виде непрозрачных розовых колоний со слабовыраженным центром, диаметром 1,4–1,6 мм

Рост в виде круглых бесцветных колоний, со слабо выраженным центром, диаметром 1,7–2,0 мм

S. flexneri 1 a 8516 условно разведение 10-7

98

Рост прозрачных колоний диаметром 1,2–1,4 мм

99

Рост прозрачных колоний диаметром 1,2–1,4 мм

S. dysenteriae I 1362 условно разведение 10-7

Роста нет

65

Рост в виде круглых бесцветных прозрачных колоний диаметром 1,5 мм

S. aureus 20044 разведение 10-1

Роста нет

Роста нет

На среде БТН-Эндо-агар отсутствует рост S. dysenteriae I 1362, в то время как на среде Эндо-ГРМ-агар этот штамм вырастает в виде круглых бесцветных прозрачных колоний диаметром до 1,5 мм. Как и ранее на некоторых импортных средах Эндо, данный штамм показывал плохой рост.

Исследование среды БТН-Эндо-агар и Эндо-ГРМ-агар показало, что:

  • контрольные тест-штаммы, указанные в аналитическом паспорте, не соответствуют требованиям МУК 4.2.2316-08;
  • питательная среда не обеспечивает рост штамма S. dysenteriae I 1362, который должен использоваться при контроле данной среды в соответствии с МУК 4.2.2316-08;
  • среда не обеспечивает дифференциации энтеробактерий по признаку ферментации лактозы.

Среда БТН-Эндо-агар производства ООО «Биотехновация» серии № 4 не может быть использована в клинической лабораторной практике при выделении энтеробактерий и их дифференциации по признаку ферментации лактозы.

Агар Эндо производства «Новамед Лтд» (Израиль)

Результаты биологического контроля качества испытуемых серий агара Эндо (Novamed, Израиль) представлены в табл. 2. Лактозоположительные тест-штаммы образовывали на всех образцах питательных сред розовые либо малиновые колонии с металлическим блеском или без него. Количество колоний различных штаммов колебалось от 40 до 90.

Таблица 2

Характеристика среды Эндо разных производителей по биологическим показателям

Количество колоний, морфология, диаметр мм

Наименование

штамма

Агар Эндо Novamed

Эндо-ГРМ-агар

E. coli 3912/41 (О5559) условно разведение 10-7

90

1,8–2,2

Колонии круглые, малинового цвета с металлическим блеском

98

2,5–3,0 мм

Колонии круглые, малинового цвета с металлическим блеском

S. sonnei «S-form» условно разведение 10-7

43

1,8–2,0 мм

Колонии круглые, бесцветные, со слабо выраженным центром

54

2,0–2,3

Колонии круглые, бесцветные, со слабо выраженным центром

E. coli 168/59 (О11158) условно разведение 10-7

47

1,8–2,2

Колонии круглые, малинового цвета с ярко выраженным металлическим блеском

60

2,0–2,7

Колонии круглые, малинового цвета с ярко выраженным металлическим блеском

S. flexneri 1a 8516 условно разведение 10-7

15

1,2–1,4 мм;

Колонии круглые, бесцветные, прозрачные

43

1,4–1,6

Колонии круглые, бесцветные, прозрачные

S. dysenteriae I 1362 условно разведение 10-7

Визуальное отсутствие роста

40

1,6–1,8

Колонии круглые, бесцветные, прозрачные

S. aureus Wood-46 разведение 10-1

Роста нет

Роста нет

S. sonnei «S-form» (разведение 10-6) + E. coli 168/59 (О11158) (разведение 10-6)

Четкая дифференциация

Четкая дифференциация

S. dysenteriae I 1362 (разведение 10-6) + E. coli 3912/41 (О5559) (разведение 10-6)

Нет дифференциации

Четкая дифференциация

На среде Эндо производства «Новамед Лтд» (Израиль) отсутствует рост S. dysenteriae I 1362, в то время как на среде Эндо-ГРМ-агар данный штамм вырастает в виде круглых бесцветных прозрачных колоний диаметром до 1,5 мм. Как и ранее на некоторых импортных средах Эндо, этот штамм показывал плохой рост.

Сравнительное исследование сред Эндо-ГРМ-агар и агар Эндо «Новамед Лтд» (Израиль) показало, что последняя не обеспечивает рост штамма S. dysenteriae I 1362, который должен использоваться при контроле данной среды в соответствии с МУК 4.2.2316-08, и не может быть использована в клинической лабораторной практике при выделении энтеробактерий.

Таким образом, в ходе проведенных сравнительных исследований дифференциально-диагностических свойств питательной среды Эндо производства ООО «Биотехновация» (г. Москва) и Новамед (Израиль) в сравнении с отечественной средой Эндо-ГРМ-агар установлено, что морфология, размер и количество колоний лактозоположительных энтеробактерий имеют незначительные морфологические отличия и соответствуют заявленным производителями характеристикам. Показано, что питательные среды Эндо производства ООО «Биотехновация» и «Новамед Лтд» (Израиль) не обеспечивают в полной мере роста лактозоотрицательных штаммов шигелл, а рост штамма S. dysenteriae I 1362 полностью отсутствует. 

Читайте в ближайших номерах журнала «Справочник заведующего КДЛ»
    Читать >>


    Ваша персональная подборка

      Подписка на статьи

      Чтобы не пропустить ни одной важной или интересной статьи, подпишитесь на рассылку. Это бесплатно.

      Рекомендации по теме

      Мероприятия

      Мероприятия

      Повышаем квалификацию

      Посмотреть

      Самое выгодное предложение

      Самое выгодное предложение

      Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

      Живое общение с редакцией

      А еще...








      Наши продукты






















      © МЦФЭР, 2006 – 2017. Все права защищены.

      Портал zdrav.ru - медицинский портал для медицинских работников. Новости и статьи для главных врачей, медицинских сестер, заместителей главного врача, специалистов по качеству медицинской помощи, заведующих КДЛ, медицинских юристов, экономистов ЛПУ, провизоров и руководителей аптек.

      Информация на данном сайте предназначена только для медицинских работников. Ознакомьтесь с соглашением об использовании.
      Свидетельство о регистрации средства массовой информации ПИ № ФС77-64203 от 31.12.2015.

      Политика обработки персональных данных

      
      • Мы в соцсетях
      Сайт использует файлы cookie. Они позволяют узнавать вас и получать информацию о вашем пользовательском опыте. Это нужно, чтобы улучшать сайт. Если согласны, продолжайте пользоваться сайтом. Если нет – установите специальные настройки в браузере или обратитесь в техподдержку.
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 9400 статей
      — 4000 ответов на вопросы
      — 80 видеосеминаров
      — множество форм и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные калькуляторы

      Вы также получите подарок — журнал в формате pdf

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 9400 статей
      — 4000 ответов на вопросы
      — 80 видеосеминаров
      — множество форм и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные калькуляторы

      Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      ×
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 9400 статей
      — 4000 ответов на вопросы
      — 80 видеосеминаров
      — множество форм и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные калькуляторы

      Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      ×
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 9400 статей
      — 4000 ответов на вопросы
      — 80 видеосеминаров
      — множество форм и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные калькуляторы

      Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      ×