text

🎁 УЛЁТНЫЕ СКИДКИ 30%! Поймать »

Здравоохранение

Лабораторная диагностика дифтерии

  • 9 апреля 2016
  • 729

В статье мы продолжим рассматривать особенности лабораторной диагностики дифтерии.

Здесь рассматриваются этапы проведения исследования, в частности, мероприятия по взятию и транспортировке материала, основные обязанности сотрудников, осуществляющих проведение исследования, а также последовательность и содержание непосредственно диагностических мероприятий.

Внимание! Для скачивания доступна новая книга:  «Молекулярно-биологические исследования» ,

Взятие и транспортировка материалов для лабораторной диагностики дифтерии

Взятие материала проходит со следующими особенностями:

  • Для взятия материла необходимо использовать сухие ватные тампоны, имеющие форму капли;
  • Материал из носа и полости ротоглотки берут отдельным тампонами, натощак, через 2 часа после еды.
  • Взятие материала происходит при ярком освещении,  необходимо использовать шпатель, не касаясь тампоном языка и внутренней поверхности щек и зубов.
  • Одним тампоном забирают материал с миндалин, неба и задней полости глотки, при наличии налетов материал нужно брать с границы пораженных и здоровых тканей, слегка надавливая на них тампоном.
  • Другим тампоном, который вводится сначала в один, потом в другой носовой ход, собирают материал из носа. Материал собирается со стенок и перегородки, не касаясь наружной части носа.
  • При прямой ларингоскопии материал необходимо взять непосредственно из гортани.
  • При взятии материала с пораженного участка необходимо предварительно обработать его поверхность стерильной салфеткой, смоченной физраствором, осторожно отодвинув корочки и струпы. После этого с пораженного участка можно взять секрет.

Доставка тампонов в лабораторию должна быть осуществлена в течение 3 часов после сбора материала. В холодное время года исследуемый материал необходимо доставлять в лабораторию в специальных сумах-термосах.

Если материал невозможно доставить в лабораторию в положенные сроки, при проведении исследования в медучреждении полученный материал засевают площадкой, с последующим рассевом на одну чашку Петри с питательной средой, разделенной пополам. После этого материалы необходимо поместить в термостат при температуре в 37°C до следующего утра, после чего они доставляются в лабораторию.

При отсутствии возможности организации посева материала чашечным методом можно засевать материал в пробирки  с транспортной средой  для сохранности и подращивания возбудителей дифтерии. Материал, собранный сухими тампонами и помещенный в пробирки, материал, засеянный в пробирки с транспортной средой, или материал, засеянный чашечным методом, должен иметь маркировку с нумерацией материала, иметь пояснительную документацию.

В сопроводительном письме необходимо указать данные обследуемого лица (ФИО, возраст, адрес), название медучреждения, локализацию взятого материала, а также дату, время и цель исследования.

Организационная работа

  1. Работники медицинских учреждений, ответственные за транспортировку и взятие материала при проведении обследования на дифтерию, должны согласовать методику взятия материала, условия его транспортирования, а также возможности применения транспортной среды с врачами-бактериологами.
  2. Медработники, осуществляющие сбор и посев материала, должны не реже одного раза в год проходить инструктаж в лаборатории, проводящей исследования на дифтерию.
  3. Врачи-бактериологи должны повышать свою квалификацию на специальных курсах профессионального усовершенствования не реже одного раза в три года.

Проведение бактериологического исследования

Исследование проводится последовательно, в течение 4-5 дней.


Первый день исследования

В первый день проходит посев материала. Материал, полученный из зева, носа или других пораженных мест, засевают раздельно на поверхность питательной среды (КТА или Клауберг II), разлитой в чашки Петри (чашечный метод, рисунок 1).

Лабораторная диагностика дифтерии

Посев  от одного больного осуществляется на одну чашку, половина поверхности чашки  используется для посева материала из носа, вторая часть – для посева материала из ротоглотки.

Засеянный материал помещают в термостат для его инкубации при температуре в 37°C.

Второй день исследования

Через 24 часа после посева материала колонии, выросшие на чашках, просматривают визуально или с помощью медицинского микроскопа. После этого отбирают чашки с колониями, похожими на дифтерийные, для дальнейшей идентификации их по всем тестам.

Из подозрительных или сомнительных колоний готовят препараты-мазки. Оценка морфологии не позволяет определить видовую принадлежность микроорганизмов, однако позволяет при обнаружении коринеформных клеток предположительно отнести их к роду Corynebacterium, чтобы в дальнейшем проверить их по всем тестам. В случае обнаружения других форм микроорганизмов, например, дрожжей, споровых палочек и кокков, дальнейшее исследование этих колоний прекращается.

В случае обнаружения подозрительных колоний, по морфологическим свойствам похожих на коринебактерии, необходимо через 24 часа  их роста провести изучение их токсигенных свойств. Токсигенные свойства проверяются не менее, чем в двух изолированных колониях, путем посева половины каждой колонии на среду для выявления токсигенности  и среду Пизу, другую – в пробирку с сывороточным агаром для сохранения и роста чистой культуры.

Если невозможно снять половину колонии через 24 часа ее роста для проверки токсигенности и на среду Пизу, то необходимо использовать материал целой колонии. В случае недостаточного количества и маленького размера колоний, которые выросли через 24 часа, необходимо смешать однотипные колонии по типу и размеру в нескольких бляшках и произвести посев в среду Пизу. После этого чашку с пробой на токсигенность и Пизу необходимо поместить в термостат.

Емкости с первичным посевом материала вновь помещаются в термостат на 24 часа, просматривают их на третьи сутки после начала роста (через 48 часов).

Предварительные сведения о наличии C. Diphtheriae могут быть выданы при наличии в материале большого количества однотипных подозрительных колоний на чашке первичного посева.

Третий день исследований

Учитывается результат проб на токсигенность и цистиназу. В случае нахождения линий преципитации, а также при положительной пробе Пизу дается ответ о выделении токсигенных коринебактерий дифтерии. Чистая культура проверяется с целью изучения биохимических свойств.

Через 48 часов повторно просматриваются чашки первичного посева в микроскопе, ставятся пробы на токсигенность, цистиназу и отсев колоний на скошенный сывороточный агар. Выдается ответ об отсутствии коринебактерий дифтерии.

При обнаружении фермента цистиназы и отсутствии уреазы дается предварительный ответ о выделении микроба дифтерии.

Четвертый день исследования

Проверяются токсигенные свойства культуры, выделенной на третий день исследования, при обнаружении преципитации дается ответ о выделении коринебактерий дифтерии. Определяются и учитываются биохимические свойства культуры, выделенной на второй день исследования. Выдается бактериологический ответ о выделении нетоксигенных бактерий дифтерии.

Пятый день исследования

Выдается бактериологический ответ на наличие токсигенных или нетоксигенных бактерий дифтерии с указанием биологического варианта.

Бактериологическое заключение

Заключить, что выделенная культура является токсигенной C. diphtheriae варианта Gravis или Mitis, позволяют следующие выявленные признаки: наличие линий преципитации, положительный ответ на цистиназу и отрицательный – на уреазу, характерные биохимические, культуральные и морфологические свойства культуры.

Бактериологический ответ бывает отрицательным при выделении ложнодифтерийной палочки Гофмана или других псевдо-культур.

Рекомендации по теме

Мероприятия

Мероприятия

Повышаем квалификацию

Посмотреть

Самое выгодное предложение

Самое выгодное предложение

Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

Мы в соцсетях
А еще:
Сайт предназначен для медицинских работников!


Материалы для zdrav.ru готовят лучшие эксперты в сфере здравоохранения. Чтобы защитить их авторские права, многие статьи на нашем сайте закрыты

Подтвердите ваш статус медработника - регистрация займет одну минуту.

Пакет готовых инструкций, чтобы пройти проверку Росздравнадзора в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
Зарегистрироваться
Сайт предназначен для медицинских работников!


Материалы для zdrav.ru готовят лучшие эксперты в сфере здравоохранения. Чтобы защитить их авторские права, многие статьи на нашем сайте закрыты

Подтвердите ваш статус медработника - регистрация займет одну минуту.

Пакет готовых инструкций, чтобы пройти проверку Росздравнадзора в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
Зарегистрироваться
×
Журнал
Гость, Ваш бесплатный доступ к журналу «Справочник заведующего КДЛ» сгорает через

Гость, вам предоставлен VIP-доступ к журналу «Справочник заведующего КДЛ»:
возможность скачивать шаблоны • доступ к видеотренингам • книги для КДЛ
Активировать доступ  
Сайт использует файлы cookie. Они позволяют узнавать вас и получать информацию о вашем пользовательском опыте. Это нужно, чтобы улучшать сайт. Посещая страницы сайта и предоставляя свои данные, вы позволяете нам предоставлять их сторонним партнерам. Если согласны, продолжайте пользоваться сайтом. Если нет – установите специальные настройки в браузере или обратитесь в техподдержку.