Мутации V617F: результаты скрининга в ЛПУ

171

Соматическая мутация v617f в гене янус-киназы 2 выявлена в 2005 году.

Сегодня она распространена по всему миру, но наиболее частыми ее носителями являются жители Китая, Дании  и США.

Пациенты, у которых впоследствии была обнаружена данная мутация, чаще всего попадают в лечебное учреждение с диагнозом «острое нарушение мозгового кровообращения» либо с атеротромботическими осложнениями ишемической болезни сердца.

Учитывая высокий тромбогенный потенциал v617f и ее участие в патогенезе хронических миелоидных опухолей, целесообразным было бы включение теста на ее выявление с перечень лабораторных исследований программы диспансеризации у лиц старше 45 лет.

Актуальность проведения скрининговых исследований на выявление мутации  v617f в гене янус-киназы 2

Соматическая мутация v617f является причиной активации JAK-STAT сигнального пути вне зависимости от его физиологической рецепторной регуляции.

Пролиферативная активность миелоидного ростка кроветворения, обусловленная ею, зачастую приводит к возникновению хронических Рh-негативных миелоидных опухолей, а также миелодиспластического синдрома.

Согласно клиническим рекомендациям Всемирной организации здравоохранения, с 2008 года выявление мутации v617f является одним из диагностических критериев при этих патологиях.

Доказано, что носительство мутации v617f провоцирует процесс активации тромбоцитов, не зависящий от уровня циркулирующих в крови клеток. Это в несколько раз повышает риск артериальных и венозных тромбозов, в том числе тромбозов сосудов головного мозга, сердца, кишечника. В связи с этим можно предположить, что у большей части пациентов с данной генетической поломкой заболевание носит латентных характер либо имеет признаки иной патологии.

Процесс проведения скрининга сейчас находится на стадии обсуждения, так как до сегодняшнего времени исследований распространенности мутации v617f в гене янус-киназы 2 среди населения России не проводилось. 

Читайте также в журнале «Справочник заведующего КДЛ»

Исследование крови пациентов на выявление мутации  v617f в гене янус-киназы 2: результаты эксперимента

Для того, чтобы определить частоту встречаемости соматической мутации v617f в гене янус-киназы 2, были взяты образцы крови пациентов многопрофильных лечебных учреждений г. Красноярска.

В ходе исследования были проанализированы 2677 образцов венозной крови, из них:

  • 1397 образцов – от больных, обратившихся за медицинской помощью или проходящих диспансеризацию в поликлиниках;
  • 1280 образцов – от пациентов, проходивших стационарное лечение. 

Забор крови производился из локтевой вены в стандартные вакутейнеры с ЭДТА. Образцы исследовались на анализаторе «Sysmex XT-2000i» (Япония). Помимо этого, образцы пулировались для получения равной пропорции ядросодержащих клеток.

В один пул входило 7 отдельных образцов. Выделение ДНК из лейкоцитов цельной крови выполнялось с применением набора «ДНК-сорб-В». Выявление мутации v617f в гене янус-киназы 2 выполнялось по методике аллель-специфической ПЦР в режиме реального времени.

Статистическая обработка проводилась с использованием пакета программ Statistica 10.0. Описательная статистика представлена в виде медианы, а также минимального и максимального значений.

Половозрастной состав всех 2677 пациентов и их гематологические показатели представлены в Таблице 1.

Характеристика пациентов, включенных в исследование

Показатели

Амбулаторные пациенты

Пациенты стационара

Общее количество проб

1397

1280

Мужчины/женщины (%)

44/56

49/51

Возраст, годы

54 (29-100)

56,0 (15,0-92,0)

Гемоглобин, г/л

мужчины/женщины

151,0 (96,0-178,0)/

134,0 (59,0-177,0)

128,0 (41,0–178,0)/

120,0 (30,0–164,0)

Эритроциты, ×1012/л

мужчины/женщины

4,9 (3,2–6,1)/4,5 (2,2–6,4)

4,2 (1,5–5,8/ 4,0 (1,9–5,6)

Тромбоциты, × 106/л

225,0 (30,0–694,0

206,0 (127,0–801,0)

Лейкоциты, × 106/л

6,4 (2,4–26,6)

8,3 (2,2–176,8)

Из таблицы видно, что у пациентов стационара отмечаются более низкие значения эритроцитов и гемоглобина, и более высокие уровни лейкоцитов.

В целом отклонения от нормы в результатах анализов крови выявлены у 44% пациентов поликлинических отделений и у 81% пациентов стационаров.  

Согласно полученным результатам, мутация v617f в гене янус-киназы 2 среди 1397 проб венозной крови амбулаторных пациентов в возрасте от 29 до 100 лет (Ме — 54 года) была обнаружена у 15 пациентов (1,1%) в возрасте от 45 до 79 лет (Ме — 48 лет), а среди 1280 проб крови пациентов стационара она выявлена в 25 пробах у 19 чел. (0,7%) в возрасте от 51 до 90 лет (Ме — 65 лет).

Видно, что возраст носителей мутации из числа пациентов амбулатории значительно ниже, чем среди стационарных больных.

Таблица 2

Гематологические показатели амбулаторных пациентов с выявленной мутацией V617F JAK2

Возраст, лет

Пол

Аллельная нагрузка V617F JAK2

Гемоглобин (г/л)

Эритроциты (×1012/л)

Тромбоциты (× 106/л)           

Лейкоциты (×106/л)

46

М

0,05% 

171

  6,10  

147

8,62

47

Ж

0,07%

156

5,34

309

8,48

46

М

0,10% 

160

5,37

210

6,63

46

М

0,18%

153

4,96

282

6,34

49

Ж

0,19%

139

5,08

392

7,05

45

М

0,24% 

172

5,75

202

8,59

47

М

0,24% 

167

5,50

235

6,06

54

Ж

0,26%

134

4,74

269

5,90

79

Ж

0,29%

141

4,92

209

6,00

76

Ж

2,00% 

98

4,15

115

6,70

48

М

3,80% 

139

4,94

321

7,80

48

М

4,10%

163

5,64

364

6,90

58

М

8,20% 

153

5,23

631

9,30

56

М

8,50% 

149

4,80

217

9,43

77

М

40,40%

100

5,52

317

7,90

У трех из семи пациентов амбулатории данные гемограммы находились в пределах нормы. У одной женщины наблюдалось снижение уровня гемоглобина т тромбоцитов, у одного пациента отмечался умеренный лейкоцитоз и тромбоцитоз. Кровь больного с самой большой нагрузкой мутантного аллеля (40,4%) характеризовалась низким уровнем гемоглобина при уровне эритроцитов на верхней границе референсного интервала.

Лишь в двух случаях - у пациента с высоким уровнем тромбоцитов и у пациентки с тромбоцитопенией и низким гемоглобином – у врача были основания заподозрить наличие хронической миелоидной опухоли (ХМО).

Значимость выявления мутации v617f для ранней диагностики тромбогенныхь осложнений и ХМО

Нужно отметить, что у 13 пациентов с клинически значимым для хронической миелоидной опухоли уровнем аллельной нагрузки 8 человек имели выраженный лейкоцитоз, и лишь 5 человек – высокий тромбоцитоз.

Однако стоит сказать, что даже относительно небольшой уровень клеток костного мозга и периферической крови с мутацией v617f может стать причиной серьезных патологических сдвигов за счет участия янус-киназы 2 в цитокиновой сигнализации с последующей картиной «цитокинового шторма» и хронического воспаления.

Поскольку из 2079 образцов крови со сдвигами гемограммы мутация выявилась лишь в 24 образцах, и около половины выявленных носителей мутации не имели каких-либо существенных изменений формулы крови, несомненным пока остается тот факт, что результаты клинического исследования крови имеют очень низкую прогностическую значимость в отношении обнаружения соматической мутации v617f в гене янус-киназы 2 для ранней диагностики хронических миелоидных опухолей.

Результаты проведенного исследования\ свидетельствуют том, что основные клинические проявления ХМО встречаются при аллельной нагрузке более 1%. Однако и пациенты с более низкой аллельной нагрузкой способны демонстрировать ее прогрессивное увеличение.

Следует отметить, что своевременное обнаружение даже небольших уровней циркулирующих в крови клональных клеток с данной мутацией даст возможность на ранней стадии диагностировать ХМО и связанные с ней тромбогенные осложнения.

В проведенном исследовании впервые на территории России была опробована методика скрининга больных на носительство онкогенной мутации v617f с использованием технологии аллель-специфической ПЦР в пулированных образцах крови.

Эта генетическая поломка часто выявляется у обследованного контингента, поэтому включение данного анализа в перечень лабораторных исследований в рамках проведения диспансеризации позволит вовремя выявлять группы повышенного тромбогенного риска и своевременно диагностировать онкогематологические патологии.

Читайте в ближайших номерах журнала «Справочник заведующего КДЛ»
    Читать >>


    Ваша персональная подборка

      Подписка на статьи

      Чтобы не пропустить ни одной важной или интересной статьи, подпишитесь на рассылку. Это бесплатно.

      Рекомендации по теме

      Мероприятия

      Мероприятия

      Повышаем квалификацию

      Посмотреть

      Самое выгодное предложение

      Самое выгодное предложение

      Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

      Живое общение с редакцией

      А еще...






      Наши продукты




















      © МЦФЭР, 2006 – 2017. Все права защищены.

      Портал zdrav.ru - медицинский портал для медицинских работников. Новости и статьи для главных врачей, медицинских сестер, заместителей главного врача, специалистов по качеству медицинской помощи, заведующих КДЛ, медицинских юристов, экономистов ЛПУ, провизоров и руководителей аптек.

      Информация на данном сайте предназначена только для медицинских работников. Ознакомьтесь с соглашением об использовании.
      Свидетельство о регистрации средства массовой информации Эл № ФС77-38302 от 30.11.2009

      
      • Мы в соцсетях
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 9400 статей
      — 4000 ответов на вопросы
      — 80 видеосеминаров
      — множество форм и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные калькуляторы

      Вы также получите подарок — журнал в формате pdf

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 9400 статей
      — 4000 ответов на вопросы
      — 80 видеосеминаров
      — множество форм и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные калькуляторы

      Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      ×
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 9400 статей
      — 4000 ответов на вопросы
      — 80 видеосеминаров
      — множество форм и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные калькуляторы

      Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      ×
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 9400 статей
      — 4000 ответов на вопросы
      — 80 видеосеминаров
      — множество форм и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные калькуляторы

      Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль