text

🎁 УЛЁТНЫЕ СКИДКИ 30%! Поймать »

Здравоохранение

Мутации V617F: результаты скрининга в ЛПУ

  • 30 сентября 2017
  • 243

Соматическая мутация v617f в гене янус-киназы 2 выявлена в 2005 году.

Сегодня она распространена по всему миру, но наиболее частыми ее носителями являются жители Китая, Дании  и США.

Внимание! Для скачивания доступна новая книга:  «Молекулярно-биологические исследования» ,

Пациенты, у которых впоследствии была обнаружена данная мутация, чаще всего попадают в лечебное учреждение с диагнозом «острое нарушение мозгового кровообращения» либо с атеротромботическими осложнениями ишемической болезни сердца.

Учитывая высокий тромбогенный потенциал v617f и ее участие в патогенезе хронических миелоидных опухолей, целесообразным было бы включение теста на ее выявление с перечень лабораторных исследований программы диспансеризации у лиц старше 45 лет.

Актуальность проведения скрининговых исследований на выявление мутации  v617f в гене янус-киназы 2

Соматическая мутация v617f является причиной активации JAK-STAT сигнального пути вне зависимости от его физиологической рецепторной регуляции.

Пролиферативная активность миелоидного ростка кроветворения, обусловленная ею, зачастую приводит к возникновению хронических Рh-негативных миелоидных опухолей, а также миелодиспластического синдрома.

Согласно клиническим рекомендациям Всемирной организации здравоохранения, с 2008 года выявление мутации v617f является одним из диагностических критериев при этих патологиях.

Доказано, что носительство мутации v617f провоцирует процесс активации тромбоцитов, не зависящий от уровня циркулирующих в крови клеток. Это в несколько раз повышает риск артериальных и венозных тромбозов, в том числе тромбозов сосудов головного мозга, сердца, кишечника. В связи с этим можно предположить, что у большей части пациентов с данной генетической поломкой заболевание носит латентных характер либо имеет признаки иной патологии.

Процесс проведения скрининга сейчас находится на стадии обсуждения, так как до сегодняшнего времени исследований распространенности мутации v617f в гене янус-киназы 2 среди населения России не проводилось. 


Исследование крови пациентов на выявление мутации  v617f в гене янус-киназы 2: результаты эксперимента

Для того, чтобы определить частоту встречаемости соматической мутации v617f в гене янус-киназы 2, были взяты образцы крови пациентов многопрофильных лечебных учреждений г. Красноярска.

В ходе исследования были проанализированы 2677 образцов венозной крови, из них:

  • 1397 образцов – от больных, обратившихся за медицинской помощью или проходящих диспансеризацию в поликлиниках;
  • 1280 образцов – от пациентов, проходивших стационарное лечение. 

Забор крови производился из локтевой вены в стандартные вакутейнеры с ЭДТА. Образцы исследовались на анализаторе «Sysmex XT-2000i» (Япония). Помимо этого, образцы пулировались для получения равной пропорции ядросодержащих клеток.

В один пул входило 7 отдельных образцов. Выделение ДНК из лейкоцитов цельной крови выполнялось с применением набора «ДНК-сорб-В». Выявление мутации v617f в гене янус-киназы 2 выполнялось по методике аллель-специфической ПЦР в режиме реального времени.

Статистическая обработка проводилась с использованием пакета программ Statistica 10.0. Описательная статистика представлена в виде медианы, а также минимального и максимального значений.

Половозрастной состав всех 2677 пациентов и их гематологические показатели представлены в Таблице 1.

Характеристика пациентов, включенных в исследование

Показатели

Амбулаторные пациенты

Пациенты стационара

Общее количество проб

1397

1280

Мужчины/женщины (%)

44/56

49/51

Возраст, годы

54 (29-100)

56,0 (15,0-92,0)

Гемоглобин, г/л

мужчины/женщины

151,0 (96,0-178,0)/

134,0 (59,0-177,0)

128,0 (41,0–178,0)/

120,0 (30,0–164,0)

Эритроциты, ×1012/л

мужчины/женщины

4,9 (3,2–6,1)/4,5 (2,2–6,4)

4,2 (1,5–5,8/ 4,0 (1,9–5,6)

Тромбоциты, × 106/л

225,0 (30,0–694,0

206,0 (127,0–801,0)

Лейкоциты, × 106/л

6,4 (2,4–26,6)

8,3 (2,2–176,8)

Из таблицы видно, что у пациентов стационара отмечаются более низкие значения эритроцитов и гемоглобина, и более высокие уровни лейкоцитов.

В целом отклонения от нормы в результатах анализов крови выявлены у 44% пациентов поликлинических отделений и у 81% пациентов стационаров.  

Согласно полученным результатам, мутация v617f в гене янус-киназы 2 среди 1397 проб венозной крови амбулаторных пациентов в возрасте от 29 до 100 лет (Ме — 54 года) была обнаружена у 15 пациентов (1,1%) в возрасте от 45 до 79 лет (Ме — 48 лет), а среди 1280 проб крови пациентов стационара она выявлена в 25 пробах у 19 чел. (0,7%) в возрасте от 51 до 90 лет (Ме — 65 лет).

Видно, что возраст носителей мутации из числа пациентов амбулатории значительно ниже, чем среди стационарных больных.

Таблица 2

Гематологические показатели амбулаторных пациентов с выявленной мутацией V617F JAK2

Возраст, лет

Пол

Аллельная нагрузка V617F JAK2

Гемоглобин (г/л)

Эритроциты (×1012/л)

Тромбоциты (× 106/л)           

Лейкоциты (×106/л)

46

М

0,05% 

171

  6,10  

147

8,62

47

Ж

0,07%

156

5,34

309

8,48

46

М

0,10% 

160

5,37

210

6,63

46

М

0,18%

153

4,96

282

6,34

49

Ж

0,19%

139

5,08

392

7,05

45

М

0,24% 

172

5,75

202

8,59

47

М

0,24% 

167

5,50

235

6,06

54

Ж

0,26%

134

4,74

269

5,90

79

Ж

0,29%

141

4,92

209

6,00

76

Ж

2,00% 

98

4,15

115

6,70

48

М

3,80% 

139

4,94

321

7,80

48

М

4,10%

163

5,64

364

6,90

58

М

8,20% 

153

5,23

631

9,30

56

М

8,50% 

149

4,80

217

9,43

77

М

40,40%

100

5,52

317

7,90

У трех из семи пациентов амбулатории данные гемограммы находились в пределах нормы. У одной женщины наблюдалось снижение уровня гемоглобина т тромбоцитов, у одного пациента отмечался умеренный лейкоцитоз и тромбоцитоз. Кровь больного с самой большой нагрузкой мутантного аллеля (40,4%) характеризовалась низким уровнем гемоглобина при уровне эритроцитов на верхней границе референсного интервала.

Лишь в двух случаях - у пациента с высоким уровнем тромбоцитов и у пациентки с тромбоцитопенией и низким гемоглобином – у врача были основания заподозрить наличие хронической миелоидной опухоли (ХМО).


Значимость выявления мутации v617f для ранней диагностики тромбогенныхь осложнений и ХМО

Нужно отметить, что у 13 пациентов с клинически значимым для хронической миелоидной опухоли уровнем аллельной нагрузки 8 человек имели выраженный лейкоцитоз, и лишь 5 человек – высокий тромбоцитоз.

Однако стоит сказать, что даже относительно небольшой уровень клеток костного мозга и периферической крови с мутацией v617f может стать причиной серьезных патологических сдвигов за счет участия янус-киназы 2 в цитокиновой сигнализации с последующей картиной «цитокинового шторма» и хронического воспаления.

Поскольку из 2079 образцов крови со сдвигами гемограммы мутация выявилась лишь в 24 образцах, и около половины выявленных носителей мутации не имели каких-либо существенных изменений формулы крови, несомненным пока остается тот факт, что результаты клинического исследования крови имеют очень низкую прогностическую значимость в отношении обнаружения соматической мутации v617f в гене янус-киназы 2 для ранней диагностики хронических миелоидных опухолей.

Результаты проведенного исследования\ свидетельствуют том, что основные клинические проявления ХМО встречаются при аллельной нагрузке более 1%. Однако и пациенты с более низкой аллельной нагрузкой способны демонстрировать ее прогрессивное увеличение.

Следует отметить, что своевременное обнаружение даже небольших уровней циркулирующих в крови клональных клеток с данной мутацией даст возможность на ранней стадии диагностировать ХМО и связанные с ней тромбогенные осложнения.

В проведенном исследовании впервые на территории России была опробована методика скрининга больных на носительство онкогенной мутации v617f с использованием технологии аллель-специфической ПЦР в пулированных образцах крови.

Эта генетическая поломка часто выявляется у обследованного контингента, поэтому включение данного анализа в перечень лабораторных исследований в рамках проведения диспансеризации позволит вовремя выявлять группы повышенного тромбогенного риска и своевременно диагностировать онкогематологические патологии.

Рекомендации по теме

Мероприятия

Мероприятия

Повышаем квалификацию

Посмотреть

Самое выгодное предложение

Самое выгодное предложение

Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

Мы в соцсетях
А еще:
Сайт предназначен для медицинских работников!


Материалы для zdrav.ru готовят лучшие эксперты в сфере здравоохранения. Чтобы защитить их авторские права, многие статьи на нашем сайте закрыты

Подтвердите ваш статус медработника - регистрация займет одну минуту.

Пакет готовых инструкций, чтобы пройти проверку Росздравнадзора в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
Зарегистрироваться
Сайт предназначен для медицинских работников!


Материалы для zdrav.ru готовят лучшие эксперты в сфере здравоохранения. Чтобы защитить их авторские права, многие статьи на нашем сайте закрыты

Подтвердите ваш статус медработника - регистрация займет одну минуту.

Пакет готовых инструкций, чтобы пройти проверку Росздравнадзора в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
Зарегистрироваться
×
Журнал
Гость, Ваш бесплатный доступ к журналу «Справочник заведующего КДЛ» сгорает через

Гость, вам предоставлен VIP-доступ к журналу «Справочник заведующего КДЛ»:
возможность скачивать шаблоны • доступ к видеотренингам • книги для КДЛ
Активировать доступ  
Сайт использует файлы cookie. Они позволяют узнавать вас и получать информацию о вашем пользовательском опыте. Это нужно, чтобы улучшать сайт. Посещая страницы сайта и предоставляя свои данные, вы позволяете нам предоставлять их сторонним партнерам. Если согласны, продолжайте пользоваться сайтом. Если нет – установите специальные настройки в браузере или обратитесь в техподдержку.