Основные источники аналитических погрешностей коагулологических исследований по данным ФСВОК

721

На основании данных внешней оценки качества коагулологических исследований крови в рамках ФСВОК методом дисперсионного анализа оценен вклад следующих источников аналитических погрешностей в общую погрешность результата исследования:

  • влияние метода/набора реагентов от одного производителя;
  • систематическая погрешность конкретной лаборатории — случайный фактор в совокупности лабораторий;
  • случайная междневная погрешность методики (воспроизводимость);
  • случайная внутридневная погрешность методики (повторяемость).

Внешняя оценка качества коагулологических исследований крови в нашей стране осуществляется в рамках Федеральной системы внешней оценки качества клинических лабораторных исследований (ФСВОК) на протяжении всех 20 лет ее существования.

В рамках раздела ФСВОК «Коагулология» внешней оценке подлежит качество определения шести показателей системы гемостаза: процента протромбина по Квику, международного нормализованного отношения (МНО), активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ), тромбинового времени, фибриногена и антитромбина.

Участники данного раздела получают три раза в год наборы контрольных образцов лиофилизированной плазмы крови человека с различными уровнями определяемых показателей.

Каждый набор содержит по два образца, обозначаемых буквенными индексами «K» и «L», которые в свою очередь могут представлять собой один и тот же контрольный материал или же имитировать пробы, взятые от двух различных пациентов.

Образцы должны быть исследованы в разные дни (в разных аналитических сериях), по два измерения каждого из показателей, определяемых в данной лаборатории (на рисунке).

Основные источники аналитических погрешностей коагулологических исследований по данным ФСВОК

Рис. Схема анализа контрольных образцов

Методика внешней оценки качества

В случае, если «K» и «L» — различные образцы, результаты их анализа оцениваются отдельно. По результатам двух параллельных измерений каждого образца рассчитывают среднее значение (Основные источники аналитических погрешностей коагулологических исследований по данным ФСВОК) и относительный размах R между ними:

Основные источники аналитических погрешностей коагулологических исследований по данным ФСВОК = X1 + X2 / 2,
R = (X1 — X2) / Основные источники аналитических погрешностей коагулологических исследований по данным ФСВОК x 100%,

где X1 и X2 — соответственно результаты 1-го и  2-го измерений определяемого показателя.

Величина Основные источники аналитических погрешностей коагулологических исследований по данным ФСВОК используется для оценки правильности полученных результатов (степени близости среднего к целевому значению; характеризуется величиной относительного смещения), а величина R — для оценки их повторяемости (степени близости результатов измерений между собой).

Величину относительного смещения (B) рассчитывают по формуле:

В = Основные источники аналитических погрешностей коагулологических исследований по данным ФСВОК ‒ ЦЗ / ЦЗ x 100%,

где ЦЗ — целевое значение, рассчитывается как среднее арифметическое величин Основные источники аналитических погрешностей коагулологических исследований по данным ФСВОК в группе лабораторий, использовавших одну и ту же методику анализа (или по всем лабораториям, проанализировавшим данный контрольный образец, если код метода/набора реагентов не был указан, отнесен к «прочим» или размер группы оказался менее пяти лабораторий).

Если распределение величин Основные источники аналитических погрешностей коагулологических исследований по данным ФСВОК имеет положительную асимметрию и может быть нормализовано логарифмированием, в качестве целевого значения используется среднее геометрическое. Под методикой, образующей группу, обычно понимают наборы реагентов одного производителя, но в некоторых случаях могут быть исключения, если наборы от одного производителя дают существенно различные результаты, для которых производителем установлены различные референтные интервалы.

В качестве критериев оценки допустимости величин B и R экспертами ФСВОК установлены фиксированные пределы в процентах. Кроме них, установлены также допуски на величину ошибки единичного измерения, которые применяются в тех редких случаях, когда участником был представлен только один результат измерения контрольного образца вместо двух. Размах в этом случае не оценивается.

В случае, если образцы «K» и «L» в наборе представлены одним и тем же пулом плазмы, величина Основные источники аналитических погрешностей коагулологических исследований по данным ФСВОК рассчитывается по всем четырем результатам измерений:

Основные источники аналитических погрешностей коагулологических исследований по данным ФСВОК = (XK1 + XK2 + XL1 + XL2) / 4,

где XK1 — 1-е измерение образца «K», XK2 — 2-е измерение образца «K», XL1 — 1-е измерение образца «L», XL2 — 2-е измерение образца «L». Целевое значение и смещение среднего (B) рассчитываются так же, как и в предыдущем случае.

Поскольку образцы «K» и «L» исследуются в разные дни, это позволяет рассчитать междневной относительный размах между средними значениями в двух образцах (Q), который используется для оценки воспроизводимости (степени близости результатов измерений образцов «K» и «L», выполненных в разные дни):

Q = (XK ‒ XL) / Основные источники аналитических погрешностей коагулологических исследований по данным ФСВОК x 100%,

где XK и XL — соответственно средние значения определяемого показателя в образцах «K» и «L», вычисляются по формулам:

XK = (XK1 + XK2) /2, XL = (XL1 + XL2) / 2.

Оценкой повторяемости служит средний относительный внутридневной размах (Основные источники аналитических погрешностей коагулологических исследований по данным ФСВОК):

Основные источники аналитических погрешностей коагулологических исследований по данным ФСВОК = (RK + RL) / 2,

где RK и RL — соответственно значения относительных размахов между двумя параллельными измерениями образцов «K» и «L», выполненными в один день, вычисляются по формулам:

RK = (XK1 ‒ XK2) / XK x 100%, RL = (XL1 ‒ XL2) / XL x 100%.

В данной схеме внешней оценке качества подлежат три вида аналитических погрешностей, ответственность за которые несет непосредственно лаборатория: правильность, воспроизводимость и повторяемость. Для величин B, Q и R установлены фиксированные допуски в процентах. При этом для случая, когда были представлены результаты анализа только одного образца («K» или «L»), установлены более широкие пределы для величины B. Величины, выходящие за пределы допустимых значений, отмечаются звездочкой, что требует от лаборатории провести ревизию своей аналитической системы и методики внутрилабораторного контроля качества.

Читайте также в журнале «Справочник заведующего КДЛ»

Лабораторная диагностика

В обеих схемах внешней оценки качества погрешность аналитического метода, присущая набору реагентов конкретного производителя, но не лаборатории, использующей данные реагенты, выносится за рамки и не подлежит оценке, поскольку целевые значения устанавливаются отдельно для каждой группы одинаковых реагентов.

Дисперсионный анализ совокупности результатов

При индивидуальной внешней оценке результатов конкретной лаборатории их смещение рассматривается как лабораторная составляющая систематической погрешности методики.

Однако распределение результатов анализа конкретного пула плазмы всеми участниками имеет вид, подобный распределению Гаусса (в линейной или логарифмической шкале), как в целом, так и в группе лабораторий, использовавших один и тот же набор реагентов.

Это означает, что смещение лаборатории, будучи систематической погрешностью для каждой лаборатории по отдельности, для совокупности лабораторий является случайной величиной и может быть представлена статистическими параметрами: средним и дисперсией (коэффициентом вариации).

Схема межлабораторного эксперимента с двумя одинаковыми контрольными образцами может быть описана линейной моделью дисперсионного анализа как сумма погрешностей различного происхождения.

Поскольку каждая лаборатория в рамках одного контрольного цикла может использовать только один метод/набор реагентов, а контрольный образец является расходуемым и не может быть проанализирован в разных лабораториях и даже в одной лаборатории в разных аналитических сериях, такая модель дисперсионного анализа называется группированным планом:

Xijkl = μ + γi +  δij + εijk + ξijkl,

где

Xijkl — результат l-го измерения в  k-ой аналитической серии в  j-ой лаборатории i-м методом;
μ -математическое ожидание измеряемой физической величины (принятое опорное значение);
γi— погрешность i-го метода/набора реагентов (i = 1, …, I), характеризуется коэффициентом межнаборной вариации CVнабор, оценка суммы μ и γi используется в качестве целевого значения: ЦЗ = Основные источники аналитических погрешностей коагулологических исследований по данным ФСВОК;
δij — погрешность j-ой лаборатории (j = 1, …, Ji), характеризуется коэффициентом межлабораторной вариации CVлаб.;
εijk — погрешность k-ой аналитической серии (k = 1, …, Kij), характеризуется коэффициентом междневной вариации CVмеждн.;
ξijkl — погрешность l-го измерения (l = 1, …, Lijk), характеризуется коэффициентом внутридневной вариации CVвнутр..

Дисперсионный анализ позволяет стратифицировать различные компоненты дисперсии таким образом, что дисперсия выборки равна сумме дисперсий от всех включенных в модель источников погрешностей. В модели с пропорциональными ошибками вместо стандартных отклонений используют коэффициенты вариации, а доля того или иного источника в общей погрешности равна доле в процентах соответствующего CV2 в квадратичной сумме:

CV2 = CV2набор + CV2лаб. + CV2междн. + CV2внутр.

При проведении дисперсионного анализа из расчета были исключены результаты лабораторий, использовавших одни и те же наборы реагентов, если совокупность таких результатов была получена менее, чем в 20 лабораториях, а также результаты, где код набора реагентов не был указан или отнесен к «прочим».

Это позволило рассчитать коэффициент межнаборной вариации на массиве данных, в котором каждый набор реагентов был представлен репрезентативной выборкой результатов, в отсутствие источников неидентифицированных погрешностей.

В 2011 г. во всех трех циклах раздела «Коагулология» была использована схема с двумя одинаковыми контрольными образцами, причем уровни определяемых показателей варьировались в разных циклах, от нормальных к патологическим. Образцы цикла 2–11 были условно «нормальными», цикла 1–11 — «пограничными», а цикла 3–11 — «патологическими».

Антитромбин в 2011 г. не был включен в раздел «Коагулология». Методом дисперсионного анализа были получены оценки коэффициентов вариации, характеризующих четыре фактора в иерархической модели, и их процентные доли в общей неопределенности результата (табл. 1).

Таблица 1 Вклад различных источников погрешностей по данным дисперсионного анализа

Определяемый показатель Цикл Среднее значение Источник погрешности
метод/набор реагентов лаборатория аналитическая серия погрешность измерения
CV, % доля, % CV, % доля, % CV, % доля, % CV, % доля, %
Протромбиновое время 2–11 15,1 с 14,4 64,6 9,9 30,5 3,5 3,9 1,8 1,0
1–11 24,7 с 12,6 37,8 14,1 47,8 7,4 12,9 2,5 1,5
3–11 33,0 с 12,4 32,4 16,3 56,2 6,9 9,9 2,6 1,5
Процент протромбина по Квику 2–11 93,1% 6,3 20,4 11,6 68,4 4,0 8,4 2,4 2,8
1–11 48,6% 14,6 25,3 22,9 61,6 9,9 11,5 3,7 1,6
3–11 31,9% 17,8 24,2 30,7 72,3 6,1 2,9 3,0 0,7
МНО 2–11 1,06 3,8 10,6 9,9 72,6 4,2 12,9 2,3 4,0
1–11 1,86 8,6 20,4 14,7 59,4 8,0 17,8 2,9 2,4
3–11 2,68 9,0 16,5 18,9 72,4 6,8 9,3 3,0 1,8
АЧТВ 2–11 33,8 с 7,0 18,7 13,1 65,6 6,0 13,9 2,2 1,9
1–11 56,6 с 17,6 47,8 16,8 43,3 7,3 8,1 2,3 0,8
3–11 76,3 с 25,2 50,1 23,2 42,3 9,2 6,6 3,5 1,0
Тромбиновое время 2–11 14,5 с 31,0 57,6 25,8 39,9 5,8 2,1 3,0 0,5
1–11 14,4 с 23,9 52,4 21,4 42,2 7,0 4,6 3,0 0,8
3–11 14,3 с 27,1 50,8 25,8 46,0 5,9 2,4 3,3 0,8
Фибриноген 2–11 4,07 г/л 9,0 13,0 21,9 76,5 7,4 8,8 3,2 1,7
1–11 2,15 г/л 6,5 6,2 22,3 73,2 11,0 17,7 4,4 2,9
3–11 1,78 г/л 9,6 8,7 28,9 79,3 10,0 9,5 5,2 2,6

В случае определения протромбинового времени в секундах в нормальном образце 2/3 всей погрешности измерения приходится на различия между наборами реагентов от разных производителей.

После преобразования к МНО или проценту протромбина по Квику доля фактора различий между наборами реагентов не превышает 25% от общей погрешности результата. На первый план выходит межлабораторная вариация, вклад которой в общую погрешность составляет 60–75%.

Вклад междневной вариабельности при определении МНО составляет от 9 до 18%, а внутридневной (случайная ошибка прибора) — от 2 до 4%. Таким образом, наиболее важным источником аналитических погрешностей является калибровка прибора в лаборатории и (или) однородность партии реагентов/калибраторов от одного производителя, в т. ч. вследствие различий в условиях их доставки и хранения.

Кроме того, дисперсионный анализ показал, что величина коэффициентов внутридневной вариации остается примерно одинаковой как на нормальных, так и на патологических образцах, что свидетельствует о постоянстве погрешностей измерительных устройств в модели с пропорциональными ошибками.

В то же время коэффициенты межлабораторной и межнаборной вариации на патологических образцах в несколько раз превышают таковые на нормальных образцах при определении процента протромбина по Квику, МНО и АЧТВ.

Хотя МНО считается наиболее стандартизованным показателем, тем не менее и на его примере было показано, что коэффициент межлабораторной вариации увеличивается с 10 до 19% по мере изменения значений МНО в контрольных образцах от нормальных к патологическим.

Любая погрешность в определении международного индекса чувствительности или среднего нормального протромбинового времени незначительно сказывается на результатах определения МНО при размерности величин порядка единицы, но растет в степенной прогрессии по мере увеличения протромбинового времени.

Если же МНО вычисляется по прекалиброванному значению, установленному производителем набора реагентов, то подобный эффект обычно наблюдается, когда аналитическая система калибруется по одной точке в области нормальных значений.

Возможно, угол наклона калибровочных кривых существенно отличается в различных лабораториях, что приводит к увеличению расхождений между лабораториями по мере удаления измеренной величины от точки калибровки.

При определении АЧТВ наблюдается увеличение коэффициентов вариации, характеризующих все виды источников погрешностей, по мере перехода от нормальных образцов к патологическим, а также увеличение доли фактора метода/набора реагентов в общей погрешности, которая достигает 50% на патологическом образце.

Разброс средних значений, полученных на разных наборах реагентов, невелик на нормальном контрольном образце, но становится весьма значительным в случае патологического образца, где крайние значения отличаются более чем в два раза (табл. 2).

Таблица 2 Средние значения активированного частичного тромбопластинового времени (c), полученные в контрольных образцах различными наборами реагентов

Набор реагентов Контрольный цикл
1–11 2–11 3–11
Human, HemoStat aPTT-EL 57,0 31,9 87,0
ILab., HemosIL APTT-SP (liquid) 46,9 29,8 69,6
Siemens, Pathromtin SL 79,2 35,5 133,6
Stago/Roche, STA APTT Kaolin 53,1 32,2 78,4
Stago/Roche, STA APTT/APTTa 57,2 34,4 82,3
Stago/Roche, STA Cephascreen 55,1 32,3 75,1
Ренам, АЧТВ-тест 50,1 33,0 65,8
Ренам, Коагуло-тест 54,9 38,6 67,1
Технология-Стандарт, АПТВ-тест 55,4 35,6 65,9
Технология-Стандарт, Тех- АПТВ-EL-тест 58,4 34,8 73,2

При определении тромбинового времени результат измерения в основном зависит от используемого набора реагентов — вклад этого фактора в квадратичную сумму превышает 50% на всех образцах.

Это объясняется тем, что различные наборы реагентов содержат тромбин в различных концентрациях: обычно 3, 6 или 9 ед/мл. И чем выше концентрация тромбина, тем меньше тромбиновое время, измеренное с помощью данного набора (табл. 3).

Набор «Test Thrombin Reagent» фирмы Siemens показывает наиболее высокие значения, поскольку в нем используется не человеческий, а бычий тромбин в концентрации 1,5 ед/мл.

Различия между наборами реагентов компенсируются тем, что в инструкции к каждому набору указываются свои референтные интервалы (границы нормы), что требует, однако, информирования лечащего врача об изменении масштаба значений всякий раз, когда в лаборатории происходит смена набора реагентов.

Таблица 3.Средние значения тромбинового времени (c), полученные в контрольных образцах различными наборами реагентов

Набор реагентов Контрольный цикл
1–11 2–11 3–11
Human, HemoStat Thrombin Time 10,3 10,0 9,3
ILab., HemosIL Thrombin Time-3,0 UNIH/ml 13,2 11,7 14,6
Siemens, Test Thrombin Reagent 20,8 25,6 22,1
Stago/Roche, STA Thrombin 15,5 14,4 14,5
Ренам, Тромбин-реагент, 3 IU/мл 14,8 13,6 12,9
Ренам, Тромбин-реагент, 6 IU/мл 10,6 9,8 11,0
Ренам, Тромбин-тест, 3 IU/мл 15,3 14,5 13,6
Ренам, Тромбин-тест, 6 IU/мл 10,1 10,2 9,8
Технология-Стандарт, Тромбин человека 13,6 13,1 13,8
Технология-Стандарт, Тромбо-тест (11–14 с) 11,9 11,9 11,9
Технология-Стандарт, Тромбо-тест (15–19 с) 14,6 14,5 13,2

Наборы реагентов от разных производителей для определения фибриногена хорошо стандартизованы между собой: коэффициент межнаборной вариации не превышает 10% и дает примерно такой же вклад в общую погрешность, как и междневная вариация. Основной вклад (порядка 75% и более) в дисперсию обеспечивает межлабораторная составляющая.

Таким образом основным источником аналитических погрешностей при определении показателей системы гемостаза является межлабораторная составляющая, которая заведомо превосходит внутридневную и междневную погрешности методик, — ошибки, связанные с нестабильностью аналитической системы в рамках одного прибора.

Межлабораторная вариабельность на патологических образцах выше, чем на нормальных.

Для АЧТВ и тромбинового времени первостепенное значение приобретает различие между наборами реагентов разных производителей вследствие отсутствия их стандартизации.



Подписка на статьи

Чтобы не пропустить ни одной важной или интересной статьи, подпишитесь на рассылку. Это бесплатно.

Рекомендации по теме

Мероприятия

Мероприятия

Повышаем квалификацию

Посмотреть

Самое выгодное предложение

Самое выгодное предложение

Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

Живое общение с редакцией

А еще...


Мероприятия


Интервью

ФФОМС Наталья Стадченко

Председатель ФФОМС Наталья Стадченко в интервью журналу «Здравоохранение»:

Для медработника страховой представитель – это и контролер, и юридический консультант, и помощник одновременно





Наши продукты




















© МЦФЭР, 2006 – 2017. Все права защищены.

Портал zdrav.ru - медицинский портал для медицинских работников. Новости и статьи для главных врачей, медицинских сестер, заместителей главного врача, специалистов по качеству медицинской помощи, заведующих КДЛ, медицинских юристов, экономистов ЛПУ, провизоров и руководителей аптек.

Информация на данном сайте предназначена только для медицинских работников. Ознакомьтесь с соглашением об использовании.
Свидетельство о регистрации средства массовой информации Эл № ФС77-38302 от 30.11.2009


  • Мы в соцсетях
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — журнал в формате pdf

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
×
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
×
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль