text

🎁 УЛЁТНЫЕ СКИДКИ 30%! Поймать »

Здравоохранение

Современные подходы к оценке фенотипа различных субпопуляций лимфоцитов

  • 15 ноября 2011
  • 76

Первый официальный документ, регламентирующий деятельность иммунологических лабораторий в России, содержал такие показатели для оценки иммунного статуса при иммунофенотипировании лимфоцитов, как количество Т- и В-лимфоцитов (приказ Минздрава СССР от 18.04.1986 № 539 “Об организации лабораторий клинической иммунологии”). В дальнейшем этот перечень был расширен за счет включения Т-хелперов, Т-цитотоксических и естественных киллеров (NK-клеток) (приказ Минздрава России от 25.12.1997 № 380 “О состоянии и мерах по совершенствованию лабораторного обеспечения диагностики и лечения пациентов в учреждениях здравоохранения Российской Федерации”).

Бурное развитие фундаментальной иммунологии, основанное на достижениях молекулярной биологии и генной инженерии, позволило выявить пути иммунопатогенеза аллергических, аутоиммунных, онкологических и инфекционных заболеваний. В то же время возросшие возможности метода проточной цитофлуориметрии обусловили целесообразность расширения перечня популяций лимфоцитов, исследование которых необходимо при оценке иммунного статуса.

Внимание! Для скачивания доступна новая книга:  «Молекулярно-биологические исследования» ,

В течение последних 20 лет анализ только пяти популяций лимфоцитов (Т-клетки, Т-хелперы, Т-цитотоксические, В-клетки и NK-клетки) оказался недостаточно информативным в практике иммунологических лабораторий. С другой стороны, интенсивное изучение патогенеза различных заболеваний выявило ключевую роль активированных лимфоцитов, регуляторных Т-клеток, субпопуляций В- и NK-клеток. В связи с этим для оценки иммунного статуса при иммунофенотипировании лимфоцитов наряду с основными пятью популяциями целесообразно расширить анализ за счет малых субпопуляций лимфоцитов и пулов активированных клеток. Технические и методические возможности для этого у практических лабораторий появились только в последнее время. Так, если ранее для определения Т-ци- тотоксических лимфоцитов считалось достаточным использовать только один маркер - CD8, то согласно современным представлениям необходимо одновременное исследование четырех маркеров: CD8, CD4, CD3 и CD45. Реализация такого подхода возможна только при использовании многоцветного цитофлуориметрического анализа.

Однако при появлении новых лабораторных показателей одним из основных требований является стандартизация протокола определения этих показателей и установление интервалов распределения их у практически здоровых индивидов, т. е. “норма”. Не является исключением и проточная цитофлуориметрия.

Для установления значений нормативных показателей клеток иммунной системы в данном исследовании использовали периферическую кровь 356 практически здоровых лиц в возрасте от 20 до 45 лет из различных регионов России.

Проделанная работа позволила сформировать комбинации моноклональных антител, позволяющие оценить как все основные популяции лимфоцитов, так и их малые субпопуляции, участвующие в развитии иммунного ответа. В результате проведенного исследования была предложена панель моноклональных антител для окрашивания лимфоцитов, которая соответствует современным требованиям для характеристики иммунного статуса пациентов (табл. 1). Поскольку данное исследование проводилось с использованием периферической крови практически здоровых лиц, его результаты могут лечь в основу нормативных показателей субпопуляционного состава клеток иммунной системы.

Таблица 1

Панель моноклональных антител для анализа основных и малых популяций лимфоцитов периферической крови практически здоровых доноров

______ Флуорохромы_____ FITC_____ PE______ ECD_____ PC5

CD19___________________________ CD5_____ CD45_____ CD27

CD8___________________________ CD4_____ CD3_____ CD45

CD16___________________________ CD56_____ CD3_____ CD45

,,                                      CD8        CD38          CD3        CD45

^шоюю—ые антитела CD45RA- CD4                                                                         CD45

CD4___________________________ CD127_____ CD25_____ CD45

уб-TCR                                                                            ав-TCR_____ CD3_____ CD45

___________________  CD3                    CD25               HLA-DR             CD45

Анализ В-клеток и их субпопуляций

Оценка как относительного, так и абсолютного количества В-клеток является одним из важных диагностических признаков. При воспалительных заболеваниях наблюдается значительное снижение количества В-кле- ток. Особенно это ярко выражено при остром панкреатите, хроническом пародонтите и тонзиллите, гнойном осложнении травм. Противоположный эффект наблюдался при острых и хронических формах гепатитов В и С.

Для выявления В-клеток используют так называемые линейноспецифические маркеры. В-клетки экспрессируют целый ряд мембранных молекул, которые необходимы для формирования В-клеточного рецептора и являются маркерами линейной принадлежности B-клеток. К таким маркерам прежде всего относится CD19. В связи с этим данный антиген рекомендуется для количественной оценки общей популяции B-клеток.

Некоторые исследователи для локализации В-клеток используют CD20, но данная молекула может экспрессироваться в низкой плотности на других популяциях лимфоцитов. Хотя CD20 первоначально был описан как B-клеточный линейный маркер, оказалось, что небольшая субпопуляция Т-клеток человека может экспрессировать CD20 в низкой плотности и составляет 2,4±1,5% от лимфоцитов периферической крови.

Оценка экспрессии CD20 полезна при характеристике B-клеток, но необходимо достаточно осторожно подходить к интерпретации получаемых результатов, например при фенотипировании лимфоцитов периферической крови пациентов с ревматоидным артритом.

В настоящее время среди В-клеток выделяют до десяти субпопуляций, для лабораторных исследований особый интерес представляют В1-, В2-клетки и так называемые В-клетки памяти. Достаточно важная роль при данном делении отводится молекуле CD5, которая была расценена как возможный маркер B-клеток, позволяющий различать их субпопуляции: CD5+ B-клетки (B1) и обычные CD5- B-клетки (B2).

Хотя точная функциональная роль CD5 все еще до конца не изучена, для этих молекул была показана физическая ассоциация с антигенспецифическим рецепторным комплексом как на T-, так и на B-лимфоцитах. Однако в последние годы выяснилось, что CD5 может быть посредником при негативной регуляции передачи сигналов для B-клеточного рецептора.

В1-клетки вызывают значительный интерес за счет того, что их ассоциируют с продукцией аутоантител и, как следствие, с аутоиммунными заболеваниями. Значительная роль B1-клеток была отмечена при ревматоидном артрите, системной красной волчанке и синдроме Шегрена. Увеличение количества CD5+ B-клеток наблюдали у пациентов, страдающих миастенией, инсулинзависимым диабетом и тиреоидитом Хашимото. У пациента А доля CD5+ В-клеток составляла практически треть от всех В-клеток, тогда как у пациента Б в процессе терапии их количество значительно снизилось и составило приблизительно десятую часть от всех В-клеток.

В таблице 2 представлены патологии, при которых наблюдается повышение относительного уровня В1-клеток.

Другой субпопуляцией В-клеток, вызывающей не менее значительный интерес у исследователей, являются так называемые В-клетки памяти. Идентификация CD27 как маркера B-клеток памяти  позволила надежно и эффективно идентифицировать в периферической крови наивные В-клетки (IgM+/CD27) и B-клетки памяти (CD27+).

Таблица 2

Патологии, при которых определение относительного уровня В1-клеток является диагностическим параметром для мониторинга за течением заболевания

№ п/п

Заболевание

Повышение относительного уровня В1-клеток

1

Системная красная волчанка

++++

2

Синдром Шегрена

++++

3

Ревматоидный артрит

+++

4

Инсулинзависимый диабет

+++

5

Аутоиммунный тиреоидит

++++

6

Миастения

+++

7

Неспецифический язвенный колит

+++

8

Аутоиммунные поражения при инфекционных заболеваниях (хламидиоз, синдром Рейтера, бруцеллез и др.)

+++

9

Другие заболевания, имеющие в своей основе аутоиммунные механизмы

+

Взаимодействие CD27 с его лигандом (CD70) на T-клетках является одним из условий дифференцировки B-клеток в плазматические клетки. В свою очередь отсутствие IgDCD27+ B-клеток памяти в значительной степени объясняет нарушение продукции иммуноглобулинов у пациентов с X-связанным гипер-IgM синдромом. В таблице 3 представлены патологии, при которых наблюдается изменение относительного уровня В-клеток памяти.

Таблица 3

Патологии, при которых определение относительного уровня В-клеток памяти является диагностическим параметром для мониторинга за течением заболевания

Изменение количества В-клеток памяти

Заболевание

Повышение относительного уровня В-клеток памяти

Множественный склероз Ревматоидный артрит

Понижение относительного уровня В-клеток памяти

Первичные иммунодефициты

Синдром Шегрена

Хронической грануломатоз

Бактериальные инфекции дыхательного тракта

Бактериальные инфекции желудочно-кишечного

тракта

Таким образом, наиболее полную характеристику количества B-клеток и их субпопуляционного состава можно получить при следующей комбинации моноклональных антител: CD19/CD5/CD27/CD45.

Анализ В1-, В2-клеток и В-клеток памяти в периферической крови человека с использованием этой комбинации моноклональных антител позволил определить интервалы распределения как относительного, так и абсолютного количества этих субпопуляций у практически здоровых лиц (результаты представлены в табл. 4).

Таблица 4

Интервалы распределения популяций лимфоцитов в зависимости от их фенотипов у практически здоровых доноров

Субпопуляции

Содержание

относительное

(%)

абсолютное количество (кл/л)

В-клетки (CD3CD19+HLADR+CD45+)

7,0-17,0

0,111-0,376x109

В1-клетки (CD19+CD5+CD27-CD45+)

0,5-2,1

0,022-0,115x109

В2-клетки (CD19+CD5CD27CD45+)

6,5-14,9

0,081-0,323x109

В-клетки памяти (CD19+CD5-CD27+CD45+)

1,8-6,8

0,012-0,040x109

NK-клетки (CD3-CD16+CD56+CD45+)

0,2-1,0

0,003-0,022x109

NK-клетки цитолитические (CD3-CD16+(or high)CD56dimCD45+)

0

1

о

0,123-0,369x109

NK-клетки цитокин-продуцирующие (CD3CD16-(or low)CD56brightCD45+)

00

1

о

0,120-0,347x109

Т-клетки (CD3+CD19CD45+)

61,0-85,0

0,946-2,079x109

Т-хелперы (CD3+CD4+CD8-CD45+)

35,0-55,0

0,576-1,336x109

Т-цитотоксические (CD3+CD8+CD4-CD45+)

19,0-35,0

0,372-0,974x109

Т-хелперы активированные/памяти (CD4+CD45R0+CD45RA±CD45+)

5,0-25,0

0,068-0,702x109

Т-хелперы наивные (CD4+CD45RA+CD45R0-CD45+)

20,0-40,0

0,272-1,123x109

а^Т-клетки (CD3+ав-ТсR+Y6-ТcR-CD45+)

70,5-9,7

0,924-1,964x109

7бТ-клетки (CD3+Y6-ТcR+ав-ТсR-CD45+)

4,6-2,8

0,022-0,115x109

Т-NK-клетки (CD16-CD56+CD3+CD45+)

0,5-6,0

0,007-0,165x109

Т-клетки активированные (CD3+HLA-DR+CD25+CD45+)

0,5-6,0

0,007-0,165x109

Регуляторные Т-клетки (CD4+CD25brightCD127negCD45+)

1,6-5,8

0,009-0,078x109

Индекс соотношения (Т-хелперы/Т-цитотоксические)

1,5-2,6

Использование дополнительного логического ограничения по CD 19+ клеткам позволяет получить дополнительную информацию по интервалам распределения В1-, В2-клеток и В-клеток памяти внутри популяции В-кле- ток у практически здоровых лиц (табл. 5).

Анализ Т-клеток и их субпопуляций

К маркерам, характеризующим линию T-клеток, в первую очередь относится T-клеточный рецептор (T-cell Receptor, ^R). Существуют два типа TcR, каждый из которых ассоциируется с разными типами T-лимфоцитов.

Таблица 5

Интервалы распределения содержания малых субпопуляций лимфоцитов в периферической крови взрослых практически здоровых доноров относительно основных популяций лимфоцитов

Субпопуляции

Содержание клеток(%)

В1-клетки

относительно общих В-клеток

4,1-17,5

В2-клетки

82,1-96,3

В-клетки памяти

22,8-39,7

yST-клетки

относительно общих Т-клеток

1,7-12,6

aPT-клетки

87,2-98,4

Регуляторные Т-клетки

относительно

Т-хелперов

1,65-5,75

CD16+(or high)CD56dim NK-клетки цитолитические

относительно общих NK-клеток

93,75-97,5

CD16-(or low)CD56bright NK-клетки цито- кин-продуцирующие

2,5-6,25

TcR1, состоящий из а- и ^-цепей, появляется на ранних стадиях онтогенеза. TcR2 состоит из у- и S-цепей.

yST-клетки были изучены относительно недавно. В отличие от а^Т- клеток, yST-клетки распознают непептидные антигены, полученные из микробных патогенов, независимо от главного комплекса тканевой совместимости (MHC). Данная субпопуляция клеток выполняет целый ряд важных функций: так, они могут усиливать иммунный ответ, производя большие количества интерферона-у (IFNy), фактора некроза опухолей-а (TNFa) и хемокинов. Кроме этого yST-клетки имеют эффекторную (цитотоксическую) активность. С эволюционной точки зрения yST-клетки занимают уникальное место между высокоспецифичными а^Т-клетками и врожденной иммунной системой для выполнения задачи защиты организма от патогенов. Весьма существенна роль yST-клеток в обеспечении устойчивости организма против целого ряда бактериальных и вирусных инфекций, включая вирус ВИЧ. Кроме того, yST-клетки принимают участие и в противоопухолевом ответе. Однако yST-клетки могут играть не последнюю роль при некоторых иммунопатологических состояниях, таких как диабет, аутоиммунные расстройства, болезнь Бехчета.

Содержание yST-клеток в периферической крови может варьироваться, что, в частности, обусловлено половыми и возрастными различиями. Количество yST-клеток увеличивается с момента рождения до наступления половой зрелости и в дальнейшем постепенно снижается. У женщин количество yST-клеток несколько выше, и этот уровень сохраняется значительно дольше, чем у мужчин.

Обнаружение увеличенной циркулирующей субпопуляции yST-клеток, особенно на слизистых оболочках, позволяет предположить наличие недавней или продолжающейся хронической стимуляции иммунной системы. Для клиницистов эта информация может служить дополнительным критерием, свидетельствующим о наличии медленно прогрессирующего инфекционного заболевания.

На клеточной поверхности и а^-, и уб-антигенраспознающие рецепторы T-клеток располагаются непосредственно рядом с полипептидным комплексом, имеющим групповое название CD3. Это соседство и ассоциация с CD3 является необходимым условием для экспрессии всего рецепторного комплекса на поверхности клеток. Оценка как относительного, так и абсолютного количества Т-клеток и их основных субпопуляций получила широкое распространение в лабораторной практике. При фенотипирова- нии лимфоцитов эти данные являются диагностически значимыми при различных патологических состояниях иммунной системы, включая первичные и вторичные иммунодефициты. Динамика изменения субпопуляционного состава Т-клеток при некоторых патологиях представляет собой значительную ценность для контроля эффективности терапии, прогноза развития и течения заболевания. Патологии, при которых изменяется количество убТ-клеток, представлены в табл. 6.

Таблица 6

Изменение относительного количества у8Т-клеток при различных заболеваниях и патологиях

Изменение относительного количества убТ-клеток

Заболевание

Повышение относительного уровня

Вирусные инфекции:

y6T клеток

  • ВИЧ
  • цитомегаловирус
  • вирус Эпштейна-Бара Бактериальные инфекции:
  • туберкулез легких Mycobacterium
  • легионеллез Legionella
  • туляримия Francisella tularensis
  • сальмонеллез Salmonella
  • боррелиоз (болезнь Лайма) Borellia Атопический дерматит (у детей) Болезнь Корна

Болезнь Бехчета Первичные иммунодефициты

Понижение относительного уровня

Атопический дерматит (у взрослых)

y6T клеток

Возрастное снижение относительного уровня y6T клеток

Для наиболее полной фенотипической характеристики T-клеток проводили анализ не только линейно-специфичного маркера T-клеток CD3, но и определяли субпопуляционный состав T-клеток по экспрессии Т-клеточного рецептора, а именно у8- и a^TCR. Для этих целей были использованы следующие комбинации моноклональных антител: CD3/CD4/CD8/CD45 и apTCR/y5TCR/CD3/CD45, а результат представлен в табл. 4 и 5.

В случае анализа a^T-клеток и yST-клеток использование дополнительного логического ограничения по CD3+ клеткам позволило получить дополнительную информацию по интервалам распределения этих клеток в основной популяции T-клеток (табл. 5).

В последние годы большой интерес у исследователей вызывает такая популяция Т-клеток, как регуляторные Т-клетки (T-reg). Они играют важную роль в супрессии иммунных реакций (регулируют Т-клеточный гомеостаз, предотвращают аутоиммунные заболевания, аллергии, гиперчувствительность, реакцию трансплантат против хозяина, но снижают иммунитет к инфекциям). Таким образом, наличие и количественные характеристики этой популяции служат важным диагностическим признаком.

T-reg клетки имеют следующий фенотип - CD3+CD4+CD25brightCD45R0+CD95+, однако наиболее важным их маркером является фактор транскрипции скурфин (scurfin, FOXP3), который находится внутри клеток, что затрудняет работу по идентификации T-reg клеток.

Исследования последних лет показали, что экспрессия CD127 на T-reg клетках снижена или отсутствует и их локализация возможна без выявления FOXP3.

Для выявления T-reg клеток был использован многоцветный цитометрический анализ с многоэтапным введением логических ограничений и следующая комбинация моноклональных антител: CD45-FITC, CD4-PC7, CD25-PC5 и CD127-PE.

Результаты анализа T-reg клеток взрослых практически здоровых лиц представлены в табл. 4. Подход с использованием множественных логических ограничений выявил интервалы распределения T-reg клеток в основной популяции T-клеток практически здоровых лиц (табл. 5).

Не меньший интерес вызывает анализ наивных Т-клеток. Экспрессия на клеточной поверхности различных изоформ молекулы CD45 позволяет выделить среди CD4+ Т-лимфоцитов человека наивные Т-клетки. Принято относить субпопуляцию CD4+CD45RA-CD45R0+ Т-лимфоцитов к Т-клеткам памяти и, соответственно, CD4+CD45RA+CD45R0- - к наивным Т-клеткам. Подобное разделение основано исключительно на способности CD4+CD45RA-CD45R0+ Т-клеток, а не наивных Т-лимфоцитов интенсивно отвечать на повторный контакт с антигеном in vitro. В свою очередь, быстрый и усиленный ответ Т-клеток памяти на специфический антиген является их важнейшим функциональным отличием от наивных предшественников. Однако следует отметить, что CD45R0 также экспрессируют регуляторные Т-клетки и активированные Т-хелперы.

Определение количества CD4+CD45RA+CD45R0- и CD4+CD45RA- CD45R0+ лимфоцитов может служить хорошим диагностическим признаком. Этот факт четко проявляется при развитии иммунного ответа на инфекции и в случаях хирургического вмешательства, поскольку происходит накопление доли CD4+CD45RA-CD45R0+ клеток и снижение CD4+CD45RA+CD45R0-.

Как видно, определение относительного количества CD45RA+ и CD45R0+ клеток по всей популяции лимфоцитов малоинформативно. Только многоцветный цитометрический анализ с логическим ограничением по зоне CD4 позитивных клеток позволяет четко увидеть различие между CD45RA+ и CD45R0+ CD4+ Т-лимфоцитами в зависимости от развития иммунного ответа.

В процессе исследования количество наивных Т-клеток было проанализировано при помощи следующей комбинации моноклональных антител: CD4/CD45RA/CD45R0/CD45. Результаты анализа наивных Т-клеток взрослых практически здоровых лиц представлены в табл. 2.

Анализ NK-клеток и их субпопуляций

Иммунофенотипирование с использованием многоцветного анализа особенно важно для характеристики высокоспециализированных субпопуляций лимфоцитов, таких как NK-клетки. В таблице 7 представлены патологии, при которых меняется количество NK-клеток.

NK-клетки являются носителями двух основных функций. Во-первых, это лизис опухолей и инфицированных вирусами клеток, а во-вторых, регуляция врожденного и адаптивного иммунных ответов.

Таблица 7

Примеры отклонений в активности и количестве NK-клеток, связанных с проявлением клинических признаков или увеличенным риском заболеваний у людей

Изменение

количества

Патологическое состояние

Ассоциир ов анные

и активности

симптомы и риски

NK-клеток

1

2

3

Постоянно низ-

Приобретенный или врож-

Высокий риск возникновения

кие активность

денный иммунодефицит,

онкологических заболеваний

и количество

включая СПИД

и достаточно частые инфекци-

NK-клеток

онные заболевания

Синдром Чедиака-Хигасси

Повышенный риск образова-

Дефицит CD11/CD18 молекул

ния лимфом

Увеличенная восприимчи-

семейства клеточной адгезии

вость к вирусным инфекциям

Онкологические заболевания

Распространение метастазов

Онкологические заболевания,

Вероятность появления злока-

связанные с наследственно-

чественного образования

стью

выше нормального

Лейкемия

Предшествует рецидиву

Х-связанный лимфопролифе-

Повышенная чувствитель-

ративный синдром

ность к вирусу Эпштейна-Бара

Рак молочной железы

Неблагоприятный прогноз

(при диагнозе) Рак шеи и головы

Неблагоприятный прогноз

(до терапии)

Терапия цитостатиками

Более высокая вероятность

Вирусная инфекция (цитоме-

рецидива

Более высокая частота, серьез-

галовирус, вирус Эпштейна-

ность и продолжительность

Бара, вирус герпеса)

заболевания

Другие вирусные и бактери-

Более высокая частота, серьез-

альные инфекции

ность и продолжительность

Аутоиммунные заболевания

заболевания

Возможно более активное те-

Психические расстройства: - Синдром дефицита

чение болезни, увеличенная частота инфекций

Усталость, сниженная воспри-

NK-клеток

имчивость, лихорадка

- Синдром хронической уста-

Повышенная утомляемость,

лости

апатичность, увеличенная ча-

- Депрессия

стота вирусных заболеваний Более серьезные признаки

- Хронический стресс

Неспособность справляться с ежедневными проблемами,

усталость

Постоянно высо-

Лимфопролиферация

кие активность

NK-клеток

и количество NK-клеток

Хроническая пролиферация больших гранулярных лимфоцитов (LGL-пролиферация)

LGL лимфоцитоз, цитопения, спленомегалия

Острая пролиферация больших гранулярных лимфоцитов (LGL-пролиферация)

Встречается совместно с активной лейкемией/лимфомой

Для локализации NK-клеток среди других лимфоцитов используют уникальную комбинацию из нескольких маркеров, таких как CD16 и CD56. Однако Т-клетки также могут экспрессировать на своей поверхности CD56 и CD16 (так называемая популяция T-NK-клетки). Для разделения этих отличающихся от Т-клеток популяций используют молекулу CD3, т. к. NK-клетки никогда ее не экспрессируют.

Популяция NK-клеток по своему составу обладает достаточной гетерогенностью. Среди популяции циркулирующих NK-клеток выделяют две основные субпопуляции. Первая экспрессирует CD16 и низкий уровень CD56 (CD16+(or high)CD56dim). Вторая экспрессирует CD56, однако CD16 на них представлен в низкой плотности или полностью отсутствует (CD16-(or low) CD56bright). Последняя субпопуляция составляет около 10-20% от общего количества NK-клеток. Они секретируют IFNy и другие цитокины и имеют меньшую цитолитическую активность. В свою очередь субпопуляция CD16highCD56dim составляет около 80-90% от NK-клеток периферической крови, они слабо секретируют цитокины, но обладают высокой цитолитической активностью.

При двухцветном окрашивании лимфоцитов с использованием комбинации антител CD3, CD56+CD16 возможно локализовать NK-клетки и оценить их абсолютное и относительное количество. Однако в этом случае отсутствует возможность определить их субтипы. Данную задачу позволяет решить применение многоцветного анализа и комбинации моноклональных антител CD3/CD16/CD56/CD45. Этот подход позволил локализовать не только популяции NK-клеток и T-NK-клеток, но и отдельные малые субпопуляции NK-клеток, имеющие фенотип CD16+(or high)CD56dim и CD16-(or low) CD56bright. Результаты анализа общих NK-клеток, малых субпопуляций NK-клеток и T-NK-клеток взрослых практически здоровых лиц представлены в табл. 4 и 5.

Таким образом, проведенные исследования субпопуляционного состава клеток периферической крови практически здоровых лиц в различных регионах России позволили определить интервалы распределения содержания как основных, так и малых субпопуляций клеток иммунной системы человека. Сравнение полученных результатов с литературными данными (табл. 8), опубликованными в зарубежной и отечественной литературе, свидетельствуют о близости референтных интервалов распределения основных субпопуляций клеток иммунной системы практически здоровых лиц вне зависимости от места проживания.

Таблица8

Сравнение интервалов распределения основных субпопуляций лимфоцитов в периферической крови взрослых здоровых лиц, полученных авторами, с литературными данными

Субпопуляции

Zidovec Lepej S. et al., (2003) n = 50

Pope V. et al. (1994) n = 246

Comans- Bitter W.M. et al. (1997) n = 51

Тото- лян А.А. и др. (1999)

Собственные данные (n = 356)

Т-лимфоциты

(CD3+)

73,3

(59,0-88,2)

72,1 (54-85)

72

(55-83)

70 (60-80)

73 (61-85)

Т-хелперы

(CD3+,CD4+)

43,8

(34,9-64,3)

44,1 (32-58)

44

(28-57)

41,5

(33-50)

45 (35-55)

Т-цитотоксиче- ские (CD3+,CD8+)

23,9

(11,0-37,1)

31,2 (19-44)

24

(10-39)

27,5

(16-39)

27 (19-35)

Т-активированные

(CD3+,HLA-DR+)

1,9

(0,5-25,9)

Нет

данных

5 (2-12)

Нет

данных

3 (0,5-6,0)

В-лимфоциты

(CD19+)

9,7

(4,4-26,4)

13,3 (6-23)

12 (6-19)

13,5 (5-22)

12 (7-17)

NK-клетки

(CD3-,CD16+,

CD56+)

3,9

(0,4-19,3)

12,2 (5-23)

13 (7-31)

11,5 (3-20)

15 (12-18)

Однако по-прежнему остается открытым вопрос о российских нормах, связанных с региональными особенностями отдельных областей и этническими группами населения РФ. В качестве примера можно привести так называемый “северный фенотип” - повышенное содержание NK-клеток. В данном случае их количество находится около верхней границы распределения, а в некоторых случаях и превышает ее, хотя для этих регионов такое является нормой. Все это требует объединения усилий различных лабораторных коллективов в проведении исследований в данном направлении.

Развитие проточной цитофлуориметрии в нашей стране привело к широкомасштабному применению оценки основных субпопуляций лейкоцитов и их активационных маркеров в клинической практике, причем не только с целью выявления количественных дефектов этих клеток, но и в диагностических целях (диагностика аутоиммунных процессов, септических состояний и др.). В то же время во многом остается дискуссионным вопрос о референтных значениях различных клеточных субпопуляций как для страны в целом, так и для различных регионов и этносов.

Рекомендации по теме

Мероприятия

Мероприятия

Повышаем квалификацию

Посмотреть

Самое выгодное предложение

Самое выгодное предложение

Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

Мы в соцсетях
А еще:
Сайт предназначен для медицинских работников!


Материалы для zdrav.ru готовят лучшие эксперты в сфере здравоохранения. Чтобы защитить их авторские права, многие статьи на нашем сайте закрыты

Подтвердите ваш статус медработника - регистрация займет одну минуту.

Пакет готовых инструкций, чтобы пройти проверку Росздравнадзора в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
Сайт предназначен для медицинских работников!


Материалы для zdrav.ru готовят лучшие эксперты в сфере здравоохранения. Чтобы защитить их авторские права, многие статьи на нашем сайте закрыты

Подтвердите ваш статус медработника - регистрация займет одну минуту.

Пакет готовых инструкций, чтобы пройти проверку Росздравнадзора в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
×
Гость, Вы выиграли доступ к журналу «Справочник заведующего КДЛ»!

Гость, вам предоставлен VIP-доступ к журналу «Справочник заведующего КДЛ»:
возможность скачивать шаблоны • доступ к видеотренингам • книги для КДЛ
Активировать доступ  
Сайт использует файлы cookie. Они позволяют узнавать вас и получать информацию о вашем пользовательском опыте. Это нужно, чтобы улучшать сайт. Посещая страницы сайта и предоставляя свои данные, вы позволяете нам предоставлять их сторонним партнерам. Если согласны, продолжайте пользоваться сайтом. Если нет – установите специальные настройки в браузере или обратитесь в техподдержку.