text

🎁 УЛЁТНЫЕ СКИДКИ 30%! Поймать »

Здравоохранение

Роль иммунохроматографических тестов в диагностике ротавирусной инфекции у детей

  • 15 ноября 2011
  • 63

В настоящее время в большинстве случаев (65-70%) этиология инфекционной диареи у детей остается нерасшифрованной. Вирусные кишечные инфекции широко распространены, причем их доля в структуре кишечных инфекций у детей может достигать 60-80% и существенно повышается в зимне-весенний сезон. Особенно подвержены вирусным кишечным инфекциям дети раннего возраста, которые являются наиболее восприимчивым к данному заболеванию контингентом. Среди вирусных диарей преобладает ротавирусный гастроэнтерит, который регистрируется в 30-60% случаев.

Для верификации ротавирусной инфекции могут использоваться различные методы диагностики :

Внимание! Для скачивания доступна новая книга:  «Молекулярно-биологические исследования» ,

  • выделение вируса на клеточных культурах;
  • прямая электронная микроскопия;
  • иммунноэлектронная микроскопия;
  • иммунофлуоресцентный метод;
  • иммуноферментный анализ (ИФА);
  • реакция гемагглютинации;
  • реакция непрямой или пассивной гемагглютинации;
  • реакция коагглютинации;
  • реакция агглютинации латекса (РАЛ);
  • электрофорез вирусных частиц в полиакриламидном геле;
  • обнаружение вирусспецифических РНК методом молекулярной гибридизации;
  • полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Материалом для вирусологического исследования могут служить фекалии, сыворотка крови, спинномозговая жидкость больного, биоптаты и секционный материал. Сегодня для этих целей используются, как правило, фекальные массы больного, т. к. в них в первые дни болезни ротавирус содержится в концентрации, достигающей 1010-1012 частиц на 1 г кала.

В настоящее время в Российской Федерации имеются зарегистрированные наборы реагентов для диагностики ротавирусной инфекции методами ИФА, ПЦР, РАЛ. Но из-за необходимости в специальном лабораторном оборудовании для проведения ИФА и ПЦР-диагностики эти методы не находят широкого применения в небольших лечебно-профилактических учреждениях. Вместе с тем, потребность во внедрении в практику методов экспресс-диагностики ротавирусного гастроэнтерита весьма актуальна. Быстрое определение этиологии заболевания позволяет своевременно и правильно организовать лечебные и противоэпидемические мероприятия.

По данным нашей клиники, проводившей оценку качества оказания медицинской помощи в инфекционных отделениях больниц Московской области, частота необоснованных назначений антибактериальной терапии детям с водянистой диареей, госпитализированным в течение сезонного подъема заболеваемости вирусными диареями, достигает 40%. Ретроспективный анализ 328 историй болезни из 16 районных больниц показал, что в тех районах, где диагностика ротавирусной инфекции внедрена в рутинную практику, частота необоснованных назначений антибактериальной терапии таким пациентам колеблется от 0 до 20-25%. В районах, где диагностика ротавирусной инфекции не проводится, она достигает 100%. Между тем, в настоящее время общепризнана нецелесообразность использования антибактериальной терапии в лечении вирусной диареи.

Нами была проведена оценка результативности иммунохроматографического диагностического теста с маркерами рота- и аденовирусной инфекции у детей с водянистой диареей, госпитализированных в стационар. Метод основан на реакции рота- и/или аденовирусных антигенов со специфическими моноклональными мечеными антителами, нанесенными на тест-полоску. В качестве референтного использован метод ПЦР с детекцией продуктов амплификации в режиме реального времени (ПЦР-РВ) для выявления нуклеиновых кислот аденовирусов, энтеровирусов, ротавирусов групп А и С, норовирусов, астровирусов, саповирусов, реовирусов. Исследования были проведены в июле 2010 г. - январе 2011 г. Исследовано 50 образцов фекалий детей в возрасте от 2 месяцев до 7 лет с гастроэнтеритом предположительно вирусной этиологии, госпитализированных в стационар. Исследование фекалий методом ПЦР-РВ выполнено в независимой лаборатории НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН, а иммунохроматографический тест (ИХТ) - в лаборатории больницы, куда были госпитализированы пациенты.

Нуклеиновые кислоты вирусов были обнаружены в 86% образцов фекалий детей с водянистой диареей.

Следует иметь в виду, что половина детей была обследована летом и осенью, т. е. вне сезонного подъема заболеваемости вирусными диареями. И тем не менее, обращает на себя внимание высокая частота подтверждения диагноза вирусной диареи. Это заболевание имеет достаточно характерную клиническую картину и особенности патологического стула (жидкие испражнения без колитических примесей или незначительное количество таковых при отсутствии гемоколита). Поэтому предположить вирусную этиологию инфекционной диареи у ребенка после осмотра его стула несложно.

Видно, что ведущим этиологическим агентом водянистой диареи у детей, госпитализированных в стационар, являются ротавирусы группы А (48%), причем в составе почти всех ассоциаций вирусов (за исключением одного ребенка) ротавирусы А присутствовали. В целом нуклеиновая кислота ротавирусов А была обнаружена в 29 (58%) образцах. Нуклеиновые кислоты других вирусов, в т. ч. в составе вирусных ассоциаций, обнаруживалась реже, аденовирусов - у 5 (10%) больных. По данным литературы, ротавирусная инфекция чаще регистрируется у пациентов стационаров, чем у пациентов амбулаторной сети, поскольку протекает относительно более тяжело. Вместе с тем, ротавирусы группы А - самая частая причина диареи в детском возрасте.

Использование ИХТ в периоде разгара заболевания позволило диагностировать ротавирусную инфекцию у 26 больных, аденовирусную - у 3 больных. Частота подтверждения рота- и аденовирусной кишечной инфекции у обследованных больных представлена в таблице.

Таблица

Частота положительных и отрицательных результатов выявления рота- и аденовирусов в фекалиях при использовании ПЦР-РВ и иммунохроматографического теста

Результат метода

ПЦ

Р-РВ

ИХТ

ротавирус

аденовирус

ротавирус

аденовирус

Положительный

29 (58%)

5 (10%)

26 (52%)

3 (6%)

Отрицательный

21 (42%)

45 (90%)

24 (48%)

47 (94%)

Были рассчитаны характеристики достоверности ИХТ в сравнении с ПЦР-РВ: чувствительность - 89,6%, специфичность - 100%, точность - 94%, прогностическая ценность положительного результата - 100%, прогностическая ценность отрицательного результата - 87,5%, отношение правдоподобия отрицательного результата - 0,10.

Анализ позволяет сделать следующие выводы. ИХТ в качестве скринингового теста достаточно эффективен, поскольку позволяет выявить 90% больных ротавирусной инфекцией. Тест является высокоспецифичным, положительный результат теста с высокой вероятностью соответствует ротавирусной этиологии диареи. Вместе с тем, отрицательный результат теста не позволяет однозначно исключить диагноз ротавирусного гастроэнтерита у 10% истинно больных этой инфекцией. То есть ошибочные результаты теста (10%) обусловлены ложноотрицательными ответами.

В целом следует отметить достаточную точность ИХТ в диагностике ротавирусного гастроэнтерита, которая составляет 94%, что, по мнению специалистов, является достаточным уровнем для широкого применения метода.

У больных с наличием нуклеиновой кислоты аденовирусов ИХТ был положительным в 3 случаях из 5. В 2 случаях методом ПЦР-РВ были обнаружены низкие концентрации вирусов в фекалиях, о чем косвенно можно было судить по значениям пороговых циклов в ПЦР-РВ. Именно у этих детей ИХТ имел ложноотрицательный результат. Поскольку ПЦР-РВ является высокочувствительным методом диагностики, обнаружение следовых концентраций нуклеиновой кислоты аденовирусов в фекалиях детей может трактоваться неоднозначно. Этот аспект диагностики вирусных кишечных инфекций требует специального изучения. В то же время ИХТ заведомо предназначен для проведения диагностики в периоде максимального выделения вирусов с фекалиями.

Учитывая высокую этиологическую значимость (до 80%) вирусов в развитии кишечных инфекций у детей, перспективны разработка и широкое внедрение в рутинную практику работы медицинской службы тестов экспресс-диагностики прежде всего ротавирусной инфекции, т. к. она превалирует в структуре вирусных диарей. Это позволит существенно улучшить этиологическую верификацию диагноза и будет способствовать правильному выбору тактики лечения. У врачей в случае быстрого подтверждения диагноза ротавирусного гастроэнтерита будет возможность обоснованно отказаться от назначения антибактериальной терапии.

Иммунохроматографический тест - простой и доступный метод диагностики ротавирусной и аденовирусной инфекций. Его легко воспроизвести у постели ребенка, он дает быстрый результат. Учитывая высокую специфичность, его можно использовать для экспресс-диагностики рота- и аденовирусной инфекции в практической работе.

Рекомендации по теме

Мероприятия

Мероприятия

Повышаем квалификацию

Посмотреть

Самое выгодное предложение

Самое выгодное предложение

Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

Мы в соцсетях
А еще:
Сайт предназначен для медицинских работников!


Материалы для zdrav.ru готовят лучшие эксперты в сфере здравоохранения. Чтобы защитить их авторские права, многие статьи на нашем сайте закрыты

Подтвердите ваш статус медработника - регистрация займет одну минуту.

Пакет готовых инструкций, чтобы пройти проверку Росздравнадзора в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
Зарегистрироваться
Сайт предназначен для медицинских работников!


Материалы для zdrav.ru готовят лучшие эксперты в сфере здравоохранения. Чтобы защитить их авторские права, многие статьи на нашем сайте закрыты

Подтвердите ваш статус медработника - регистрация займет одну минуту.

Пакет готовых инструкций, чтобы пройти проверку Росздравнадзора в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
Зарегистрироваться
×
Журнал
Гость, Ваш бесплатный доступ к журналу «Справочник заведующего КДЛ» сгорает через

Гость, вам предоставлен VIP-доступ к журналу «Справочник заведующего КДЛ»:
возможность скачивать шаблоны • доступ к видеотренингам • книги для КДЛ
Активировать доступ  
Сайт использует файлы cookie. Они позволяют узнавать вас и получать информацию о вашем пользовательском опыте. Это нужно, чтобы улучшать сайт. Посещая страницы сайта и предоставляя свои данные, вы позволяете нам предоставлять их сторонним партнерам. Если согласны, продолжайте пользоваться сайтом. Если нет – установите специальные настройки в браузере или обратитесь в техподдержку.