text

🎁 УЛЁТНЫЕ СКИДКИ 30%! Поймать »

Здравоохранение

Исследование функциональной активности тромбоцитов в условиях лаборатории многопрофильного стационара - оценка Р-селектина

  • 15 июня 2012
  • 36

Оценка функционального состояния тромбоцитов - актуальная, но сложная лабораторно-диагностическая задача. Тромбоцитарная активность является одним из ключевых факторов риска прогрессирования и реализации сосудистых событий у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями (ССЗ). Точное определение состояния тромбоцитов важно как в первичной диагностике и прогнозировании ССЗ, так и в мониторинге антитромбоцитарных воздействий.

Однако проблема лабораторной оценки тромбоцитарной активности окончательно не решена. Множество факторов преаналитического этапа влияют на состояние кровяных пластинок, которые активируются при малейшем внешнем стимуле - как механическом (турбулентность потока, перемешивание, центрифугирование), так и индукционном (биологически активные вещества, малые дозы тромбина, АДФ и т. д.) при взятии крови из вены. В течение последних десятилетий ведется активный поиск наиболее информативного лабораторного метода на основании новых знаний о физиологии функционирования тромбоцитов и патогенезе заболеваний, в который они вовлечены. Постоянно предлагаются новые методы, но все они имеют свои достоинства и недостатки и отличаются информативными характеристиками - способностью выявлять активированные тромбоциты, не предоставляя ложноположительных результатов.

Внимание! Для скачивания доступна новая книга:  «Молекулярно-биологические исследования» ,

Исследование Р-селектина как антигенной структуры, экспонирующейся на поверхности тромбоцитов при их активации, привлекательно для лаборатории с точки зрения высокой специфичности исследования, основанного на использовании реакции “антиген - антитело” непосредственно на поверхности клетки. Кроме того, все более широкая оснащенность клинико-диагностических лабораторий проточными цитофлуориметрами делает возможным это исследование в клинической практике. В современной литературе имеются лишь отдельные публикации об использовании проточной цитометрии для определения экспрессии Р-селектина.

Для оценки диагностической возможности определения Р-селектина на поверхности тромбоцитов с помощью проточной цитометрии у больных с ССЗ было обследовано 289 чел. В группу вошли 74 мужчины, страдающих ССЗ (средний возраст 60 ± 3 года); 59 мужчин и 16 женщин, перенесших инфаркт миокарда после 45 лет и принимающих комбинированную терапию - клопид огрел (75 мг/сутки) и аспирин (100 мг/сутки) (средний возраст 58 ± 2 года); 140 условно здоровых доноров без ССЗ в анамнезе (средний возраст 51 ± 2 года).

Пациенты с ССЗ были разделены на подгруппы в зависимости от степени суммарного риска сердечно-сосудистых осложнений и смерти от них. Оценка суммарного сердечно-сосудистого риска проводилась согласно критериям, предложенным Всероссийским научным обществом кардиологов с учетом характеристик АД, возраста, состояния липидного обмена, семейного анамнеза, поражения органов-мишеней, наличия сахарного диабета и метаболического синдрома (Диагностика и лечение артериальной гипертензии, 3-й пересмотр, 2008).

Исследование проводили в двух лабораториях на однотипном оборудовании с помощью флуоресцентно меченых моноклональных антител CD61-FITC и CD62P-PE (Beckman Coulter, США). Использованы проточные цитометры CYTOMICS FC 500 (Beckman Coulter, США).

Согласно полученным данным количество тромбоцитов, экспонирующих Р-селектин на поверхности, в группе лиц без ССЗ варьировало от 2 до 10% и составило в среднем 4,13%. Больные с ССЗ имели в среднем 10,40% тромбоцитов, несущих Р-селектин (р < 0,01), а превышение верхней границы референтного интервала отмечалось у 42,80% пациентов. По мере прогрессирования заболевания и нарастания рисков сердечно-сосудистых осложнений (ССО), экспрессия Р-селектина на поверхности тромбоцитов увеличивалось, т. е. увеличивалось количество активированных клеток: в группе риска ССО 2-й степени - до 11,10%, в группе риска ССО 3-й степени - до 13,20% (р< 0,001). Активная антиагрегантная терапия предупреждала дальнейший рост активности, а уровень Р-селектина снижался несмотря на увеличение степени риска ССО. Превышение верхней границы референтного интервала при ССО 4-й степени сохранялось только у 26,50% обследованных.

Искусственная активация тромбоцитов in vitro с использованием метода проточной индуцированной тромбоцитометрии  позволяла выявлять скрытые процессы активации. Уже у доноров количество тромбоцитов, несущих Р-селектин, возрастало при индуцированной активации in vitro до 17,80 ± 3,00%. В последнем случае была выявлена достоверная корреляция между уровнем нарастания экспрессии Р-селектина при индукции с помощью АДФ и основными показателями “золотого стандарта” исследования функции тромбоцитов - оптической агрегатометрии. В случае адекватной антиагрегантной защиты несмотря на высокий риск ССО 4-й степени, количество тромбоцитов, несущих Р-селектин, было увеличено недостоверно до 8,10%.

Индукция с помощью АДФ позволяла дифференцировать и ответ больного на антиагреганты. При активации in vitro число клеток, связывающихся с антителами к Р-селектину, увеличивалось у доноров и больных на фоне приема аспирина до 20,00%. В то время как у пациентов, принимающих клопидогрел, число тромбоцитов, экспрессирующих Р-селектин, менялось незначительно и составляло менее 7,00%, что свидетельствует об эффективном подавлении тромбоцитарной активности.

Определение количества тромбоцитов, экспонирующих Р-селектин, на проточном цитометре является доступным лабораторным методом и позволяет оценить тромбоцитарную активность у лиц без сердечно-сосудистой патологии и у больных с заболеваниями сердца и сосудов, в т. ч. принимающих антитромбоцитарные препараты. Метод показывает хорошую корреляцию с традиционной лабораторной оценкой тромбоцитов, но основан на точном определении молекулярных структур, присущих активированным тромбоцитам, является более специфичным, существенно снижает опасность активации клеток на преаналитическом этапе

Рекомендации по теме

Мероприятия

Мероприятия

Повышаем квалификацию

Посмотреть

Самое выгодное предложение

Самое выгодное предложение

Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

Мы в соцсетях
А еще:
Сайт предназначен для медицинских работников!


Материалы для zdrav.ru готовят лучшие эксперты в сфере здравоохранения. Чтобы защитить их авторские права, многие статьи на нашем сайте закрыты

Подтвердите ваш статус медработника - регистрация займет одну минуту.

Пакет готовых инструкций, чтобы пройти проверку Росздравнадзора в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
Зарегистрироваться
Сайт предназначен для медицинских работников!


Материалы для zdrav.ru готовят лучшие эксперты в сфере здравоохранения. Чтобы защитить их авторские права, многие статьи на нашем сайте закрыты

Подтвердите ваш статус медработника - регистрация займет одну минуту.

Пакет готовых инструкций, чтобы пройти проверку Росздравнадзора в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
Зарегистрироваться
×
Журнал
Гость, Ваш бесплатный доступ к журналу «Справочник заведующего КДЛ» сгорает через

Гость, вам предоставлен VIP-доступ к журналу «Справочник заведующего КДЛ»:
возможность скачивать шаблоны • доступ к видеотренингам • книги для КДЛ
Активировать доступ  
Сайт использует файлы cookie. Они позволяют узнавать вас и получать информацию о вашем пользовательском опыте. Это нужно, чтобы улучшать сайт. Посещая страницы сайта и предоставляя свои данные, вы позволяете нам предоставлять их сторонним партнерам. Если согласны, продолжайте пользоваться сайтом. Если нет – установите специальные настройки в браузере или обратитесь в техподдержку.