Лабораторные биомаркеры инфекции, вызванной вирусом Эпштейна - Барр

24

В последние годы изучению инфекции, вызываемой вирусом Эпштейна - Барр (ВЭБ), уделяется много внимания. ВЭБ (вирус герпеса человека 4-го типа - ВГЧ-4), относящийся к подсемейству y-Herpesviridae, попадает в организм через слизистую оболочку верхних дыхательных путей, реплицируется в эпителиальных клетках, инфицируя в дальнейшем наивные В-лимфоциты. Вирус обладает способностью реплицироваться и персистировать в клетках хозяина (дендритные клетки, В- и Т-лимфоциты) в течение всей его жизни. Установлены три стратегии инфицирования клетки: для первой характерны латентное персистирование вируса в В-клетке и экспрессия полного спектра белков латентной фазы, для второй - внедрение вирусной ДНК и ее присутствие в клетке в виде эписомы и блокирование экспрессии большинства вирусных белков, для третьей - возможный переход в литическую стадию с репликацией белков вириона и разрушением клетки-мишени. Публикации последних лет свидетельствуют о патогенетической значимости ВЭБ как для детей, так и для взрослых. Наряду с известной ролью в качестве возбудителя инфекционного мононуклеоза показан его вклад в формирование патологии плода, в развитие синдрома хронической усталости. С ВЭБ нередко связывают частые респираторные инфекции у детей. Наибольшую проблему для диагностики и адекватной терапии в настоящее время представляют смешанные герпесвирусные инфекции, особенно при их хроническом течении, в т. ч. при наличии гепатита, сопряженного с ВЭБ-инфекцией.

Способность ВЭБ к формированию ранней латентной инфекции даже в отсутствие литической стадии считают одним из “механизмов обхода иммунной системы”. Разнообразие клинических форм ВЭБ- инфекции связывают прежде всего с персистенцией вируса. Этиологическая расшифровка заболеваний повышает эффективность терапии. Вместе с тем, ввиду склонности ВЭБ к персистенции и возможности субклинического течения, при верификации диагноза важно не только установить наличие маркеров инфекции, но и определить активность инфекционного процесса.

Эпидемиологические исследования, проведенные в г. Омске, позволили установить, что в возрастной группе от 18 до 39 лет 74,00% лиц имеют антитела к ВЭБ, что обосновывает необходимость выявления биомаркеров активности инфекционного процесса, вызванного (либо индуцированного) данным вирусом, для исключения гипердиагностики и подбора адекватной терапии. С этой целью в открытое проспективное контролируемое исследование были включены 385 пациентов (средний возраст 25,6±5,8 год), в т. ч. 251 женщина и 134 мужчины, которые разделены на следующие группы: I группа - 126 пациентов с инфекционным синдромом (гепатоспленомегалия, гепатит неясной этиологии, длительный субфебрилитет, лимфаденопатии); II группа - 85 пациентов с рецидивирующими воспалительными заболеваниями верхних дыхательных путей; III группа - 95 женщин с внутриутробной гибелью эмбриона/пло- да. В отдельную (IV) группу выделены 79 пациентов с хронической ВЭБ- инфекцией (реактивация). Группа контроля представлена 106 здоровыми лицами. Диагноз ВЭБ-инфекции базировался на выявлении ДНК вируса и специфических антител классов IgM, IgA и “ранних” IgG (EA-IgG). Основным материалом для исследования служили: плазма и сыворотка крови, соскобы со слизистой зева и полости рта, ткани погибших эм- брионов/плодов. Для пациентов всех групп проводили исследование, направленное на выявление ДНК вируса простого герпеса 1-го и 2-го типов (ВПГ-1, ВПГ-2) и цитомегаловируса (ЦМВ) в плазме крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием наборов “АмплиСенс” (ФБУН “Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии”, г. Москва). Антитела классов IgM и IgG к ВЭБ определяли методом иммуноферментного анализа c использованием тест-систем производства ЗАО “Вектор-Бест”, а IgA - с использованием тест-систем производства компании Euroimmun AG (Германия). Семьдесят девять образцов сыворотки исследовали методом иммуноблота с использованием наборов Euroimmun AG и Immundiagnostik (Германия). При воспалительных заболеваниях зева проводили бактериологическое исследование. В тканях плодов определяли полиморфизмы генов врожденного иммунитета методом ПЦР (наборы ООО “Литех”, Москва). Статистическая обработка осуществлялась с использованием компьютерных программ “Статистический анализ клинико-лабораторных данных для прогнозирования риска развития патологии (R-med)”  и STATISTIKA-6 с использованием параметрических и непараметрических методов: х2, метод углового преобразования Фишера (Рф), критерий Манна - Уитни (U). Для оценки корреляционных взаимосвязей применяли коэффициент Пирсона и коэффициент Гамма (Gamma, G).

Анализ частоты встречаемости маркеров ВЭБ-инфекции показал, что в группах пациентов достоверно чаще (р < 0,05) по сравнению с контролем присутствовали ДНК ВЭБ и специфические антитела классов IgM, IgA и EA-IgG. При этом в I группе чаще в 2,2 раза (р = 0,03) детектирована ДНК вируса в плазме крови, а при рецидивирующих ангинах - чаще в соскобах со слизистой зева (в 3,4 раза, р = 0,02), что обосновывает целесообразность выбора соответствующего биологического материала для исследования. При наличии инфекционного синдрома, сопряженного с ВЭБ, установлена прямая корреляционная связь с гепатомегалией (R = 0,63), спленомегалией (R = 0,72) и гепатитом (R = 0,69), что подтверждает вклад ВЭБ в патологию гепатобилиарной системы. Следует отметить наличие жалоб на головные боли у 77,80% лиц и признаков поражения мозга в виде гидроцефального синдрома, кист и кальцинатов (R = 0,65). Во II группе чаще имела место реактивация, что подтверждено продукцией антител классов IgA и EA-IgG, которые выявлялись по сравнению с ВЭБ-IgM достоверно чаще в 2,4 и 3,5 раза соответственно (р = 0,03; р = 0,02). При посеве в 74,10% случаев были выделены бактериальные патогены (преимущественно гемолитический стрептококк и Staphylococcus aureus) и грибы рода Candida (у 17,60% пациентов). Ассоциации ВЭБ с бактериальной микрофлорой и грибами встречались в 73,20% случаев. В данной группе больные предъявляли жалобы на слабость (82,40%), головную боль (63,50%), субфебрилитет (80,04%). Лимфаденопатия установлена у 69,40%, гепатит и гепатомегалия - у 32,90%, спленомегалия - у 21,20% больных.

Анализ результатов обследования пациентов III группы подтверждает вклад ВЭБ в структуру перинатальных потерь, при этом ДНК вируса в крови женщин обнаруживалась в 36,80% случаев (в 4,4 раза чаще, чем при исследовании соскобов из зева; р = 0,010). Анализ анамнестических данных показал, что 33,70% женщин страдали рецидивирующими воспалительными заболевания зева, а 17,90% перенесли инфекционный моно- нуклеоз. Результаты ПЦР-исследования тканей погибших эмбрионов/ плодов показали наличие ДНК ВЭБ в 36,00% случаев. Выявление положительных ассоциативных связей (R = 0,82, p = 0,001) при параллельном определении полиморфизмов генов позволило прийти к заключению, что ВЭБ способен индуцировать гибель плода, особенно в случае носительства мутантных аллелей генов иммунного ответа (159 C/T в гене CD14, Arg753Gln в гене TLR2, С589Т в гене IL-4).

Значимые критерии риска развития внутриутробной ВЭБ-инфекции: перенесенный инфекционный мононуклеоз (р = 0,010), рецидивирующие воспалительные заболевания верхних дыхательных путей (р = 0,02), гепатит и гепатоспленомегалия (р = 0,003); угроза прерывания беременности (р = 0,005), задержка развития плода (р = 0,04), хроническая плацентарная недостаточность (р = 0,003), многоводие (р = 0,02), кальцинаты плаценты (р = 0,03); наличие ДНК ВЭБ в крови (р = 0,007), специфических IgM (р = 0,03), IgA (р = 0,02), носительство мутантных аллелей генов иммунного ответа (р = 0,007).

При клинико-лабораторном мониторинге пациентов с хронической ВЭБ-инфекцией (IV группа) установлено наличие у них следующих симптомов: слабость (98,00%), головная боль (95,00%), фарингит (95,00%), субфебрилитет (94,00%), лимфаденопатия (94,00%), сыпь (16,50%), зуд (19,00%), жжение в глазах (19,00%). Последние два признака были связаны с наличием микст-инфекции (ВЭБ-инфекция, ассоциированная с герпетической инфекцией). Гепатомегалия и сплено- мегалия встречались в 10,10 и 20,20% случаев соответственно. Наряду с фарингитом, частота острых респираторных заболеваний достигала 8-10 случаев в год. Лимфаденопатия проявлялась преимущественным увеличением шейных групп, реже - подмышечных и паховых лимфатических узлов. Для установления фазы инфекционного процесса ДНК возбудителя определяли в крови (детектирована у 25,30% больных) и в соскобе со слизистой зева (выделена в 19,00% случаев), при этом, параллельно с генетическим материалом вируса, антитела классов IgM и (или) EA-IgG присутствовали в 14,30% случаев. В 7,60% случаев наряду с ДНК ВЭБ была выявлена ДНК ЦМВ, в 24,10% случаев - ДНК ВПГ-1 и ВПГ-2, свидетельствуя, что ВЭБ-инфекция нередко протекает в виде смешанной инфекции и приводит к более тяжелому течению инфекционного процесса (г = 0,73, p = 0,01).

Выявление антител классов IgM и IgG к отдельным белкам - антигенам вируса методом иммуноблота показало, что при активной инфекции чаще обнаруживались антитела IgM р45 (42,40%) и IgM p79 (36,30%). У 15,10% больных были выявлены антитела IgM p93, IgM p125, IgM p43, IgM p22, IgM p33. Антитела IgG р22, IgG р93 и IgG р40 регистрировались в 97,00, 94,10 и 88,20% случаев соответственно. В 55,80% случаев выявлены антитела IgG p41, IgG p43, IgG p45, реже присутствовали IgG p27 (14,70%). Анализ данных показал, что наличие антител IgM p43 и IgG p27 связано с тяжестью течения инфекционного процесса (R = 0,69; p = 0,03), а антитела IgM p65 и IgM p33 сопровождали гепато- и спленомегалию (G = 1,00, p = 0,01). В фазе реактивации выявлены положительные корреляционные связи между поражением центральной нервной системы и наличием антител IgM p45 (G = 1,00, p = 0,010), IgG p125 (G = 1,00, p = 0,03), IgG p65 (G = 1,00, p = 0,009) и IgG p33 (G = 0,75, p = 0,01), IgG p45 (G = 1,00, p = 0,005), IgG p93 (G = 1,00, p = 0,04).

Таким образом, результаты исследования показали значимость ВЭБ в формировании патологии и возможную связь присутствия вируса с гибелью плода, особенно в случае наличия мутантных аллелей генов иммунного ответа CD14, TLR2 и IL-4. Полученные данные свидетельствуют о необходимости расширения показаний к обследованию взрослых пациентов для выявления ВЭБ-инфекции. К биомаркерам активности ВЭБ- инфекции следует отнести ДНК ВЭБ и специфические антитела классов ^М и (или) EA-IgG. Учитывая возможность ассоциации возбудителей, рекомендуется проводить комплексное исследование биоматериала для исключения (подтверждения) текущей ЦМВ- или ВПГ-инфекции и вклада бактериальной инфекции и грибковой инвазии. Полученные данные демонстрируют целесообразность применения иммуноблота в алгоритмах диагностики ВЭБ-инфекции и мониторинга больных с данной патологией.

Читайте в ближайших номерах журнала «Справочник заведующего КДЛ»
    Читать >>


    Ваша персональная подборка
      Рекомендации по теме

      Мероприятия

      Мероприятия

      Повышаем квалификацию

      Посмотреть

      Самое выгодное предложение

      Самое выгодное предложение

      Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

      Живое общение с редакцией

      А еще...







      Наши продукты






















      © 2006–2018 ООО «МЦФЭР», медиагруппа «Актион-МЦФЭР»

      Журнал «Здравоохранение» –
      практический журнал для главного врача.

      Все права защищены. Полное или частичное копирование любых материалов сайта возможно только с письменного разрешения редакции журнала «Здравоохранение».
      Нарушение авторских прав влечет за собой ответственность в соответствии с законодательством РФ.

      Зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор)
      Свидетельство о регистрации СМИ ПИ № ФС77-64203 от 31.12.2015.

      
      • Мы в соцсетях
      Сайт использует файлы cookie. Они позволяют узнавать вас и получать информацию о вашем пользовательском опыте. Это нужно, чтобы улучшать сайт. Посещая страницы сайта и предоставляя свои данные, вы позволяете нам предоставлять их сторонним партнерам. Если согласны, продолжайте пользоваться сайтом. Если нет – установите специальные настройки в браузере или обратитесь в техподдержку.
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы скачать документ на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 12 000 статей
      — 8 000 ответов на вопросы
      — 200 видеосеминаров
      — готовые формы и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные сервисы

      Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      Сайт предназначен для медицинских работников!


      Чтобы подтвердить ваш статус, зарегистрируйтесь, и:

      Читайте экспертные
      материалы

      Скачивайте готовые
      формы и СОПы

      Смотрите
      бесплатные вебинары

      13 000 статей

      1 500 инструкций

      200 записей

      Абонемент в электронную медицинскую библиотеку в подарок!

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      ×
      Сайт предназначен для медицинских работников!


      Чтобы подтвердить ваш статус, зарегистрируйтесь, и:

      Читайте экспертные
      материалы

      Скачивайте готовые
      формы и СОПы

      Смотрите
      бесплатные вебинары

      13 000 статей

      1 500 инструкций

      200 записей

      Абонемент в электронную медицинскую библиотеку в подарок!

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      Сайт предназначен для медицинских работников!


      Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, зарегистрируйтесь, и:

      Читайте экспертные
      материалы

      Скачивайте готовые
      формы и СОПы

      Смотрите
      бесплатные вебинары

      13 000 статей

      1 500 инструкций

      200 записей

      Абонемент в электронную медицинскую библиотеку в подарок!

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      Скачать файл может только медицинский работник!


      Чтобы подтвердить ваш статус, зарегистрируйтесь, и:

      Читайте экспертные
      материалы

      Скачивайте готовые
      формы и СОПы

      Смотрите
      бесплатные вебинары

      13 000 статей

      1 500 инструкций

      200 записей

      Абонемент в электронную медицинскую библиотеку в подарок!

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      Скачать файл может только медицинский работник!


      Чтобы подтвердить ваш статус, зарегистрируйтесь, и:

      Читайте экспертные
      материалы

      Скачивайте готовые
      формы и СОПы

      Смотрите
      бесплатные вебинары

      13 000 статей

      1 500 инструкций

      200 записей

      Абонемент в электронную медицинскую библиотеку в подарок!

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      Скачать файл может только медицинский работник!


      Чтобы подтвердить ваш статус, зарегистрируйтесь, и:

      Читайте экспертные
      материалы

      Скачивайте готовые
      формы и СОПы

      Смотрите
      бесплатные вебинары

      13 000 статей

      1 500 инструкций

      200 записей

      Абонемент в электронную медицинскую библиотеку в подарок!

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      Скачать файл может только медицинский работник!


      Чтобы подтвердить ваш статус, зарегистрируйтесь, и:

      Читайте экспертные
      материалы

      Скачивайте готовые
      формы и СОПы

      Смотрите
      бесплатные вебинары

      13 000 статей

      1 500 инструкций

      200 записей

      Абонемент в электронную медицинскую библиотеку в подарок!

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      Скачать файл может только медицинский работник!


      Чтобы подтвердить ваш статус, зарегистрируйтесь, и:

      Читайте экспертные
      материалы

      Скачивайте готовые
      формы и СОПы

      Смотрите
      бесплатные вебинары

      13 000 статей

      1 500 инструкций

      200 записей

      Абонемент в электронную медицинскую библиотеку в подарок!

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      Изображение предназначено для медицинских работников!


      Чтобы подтвердить ваш статус, зарегистрируйтесь, и:

      Читайте экспертные
      материалы

      Скачивайте готовые
      формы и СОПы

      Смотрите
      бесплатные вебинары

      13 000 статей

      1 500 инструкций

      200 записей

      Абонемент в электронную медицинскую библиотеку в подарок!

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      Изображение предназначено для медицинских работников!


      Чтобы подтвердить ваш статус, зарегистрируйтесь, и:

      Читайте экспертные
      материалы

      Скачивайте готовые
      формы и СОПы

      Смотрите
      бесплатные вебинары

      13 000 статей

      1 500 инструкций

      200 записей

      Абонемент в электронную медицинскую библиотеку в подарок!

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      Изображение предназначено для медицинских работников!


      Чтобы подтвердить ваш статус, зарегистрируйтесь, и:

      Читайте экспертные
      материалы

      Скачивайте готовые
      формы и СОПы

      Смотрите
      бесплатные вебинары

      13 000 статей

      1 500 инструкций

      200 записей

      Абонемент в электронную медицинскую библиотеку в подарок!

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      ×