text

🎁 УЛЁТНЫЕ СКИДКИ 30%! Поймать »

Здравоохранение

Динамика выявления факторов патогенности Helicobacter pylori при вирусных гепатитах и кишечных инфекциях

  • 15 апреля 2013
  • 19

Heliobacter pylori представляет собой грамнегативную бактерию, которая избирательно колонизирует эпителий желудка, вызывает хроническое воспаление слизистой оболочки и признана безусловным фактором развития рака желудка и MALT-лимфомы. По-видимому, H. pylori является частью индигенной биоты желудка с незапамятных времен. Сложное сочетание различных факторов определяет способность этой бактерии колонизировать слизистую желудка. H. pylori может посылать и принимать сигналы от клеточных компонентов в слизистой желудка, модулировать иммунный ответ хозяина, что позволяет хозяину и бактерии существовать в динамическом равновесии. За последние годы появились новые данные о стратегии вирулентности H. pylori и активности критических бактериальных детерминант, которые непосредственно взаимодействуют с клетками и тканями хозяина (липополисахарид (Л ПС), белки CagA и VacA, адгезин и др.

Интоксикационный синдром при многих инфекционных заболеваниях обусловлен ЛПС клеточной стенки грамотрицательной флоры и сходными с ними по действию различными патоген-ассоциированными молекулами (PAMPs).

Внимание! Для скачивания доступна новая книга:  «Молекулярно-биологические исследования» ,

ЛПС обусловливают развитие интоксикационного синдрома при кишечных инфекционных заболеваниях бактериальной этиологии, отягощают течение интоксикационного синдрома при вирусных инфекционных заболеваниях, например при вирусных гепатитах и др. заболеваниях.

Несмотря на многочисленные исследования, роль H. pylori при патологии гепатобилиарной зоны, печени и желчевыводящих путей, в т. ч. в развитии воспаления у больных острым вирусным гепатитом (ОВГ), а также многие вопросы, касающиеся в целом роли различных факторов патогенности H. pylori, остаются недостаточно изученными. В связи с этим нам представлялось интересным провести исследование факторов патогенности H. pylori (ЛПС, VacA, высокомолекулярных белков (ВМБ)) в сравнительном аспекте у больных с поражением печени (ОВГ с холестатическим синдромом (далее - “с холестазом”) и без него) и бактериальными кишечными инфекциями.

Для выявления факторов патогенности H. pylori было обследовано 97 больных ОВГ разной этиологии (HBV - 37 чел., HCV - 6 чел., HAV - 17 чел., HDV - 5 чел., HGV - 1 чел., миксты - 31 чел.: HDV+HCV - 11 чел., HBV+HCV - 18 чел., HAV+HBV - 1 чел., HAV+HCV - 1 чел.). Среди всех больных ОВГ желтушной формы холестаз наблюдался у 30 чел. Также обследовано 1729 больных острыми кишечными инфекциями (ОКИ) разной этиологии, в возрасте от 16 до 70 лет. В качестве контрольной группы были обследованы 42 практически здоровых донора крови.

Обследование больных проводили на протяжении острого периода заболевания и в период ранней реконвалесценции, материалом для исследования служили кал, слюна и кровь.

У больных ОВГ и ОКИ в биопробах выявляли: ЛПС/О-антигены S. sonnei, S. flexneri 1-5, S. newcastle; Salmonella В, С1, С2, D, Е серогрупп; Y. pseudotuberculosis I, III; Y. enterocolitica O3, 09, O7, 8, O4, 33, O6, 30; E. coli O157; Campylobacter (C. jejuni, C. coli, C. lari); H. pylori; а также присутствие комплекса ВМБ (в т. ч. CagA) и маркера VacA H. pylori методом коагглюти- нации с использованием наборов реагентов производства НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи.

Статистическая обработка данных проведена по программе “Biostatistica” для IBM PC с расчетом параметрических и непараметрических критериев Стьюдента и х2.

Выявление липополисахарида/О-антигена H. pylori

ЛПС/О-антигены возбудителей ОКИ (Shigella, Salmonella, Yersinia, Campylobacter, Escherichia), а также H. pylori при исследовании 3-5 проб кала и 2-3 проб крови от каждого больного были выявлены у 81,4% больных. У больных ОВГ с холестазом названные антигены выявлялись достоверно чаще, чем в группе больных без холестаза - 96,6 и 74,6% случаев соответственно (р < 0,01). Наиболее часто в копрофильтратах выявляли антигены H. pylori (57,7%), реже - антигены сальмонелл (45,4 ± 5,0%), иер- синий (44,3 ± 5,0%) и шигелл (17,5 ± 3,9%) из числа изученных.

В группе больных ОВГ с холестазом О-антигены H. pylori в виде единственных антигенов (моноантигены) выявлены с частотой 16,7%. Одновременное выявление антигенов нескольких возбудителей у больных этой группы установлено в 76,6% проб, при этом антигены H. pylori составляли около трети. У больных ОВГ без холестаза моно-О- антигены H. pylori выявлены в 22,0% проб. Одновременное обнаружение антигенов нескольких кишечных возбудителей (микст-инфекция) в этой группе отмечено в 43,3% проб, из них в 26,0% - с участием О-антигена H. pylori.

В контрольной группе О-антигены разных возбудителей выявлены в копрофильтратах у 16,6% обследованных (среди них моноантигены H. pylori - в 2,0% случаев, сочетание О-антигена H. pylori с О-антигенами других возбудителей - в 7,2%), что достоверно отличается от частоты выявления О-антигенов у больных ОВГ (р < 0,01).

В составе циркулирующих иммунных комплексов сыворотки крови частота выявления О-антигена H. pylori в целом составляла 16,7%, при этом в группе больных с холестазом - 32,0%, без холестаза - достоверно ниже, только 7,1% (р < 0,05).

Можно полагать, что связывание О-антигена H. pylori в специфические иммунные комплексы наблюдается на достаточно низком уровне и даже при высокой антигенной нагрузке (у больных ОВГ с холестазом) в кале выявляется только у трети больных. Ранее было отмечено, что уровень формирования иммунных комплексов, включающих О-антиген, был не адекватным уровню свободного О-антигена в кале.

Сравнение этих результатов с ранее полученными данными показывает, что частота выявления в кале О-антигенов H. pylori у больных ОВГ значительно выше, чем в среднем у здорового населения, но ниже, чем у больных при обострениях хронического гастрита и язвенной болезни, причем у последних были установлены прямые корреляции высоких показателей О-антигена с клиническими, морфологическими и ферментативными признаками поражения желудка и двенадцатиперстной кишки при хеликобактерной инфекции.

Выявление маркеров VacA-цитотоксина и комплекса высокомолекулярных белков

Дополнительно к изучению частоты обнаружения ЛПС/О-антигенов H. pylori в присутствии антигенов других возбудителей ОКИ представляло интерес изучить у больных ОВГ наличие других факторов: VacA-цитотоксина и комплекса ВМБ - маркеров островка патогенности, включая CagA, имеющих большое значение в патогенезе хеликобактерной инфекции и свидетельствующих о присутствии патогенного штамма.

Было обследовано 39 больных ОВГ различной этиологии (13 чел. - с синдромом холестаза и 26 чел. - без него). Всего из числа обследованных выявление маркера VacA в составе циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) сыворотки крови отмечено у 49,5% больных, ВМБ - у 72,7% (р < 0,05). Уровни маркера ВМБ у больных ОВГ с синдромом холестаза и без него (80,5 и 68,0% соответственно) в составе ЦИК были выше, чем VacA (61,0 и 43,0% соответственно) (р < 0,05).

Сезонные колебания частоты выявления липополисахарида/О-антигена, уровней высокомолекулярных белков и VacA-антигена Н. pylori у больных ОВГ

С учетом известных данных о типичных сезонных обострениях (весной и осенью) язвенной болезни и возможных сезонных колебаниях состояния иммунитета, нами впервые у больных вирусными гепатитами при возникновении заболевания в разные сезонные периоды года была прослежена динамика частоты выявления маркеров Н. pylori - О-антигена в ко- профильтратах и ЦИК, ВМБ и VacA-антигена в составе ЦИК. Кроме того, изучены частота выявления и уровни ВМБ и VacA-антигена в составе ЦИК в динамике желтушного периода (I, II и III периоды желтухи) в разные сезоны года.

В течение календарного года средняя частота выявления О-антигена была выше у больных, перенесших заболевание в зимние и весенние месяцы (72,5% положительных проб кала), в сравнении с перенесшими заболевание ОВГ в летние месяцы (52,5% проб, р = 0,023). В составе ЦИК сыворотки крови более частое выявление О-антигена также отмечено в зимне-весенние месяцы (40,0-50,0%, в среднем 43,8%), летом - реже (0,0-20,0%, в среднем 9,5%, р < 0,001) (таблица).

Высокая частота выявления О-антигена в кале у больных ОВГ зимой и весной свидетельствует, что размножение Н. pylori в организме в эти сезоны года было более интенсивным, чем летом. В целом это соответствовало сезонным колебаниям О-антигена, отмеченным ранее у практически здорового населения, однако при ОВГ в летний период года выявление О-антигена было выше.

Сезонные колебания частоты выявления О-антигена, VacA-антигена и высокомолекулярных белков Н. pylori в кале и в составе ЦИК сыворотки крови у больных острыми вирусными гепатитами

Периоды

обследования

Средняя частота выявления

О-антигена Н. pylori, %

VacA, %

Высоко

молекулярные

белки

Кал

ЦИК сыворотки крови

ЦИК сыворотки крови

ЦИК сыворотки крови

Зима - весна

72,0

43,8 *

40,9

70,8

Лето

52,5

9,5 *

26,0 +

70,0

VacA-антиген Н. pylori найден в составе ЦИК сыворотки крови в зимне-весенний период в 40,9% проб, летом - в 26,0% (р < 0,05), это соотношение сохранялось и в отдельных группах больных с холестазом (35,0 и 25,0% соответственно) и без него (44,0 и 27,0%).

В то же время ВМБ в составе ЦИК у больных ОВГ встречались с одинаковой частотой в зимне-весенний и летний периоды.

Средние уровни VacA-антигена в составе ЦИК у больных ОВГ в разные периоды года (зима-весна и лето) имели разную динамику на протяжении желтушного периода заболевания.

В январе - апреле у больных ОВГ в период появления желтухи (I период) уровень VacA-антигена составлял 0,25 ± 0,05 (lg 10 обратного титра антигена), затем достоверно повышался к периоду разгара желтухи (II период) до 0,50 ± 0,07 (р = 0,006) и далее к периоду стихания желтухи (III период) до 0,53 ± 0,075 (достоверно выше, чем его уровень в I период, р < 0,05).

У больных, перенесших ОВГ в летние месяцы, уровень VacA-антигена в составе ЦИК в I периоде обследования составлял 0,27 ± 0,095, затем ко II периоду незначительно повышался до 0,40 ± 0,11, а затем к III периоду снижался до 0,15 ± 0,087, становясь достоверно ниже уровня у больных, перенесших гепатит в летний период (р = 0,017).

Полученные данные свидетельствовали, что у больных ОВГ в желтушном периоде заболевания в зимне-весенний период VacA-антиген в составе ЦИК выявляется в большем количестве, чем летом.

Уровни ВМБ в составе ЦИК были выше, чем VacA, при этом у больных с холестазом в зимне-весенние месяцы отмечалось достоверное нарастание их уровня ко II периоду обследования (разгар желтушного периода) (р < 0,002), в летнее время уровни ВМБ на протяжении желтушного периода были достаточно монотонными.

Сезонные колебания частоты выявления липополисахарида/О-антигена, высокомолекулярных белков и VacA-антигена Н. pylori у больных ОКИ

Всего от 1729 больных ОКИ различной этиологии за 2007-2011 гг. были исследованы пробы кала, слюны, а также состав ЦИК сыворотки крови. В общей сложности наряду с обнаружением специфических О-антигенов тех или иных возбудителей ОКИ (шигелл, сальмонелл, иерсиний, кампилобакте- ров) у 56,6% больных в биопробах были выявлены маркеры H. pylori. Частота выявления ВМБ в составе ЦИК составляла в среднем 47,0%, VacA-антигена в составе ЦИК - 41,0%, и эти показатели были ниже, чем у больных ОВГ.

Анализ полученного материала показал наличие циклических колебаний частоты выявления О-антигена H. pylori на протяжении календарного года с подъемами в осенние (сентябрь - ноябрь), зимние (декабрь - февраль) и весенние (март - апрель) месяцы, а также летний спад частоты его выявления до 0,0-20,0% (июнь - август).

В противоположность сезонным изменениям О-антигена для связанного в ЦИК VacA-антигена отмечено повышение частоты выявления в летние месяцы, что отражает, вероятно, особенности изменения иммунных реакций организма в виде повышенной продукции специфических антител к VacA-антигену. Частота выявления VacA-антигенов в составе ЦИК обычно большую часть года значительно превышала таковую для свободных O-антигенов в кале (за исключением 2009 г.). Периоды падения частоты выявления связанных в ЦИК VacA-антигенов H. pylori ниже частоты выявления свободных О-антигенов (весной и осенью) и совпадают с известными (осенью и весной) периодами обострений диспепсий, хронических гастродуоденитов, язвенной болезни. Именно эти периоды свидетельствуют, как мы полагаем, о снижении иммунитета и уровня сывороточных антител к VacA-антигену на фоне активного размножения H. pylori (на что указывает высокая частота выявления О-антигена).

Следует отметить, что в целом диапазон сезонных колебаний частоты выявления О- и VacA-антигенов у больных ОКИ был меньше, чем диапазон их колебаний в периоды обострений хронических гастритов, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.

Ввиду тесной анатомо-морфологической взаимосвязи гепатопанкреа- тодуоденальной зоны, как известно, нередко сочетание патологии органов этой области. При доказанной роли H. pylori в патологии гастродуоденальной зоны его участие в патологии печени и желчевыводящих путей окончательно еще не определено, также неизвестно в целом влияние инфицирования H. pylori, его факторов патогенности на тяжесть и течение синдрома интоксикации, присутствующего при заболеваниях печени и кишечника. Противоречивость и немногочисленность получаемых результатов могут быть обусловлены тем, что для возбудителя характерна высокая изменчивость, его штаммы различаются по экспрессии факторов патогенности - VacA, CagA и др., а методы диагностики без выделения возбудителя сложны, дороги, не всегда достаточно специфичны и поэтому не могут применяться для многократных исследований на протяжении достаточно длительного времени у большого числа пациентов.

Проведенное нами исследование факторов патогенности H. pylori у больных ОВГ и кишечными инфекциями свидетельствует о более частом присутствии маркеров H. pylori у больных ОВГ и ОКИ, чем у практически здоровых лиц (доноров). При этом у больных ОВГ частота обнаружения О-антигена H. pylori выше частоты выявления О-антигенов отдельных возбудителей кишечных инфекций, в частности сальмонелл, иерсиний и шигелл.

Выявление наряду с О-антигенами также комплекса ВМБ (включая CagA) и маркера VacA-цитотоксина, по-видимому, свидетельствует об активной жизнедеятельности H. pylori, продукции ими патогенетически важных белков (CagA и VacA), на которые макроорганизм отвечает накоплением специфических антител.

Результаты выявления факторов патогенности H. pylori у больных ОВГ с холестазом в сравнении с данными у больных без холестаза, а также у практически здоровых лиц, присутствие у больных ОВГ VacA- цитотоксина и маркеров ВМБ в составе ЦИК с учетом данных литературы позволяют высказать предположение о важной патогенетической роли H. pylori в развитии холестаза, индуцированного воспалением. Не исключено, что в условиях поражения печени вирусной инфекцией у больных ОВГ воздействие факторов патогенности H. pylori более значительное, чем при сохраненной функции печени. В то же время присутствие вирусной инфекции и поражения печени, вероятно, является причиной того, что при возникновении заболевания ОВГ в летние месяцы почти у половины больных были выявлены О-антигены H. pylori в кале, в отличие от практически здорового населения  и обследованных нами больных ОКИ.

Вероятно, ЛПС/О-антиген H. pylori вносит весомый дополнительный вклад в развитие эндоинтоксикации наряду с ЛПС других возбудителей кишечных инфекций, т. к. часто выявляется одновременно с ними, тем более что H. pylori обладает также такими важными факторами патогенности как VacA, CagA и др., влияющими на продукцию цитокинов, в первую очередь ИЛ-8, цитотоксический эффект, апоптоз и т. д..

В результате проведенного исследования показана выраженная цикличность изменений частоты выявления О-антигена, ВМБ и VacA- антигена H. pylori у больных ОВГ и ОКИ с осенне-зимне-весенними подъемами и падением летом частоты выявления О-антигена в кале при противоположной динамике обнаружения VacA-антигена в составе ЦИК. Мы полагаем, что эту динамику маркеров H. pylori необходимо учитывать при оценке результатов диагностики хеликобактерной инфекции и результатов эрадикационной терапии.

Рекомендации по теме

Мероприятия

Мероприятия

Повышаем квалификацию

Посмотреть

Самое выгодное предложение

Самое выгодное предложение

Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

Мы в соцсетях
А еще:
Сайт предназначен для медицинских работников!


Материалы для zdrav.ru готовят лучшие эксперты в сфере здравоохранения. Чтобы защитить их авторские права, многие статьи на нашем сайте закрыты

Подтвердите ваш статус медработника - регистрация займет одну минуту.

Пакет готовых инструкций, чтобы пройти проверку Росздравнадзора в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
Зарегистрироваться
Сайт предназначен для медицинских работников!


Материалы для zdrav.ru готовят лучшие эксперты в сфере здравоохранения. Чтобы защитить их авторские права, многие статьи на нашем сайте закрыты

Подтвердите ваш статус медработника - регистрация займет одну минуту.

Пакет готовых инструкций, чтобы пройти проверку Росздравнадзора в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
Зарегистрироваться
×
Журнал
Гость, Ваш бесплатный доступ к журналу «Справочник заведующего КДЛ» сгорает через

Гость, вам предоставлен VIP-доступ к журналу «Справочник заведующего КДЛ»:
возможность скачивать шаблоны • доступ к видеотренингам • книги для КДЛ
Активировать доступ  
Сайт использует файлы cookie. Они позволяют узнавать вас и получать информацию о вашем пользовательском опыте. Это нужно, чтобы улучшать сайт. Посещая страницы сайта и предоставляя свои данные, вы позволяете нам предоставлять их сторонним партнерам. Если согласны, продолжайте пользоваться сайтом. Если нет – установите специальные настройки в браузере или обратитесь в техподдержку.