HTSA: определение фекальных биомаркеров в диагностике заболеваний кишечника

136

Данные о раннем выявлении рака кишечника на основе одновременного количественного определения уровня фекальных биомаркеров,гемоглобина и трансферрина методом HTSA (hemoglobin transferrin simultaneous assay).Определение биомаркеров

Новый диагностический тест, имеющий высокую чувствительность и специфичность, значительно повышает эффективность обследования, направленного на выявление патологии желудочно-кишечного тракта и ранней формы рака кишечника, что позволяет использовать его в программе диспансеризации при исследовании кала на скрытую кровь иммунохимическим методом.

Выявление патологий

В последние годы продолжается поиск лабораторных биомаркеров, позволяющих обеспечить раннее выявление патологий кишечника.

Различные воздействия на кишечник могут способствовать повышению проницаемости слизистой оболочки, развитию воспаления и образованию язв.

Такие клинические проявления, как абдоминальная боль, изменение консистенции и частоты стула, метеоризм, встречаются при многих заболеваниях (дивертикулярная болезнь, синдром раздраженного кишечника, аденома, рак, микроскопический колит, антибиотико-ассоциированная диарея и др.), что затрудняет постановку диагноза и приводит к несвоевременному оказанию медицинской помощи.

При наличии сходных симптомов у пациентов с органическими или функциональными (синдром раздраженной кишки) заболеваниями органов брюшной полости нередко назначаются дорогостоящие, болезненные инвазивные процедуры.

Рациональный подход к диагностике может базироваться на вспомогательном использовании неинвазивных тестов, таких как определение концентрации фекального трансферрина и гемоглобина и биомаркеры рака. В случае положительных результатов пациентам назначается дополнительное обследование (колоноскопия).

Одной из важных проблем современной медицины является диагностика онкологических заболеваний. Особую трудность представляет выявление рака кишечника на ранних стадиях.

В структуре онкологической заболеваемости (биомаркеры рака) рак толстой кишки занимает пятое место у мужчин (после рака легкого, желудка, кожи и предстательной железы) и четвертое — у женщин (после рака груди, кожи и желудка), а в качестве причины смерти — второе место у женщин (после рака груди) и третье место у мужчин (после рака легких и желудка).

Важную роль в развитии предраковых состояний и рака кишечника играет воспаление стенки кишки инфекционного и аутоиммунного характера, в т. ч. болезнь Крона.

Наряду с этим в настоящее время изучены генетические предикторы и механизмы развития заболевания, в т. ч. ассоциированные с канцерогенным действием бактериальных токсинов.

Помимо метаболических нарушений, способствующих канцерогенезу, и модулирования иммунного ответа, многие бактерии продуцируют токсины, обладающие канцерогенным действием путем влияния на межклеточные взаимодействия, внутриклеточную передачу сигнала или индуцирование мутаций и эпигенетических изменений.

Таким образом, бактериальные токсины могут функционировать и как инициирующие, и как развивающие агенты.

Например, способностью вырабатывать токсины с канцерогенным действием обладают некоторые штаммы Escherichia coli, поскольку синтезируемый ими колибактин вызывает двуспиральные разрывы в ДНК, что приводит к онкогенным мутациям.

Другие штаммы E. coli продуцируют цитотоксический некротизирующий фактор 1, активирующий белки семейства Rho, которые характеризуются ГТФ-азной активностью и являются ключевыми для регуляции многих витальных процессов (пролиферации, выживания, апоптоза, ангиогенеза и др.).

Выявление патологии (биомаркеры рака) верхнего отдела толстого кишечника, в т. ч. рака ободочной кишки, представляет сложность для клинициста. Японские специалисты  доказали, что о поражении верхних отделов толстого кишечника свидетельствует повышенный уровень фекального трансферрина, который попадает в просвет кишечника при повреждении слизистой оболочки кишки и сохраняется в кале более длительное время, чем гемоглобин.

Учитывая бессимптомное развитие рака кишечника на ранних стадиях, наличие предикторов процесса, в т. ч. воспалительный процесс, а также возможность малигнизации участков поражения слизистой оболочки кишечника при аутоиммунной патологии, обследованию с целью выявления предраковых состояний и рака желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) подлежат различные группы взрослого населения.

Проведенная совместно с гастроэнтерологами научно-практическая работа показала высокую эффективность рационального подхода к диагностике патологии ЖКТ.

«Мазок на флору» и «степень чистоты» как лабораторная услуга

«Мазок на флору» и «степень чистоты» как лабораторная услуга
посмотреть/скачать>>

Количественное определение гемоглобина 

В России проводятся эпидемиологические исследования для оценки распространенности КРР. Результаты таких исследований, выполненных в Кемеровской области ( 1995—2012 гг.), выявили тенденцию стабильного роста заболеваемости злокачественными опухолями ободочной и прямой кишки.

При этом отмечена высокая заболеваемость и смертность от КРР: уровень заболеваемости составил 38,97 на 1 тыс. населения.

Широко используемый в России тест на скрытую кровь, на результат которого влияет соблюдение пациентом диеты и прием ряда препаратов, не обладает необходимой диагностической чувствительностью.

По данным за 2012 г., в Кемеровской области при проведении профилактических осмотров с использованием теста на скрытую кровь выявляемость КРР составила 4,48% от общего числа зарегистрированных больных КРР. Обращает на себя внимание низкая выявляемость больных с III и IV стадиями заболевания — 60,63%.

Приведенные данные свидетельствуют о необходимости поиска новых подходов к выявлению онкологических заболеваний кишечника. Последние исследования указывают на то, что в качестве потенциального биомаркера рака и предраковых поражений кишечника может рассматриваться фекальный трансферрин.

Комбинация количественного определения фекального трансферрина и гемоглобина имеет самый высокий в настоящее время уровень диагностической чувствительности: 96% у пациентов с раком кишечника и 88% у пациентов с предраковыми состояниями.

При скрининге пациентов с низким риском развития КРР данное комплексное исследование позволило установить наличие опухолевого процесса в 30% случаев, что предопределило успешное использование в практике двух маркеров для скрининга КРР.

Важно!

Количественное определение иммунохимическими методами гемоглобина и трансферрина в кале дает прогноз о вероятности, стадии и локализации КРР.

В рамках государственной программы «Развитие здравоохранения в Российской Федерации» в соответствии с приказом Минздрава России от  03.02.2015 №  36-ан «Об утверждении порядка диспансеризации определенных групп взрослого населения» в перечень исследований внесено исследование кала на скрытую кровь иммунохимическим методом.

В последние годы в ряде регионов России (Омская область, Ханты-Мансийский автономный округ — Югра, г. Дубна Московской обл. и др.) обследование населения для выявления КРР проводится иммунохимическим методом на основе технологии iFOBT/FIT.

Значительным преимуществом данного метода является то, что обследование пациентов может проводиться без изменения обычного режима питания (не требуется специальная диета) и без ограничения в приеме лекарственных препаратов и витаминов (витамина С).

Одновременное определение концентрации фекального гемоглобина и трансферрина все шире внедряется в практику российского здравоохранения. Это значительно улучшает диагностику, чувствительность методики значительно повышается за счет комбинации данных тестов.

HTSA

HTSA позволяет в кратчайшие сроки выявить (или исключить) наличие лабораторных признаков повреждения слизистой оболочки кишечника, а также уровень и глубину повреждения. Установлено, что повышенный уровень фекального трансферрина свидетельствует о преимущественном поражении верхних отделов, а фекального гемоглобина — нижних отделов кишечника.

Высокие значения обоих показателей позволяют сделать заключение об обширном процессе. Чем выше показатель, тем больше глубина либо зона поражения.

Опыт врачей Клинического диагностического центра показал целесообразность использования двухдневного варианта HTSA с учетом того факта, что в случае повреждения слизистой оболочки кишечника включаются механизмы защиты (ограничение очага поражения), и это может привести к уменьшению концентрации биомаркера.

При использовании двухдневного варианта изменения показателей установлены дополнительно у 42,9% пациентов (в отличие от однодневного варианта). В случае подозрения на скрытое кровотечение из верхних либо нижних отделов кишечника или при скрининге КРР следует определять оба параметра (важное значение имеет концентрация аналита, особенно для наблюдения в динамике и оценки эффективности лечения).

Расширение возможностей лаборатории за счет внедрения HTSA позволяет:

  • повысить выявляемость воспалительных заболеваний, предраковых состояний и КРР на ранних стадиях с последующей, вполне обоснованной, колоноскопией;
  • провести дифференциальный диагноз между синдромом раздраженной кишки и органическим поражением стенки кишки;
  • снизить количество необоснованно назначенных колоноскопий;
  • сформировать группы риска по развитию КРР и эффективно осуществлять мониторинг;
  • своевременно проводить адекватные лечебные мероприятия.

Автоматизированный метод позволяет вести статистику, регистрируя результаты скрининга, и, соответственно, оценить его эффективность и истинную ситуацию с распространенностью данного вида новообразований среди населения региона.

Учитывая тот факт, что бактериальные токсины выступают в качестве инициирующих и стимулирующих факторов развития предраковых состояний и рака кишечника, мы полагаем, что особую группу наблюдения должны составить пациенты с перенесенной кишечной инфекцией, особенно сопровождавшейся гемоколитом.Предраковые состояния

Необходимо особо отметить целесообразность использования данного теста в педиатрии. При обследовании детей в возрасте от 1 года до 15 лет через 3–4 недели после завершения стандартной терапии кишечных инфекций (стафилококковая инфекция, ротавирусная инфекция, эшерихиоз, дизентерия) установлено, что у 23,6% пациентов оставались признаки повреждения слизистой оболочки кишечника: уровень трансферрина превышал нормативные показатели в 3–4 раза, гемоглобина — в 7–10 раз.

У троих детей с болезнью Крона отмечались очень высокие показатели: уровень трансферрина превышал нормативные значения в 5–7 раз, гемоглобина — в 10–18 раз, что свидетельствовало о системном выраженном процессе (с учетом этих результатов диагноз был выставлен гастроэнтерологом в течение двух дней).

Для контроля лечения пациента с инфекционным поражением кишечника (особенно с гемоколитом), сопровождающимся повышенным содержанием трансферрина либо гемоглобина в кале, целесообразно в динамике оценивать оба показателя.

Стандартизация преаналитического этапа при использовании метода HTSA, показывающие биомаркеры рака, обеспечивается сбором биоматериала в контейнеры со специальным жидким наполнителем и палочкой для сбора образца, дозирующей необходимое количество кала.

Использование метода не требует специальной диеты и отмены препаратов, значительно удлиняет период хранения биоматериала до доставки в лабораторию без снижения качеств (до 7 дней).

Полная автоматизация аналитического процесса позволяет исключить влияние человеческого фактора на результат анализа. При использовании одного контейнера с калом наряду с определением уровня трансферрина можно параллельно определить уровень гемоглобина.

Следует отметить значительные преимущества определения фекального трансферрина и гемоглобина по технологии iFOBT/FIT  перед известным тестом на скрытую кровь в кале:

  1. Во-первых, превосходство по чувствительности и специфичности.
  2. Во-вторых, данная технология позволяет определять глубину и уровень поражения.
  3. В-третьих, маркеры оцениваются количественно и повышают диагностическую эффективность ( в т. ч. на ранних стадиях) за счет определения трансферрина.
  4. В-четвертых, диета и прием препаратов не сказываются на результатах анализа; в-пятых, трансферрин подтверждает ложноотрицательные результаты исследования на гемоглобин.

Оптимально использование двухдневного варианта (кал забирается при двух актах дефекации) с учетом того факта, что в случае повреждения слизистой оболочки кишечника могут реализовываться механизмы ее защиты.

На базе Клинического диагностического центра и Омской государственной медицинской академии был проведен анализ результатов обследования 486 пациентов (средний возраст 51,3 ± 8,7 лет, 61,9% женщин и 38,1% мужчин), обратившихся к врачу по поводу кишечных расстройств (изменение частоты и характера стула, абдоминальный болевой синдром или дискомфорт).

Основным поводом для обследования были «симптомы тревоги» (возраст старше 50 лет, короткий анамнез заболевания, необъяснимая потеря веса, персистенция симптомов, боли в животе, изменение консистенции и частоты стула, метеоризм).

Этим пациентам проводилось параллельное исследование кала методом HTSA и тест на скрытую кровь с использованием иммунохроматографии. При применении метода HTSA положительные результаты были получены у 112 чел. (23,0%), при этом структура положительных результатов показала, что только уровень трансферрина был повышен в 41 случае, гемоглобина и трансферрина — в 38, и только гемоглобина — в 33 случаях.

Тест на скрытую кровь дал положительные результаты только у 24 чел. (4,9% случаев) — в 5 раз меньше, чем метод HTSA. Среди пациентов, у которых получен отрицательный результат, были 2 чел. с КРР ( III–IV стадия). Это подтверждает низкую чувствительность стандартного теста по определению скрытой крови в кале.

Совпали положительные результаты по определению гемоглобина у 16 пациентов. У пациентов, у которых исследование выявило повышенное содержание трансферрина, стандартный тест на скрытую кровь в кале давал отрицательные результаты.

Таким образом, подтверждена высокая чувствительность метода HTSA.

Использование новой методики, обладающей более высокой чувствительностью и специфичностью, значительно повышает результативность обследования пациентов при выявлении патологии ЖКТ и рака кишечника на ранних стадиях, что позволяет широко и эффективно ее применять в процессе диспансеризации при исследовании кала на скрытую кровь иммунохимическим методом.

Статья из журнала "Справочник заведующего КДЛ" № 11, 2015

Читайте в ближайших номерах журнала «Справочник заведующего КДЛ»
    Читать >>


    Ваша персональная подборка

      Подписка на статьи

      Чтобы не пропустить ни одной важной или интересной статьи, подпишитесь на рассылку. Это бесплатно.

      Рекомендации по теме

      Мероприятия

      Мероприятия

      Повышаем квалификацию

      Посмотреть

      Самое выгодное предложение

      Самое выгодное предложение

      Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

      Живое общение с редакцией

      А еще...








      Наши продукты






















      © МЦФЭР, 2006 – 2017. Все права защищены.

      Портал zdrav.ru - медицинский портал для медицинских работников. Новости и статьи для главных врачей, медицинских сестер, заместителей главного врача, специалистов по качеству медицинской помощи, заведующих КДЛ, медицинских юристов, экономистов ЛПУ, провизоров и руководителей аптек.

      Информация на данном сайте предназначена только для медицинских работников. Ознакомьтесь с соглашением об использовании.
      Свидетельство о регистрации средства массовой информации ПИ № ФС77-64203 от 31.12.2015.

      Политика обработки персональных данных

      
      • Мы в соцсетях
      Сайт использует файлы cookie. Они позволяют узнавать вас и получать информацию о вашем пользовательском опыте. Это нужно, чтобы улучшать сайт. Если согласны, продолжайте пользоваться сайтом. Если нет – установите специальные настройки в браузере или обратитесь в техподдержку.
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 9400 статей
      — 4000 ответов на вопросы
      — 80 видеосеминаров
      — множество форм и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные калькуляторы

      Вы также получите подарок — журнал в формате pdf

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 9400 статей
      — 4000 ответов на вопросы
      — 80 видеосеминаров
      — множество форм и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные калькуляторы

      Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      ×
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 9400 статей
      — 4000 ответов на вопросы
      — 80 видеосеминаров
      — множество форм и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные калькуляторы

      Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      ×
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 9400 статей
      — 4000 ответов на вопросы
      — 80 видеосеминаров
      — множество форм и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные калькуляторы

      Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      ×