Методика валидации вакуумных пробирок

225

Референтные пробиркиВ данной статье рассматривается опыт применения вакуумных пробирок Univac (Эйлитон, Россия-исследуемые пробирки) при проведении биохимического анализа крови, сравнение результатов анализов с данными, полученными при использовании референтных пробирок Vacuette (Greiner, Австрия).

Исследование проведено в соответствии с требованиями Института клинико-лабораторных стандартов (CLSI).

Лабораторная диагностика

Учитывая высокую значимость лабораторной диагностики для верификации диагноза и определения тактики лечения, необходимо проводить контроль качества исследований на аналитическом и преаналитическом (использование вакуумных пробирок) этапах лабораторного процесса.

Для валидации вакуумных пробирок применяют методику, разработанную CLSI  (протокол «Валидация и верификация пробирок для взятия венозной и капиллярной крови» CLSI GP-34A). Выбор производителя референтных пробирок осуществляется лабораторией, проводящей исследование.

В итоговый протокол вносятся сведения о производителях пробирок, оборудовании, на котором данное исследование проводилось, сравниваются полученные показатели биохимического анализа крови.

Статья основывается на данных, полученных в результате исследования биохимического анализа крови, забор которой производили  вакуумными пробирками Univac и  Vacuette.  Исследование проводилось в мае 2016 года на базе в ГБУЗ Клиническая больница Святителя Луки, г. Санкт-Петербург.

В исследовании участвовали 40 пациентов. Забор крови производился путем флеботомии одновременно в 4 пробирки с кремнеземом по 2 мл крови в каждой, биом атериал исследовался не позднее 2-х часов после забора крови на биоанализаторе RX Imola Randoх (Ирландия).

Исследуемые биохимические показатели: АЛТ, АСТ, амилаза, щелочная фосфатаза (ЩФ), общая креатинкиназа (КК), общий билирубин, креатинин, общий белок, общий холестерин, холестерин  липопротеины высокой плотности (ХС ЛПВП), мочевина, мочевая кислота, глюкоза, железо, электролиты (кальций, калий, натрий, хлор).

При сравнении результатов  пользовались протоколом CLSI EP9-A3 «Измерительная процедура сравнения и оценки смещения с помощью проб пациентов».  Основные сравнительные показатели, определяемые в исследовании: показатель смещения (В), стандартного отклонения (SD), коэффициент вариации (CV %) дубликатов, анализировали в интервалах измерения низких, средних и высоких значений.

Кроме того оценивали влияние аналитических характеристик качества лабораторного анализа на клиническую интерпретацию с помощью изучения «клинической точности», характеризующей степень риска неправильной постановки диагноза из-за аналитических ошибок. Результаты биохимического анализа разделяли на 3 зоны: А,B,С исходя из мнений практикующих врачей.

Зона А приравнена к общей ошибке (ТЕ%, total error), является приемлемой ошибкой (АТЕ, total allowable error), т.е. при попадании значения в эту зону, ошибок клинической интерпретации не возникало. Зона В в 2 раза превышала зону А, характеризовалась незначительными ошибками интерпретации. Зона С – в 3 раза превышала зону А, являлась зоной риска значимых диагностических ошибок.

Алгоритм приема закупленных МИ для in vitro диагностики

Алгоритм приема закупленных МИ для in vitro диагностики
посмотреть/скачать>>

Для определения статистической значимости различий парных выборок использовали t-критерий Стьюдента, тест Фишера (F-тест) использовали для сравнения показателей CV% сходимости дубликатов и общей ошибки (TE%), учитывали факторы биологической вариации.

Результаты.

Таблица 1. Показатели биохимических исследований образцов крови, отобранных при применении пробирок Univac и Vacuette

Показатели образцов крови

Примечание -  значимые различия по F-критерию (p < 0,05);  -  значимые различия по парному t-зависимому критерию (p < 0,05). Жирным шрифтом - характеристики качества, превысившие критерии международных документов.

Статистически значимые различия между пробами из пробирок Univac и Vacuette (p < 0,05) были обнаружены  для концентраций креатинина, общего белка, ХС ЛПВП, мочевой кислоты и хлора, при допустимых по  международными требованиями качества В%, CV% и TE% (табл. 1).  

Выявленные статистически значимые различия для креатинина не повлияли на клиническую интерпретацию, так как 97,5% значений оказались в зоне А, и одно значение находилось на границе зон А и В. Показатель смещения (В) не превышал международные нормы, стандартное отклонение (SD) и коэффициент вариации (CV%) сходимости из дубликатов практически не отличались.

Измерения креатинина

Рис. 1. График регрессии результатов измерения креатинина сыворотки крови, полученной при использовании пробирок Univac (ось Y) и Vacuette (ось X).

Вертикальные пунктирные линии  - разбиение диапазона измеряемых величин на интервалы: от 40 до 97 мкмоль/л, от 97 до 120, от 120 до 160 мкмоль/л.

Штрих-пунктирные линии вдоль графика регрессии — общая приемлемая ошибка (ATE) зоны клинически точных результатов зоны, А; пунктирная линия серого цвета — граница между зонами  В и С; пунктирная линия в центре — средняя линия (Х = Y).

Сравнении качества показателей проб крови

Рис. 2. Квантильный график (Q-Q plot) сравнения результатов измерения концентрации креатинина сыворотки крови, полученной при использовании пробирок Vacuette и Univac.

При сравнении качества показателей проб крови  из разных пробирок было выявлено различие коэффициента вариации (CV%) сходимости из дубликатов для показателей АЛТ, амилазы, ЩФ, КК, кальция и калия.

Показатели коэффициента вариации дубликатов были выше для результатов образцов из пробирок Univac (p < 0,05) для активности АЛТ, амилазы, ЩФ и КК, а в пробирках Vacuette (p < 0,05) СV% сходимости был выше при измерении Ca2+ и K+ (рис. 3).

Но в обоих случаях были в допустимых  пределах аналитического коэффициента вариации, рекомендованного в соответствии с базой данных по биологической вариации (искл. – общий кальций из пробирок Vacuette).

График полученный при использовании пробирок

Рис. 3. CV% сходимости биохимических показателей крови, полученной при использовании пробирок Univac и Vacuette.

Показатели  Ca2+ сыворотки крови из пробирок Univac и  Vacuette не имели статистически значимых отличий, однако коэффициент вариации  CV% сходимости из дубликатов превышал рекомендуемые международные критерии качества (p < 0,05).

Выраженное смещение до 14,9% наблюдалось  в диапазоне низких значений, в диапазоне референтных значений показатели коэффициента вариации сходимости были в пределах допустимого.

Показатели регрессии (slope и intercept) отличались от приемлемых данных также в диапазоне низких значений (табл. 2) (рис. 4). 92,5% полученных значений Ca2+ попали в зону А, 2,5% - в зоне В, 5% в зоне С (рис.4). Проба, в которой были выраженные различия в результатах измерений общего Са2+, была взята у пациента, проходившего курс химиомерапии.

Таблица 2

Сопоставление точностных характеристик измерения концентрации Ca2+ в образцах сыворотки крови, полученных при использовании пробирок Vacuette и Univac

Разбиение интервала измерения общего кальция

Количество

В

B%

s(X)

s(Y)

tdep

p

Различия

Slope

Interc

 

 

Низкий

1,40

2,02

4

0,26

14,9

0,2

0,0

1,449

0,243

NS

2,35

-1,95

Средний

2,03

2,40

31

0,00

0,0

0,0

0,0

0,084

0,933

NS

1,11

-0,25

Высокий

2,41

2,60

5

0,04

1,8

0,0

0,1

0,845

0,445

NS

1,08

-0,16

Примечание. NS — статистически незначимые различия.

График регрессии результатов

Рис. 4.График регрессии результатов измерения концентрации  кальция сыворотки крови, полученной при использовании пробирок Univac (ось Y) и Vacuette (ось X).

Вертикальные пунктирные линии — разбиение диапазона измеряемых величин на интервалы: от 1,4 до 2,01 ммоль/л, от 2,01 до 2,4, от 2,4 до 2,6 ммоль/л.

Штрих-пунктирные линии вдоль графика регрессии — общая приемлемая ошибка (ATE) зоны клинически точных результатов зоны, А; пунктирная линия серого цвета — граница между зонами В и С; пунктирная линия в центре — средняя линия (Х = Y).

Таким образом,  можно сделать вывод о сопоставимости данных, полученных при использовании пробирок Univac и Vacuette. Вариабельность показателей находилась в допустимых пределах. Различия результатов в зоне С требует дополнительного изучения.

По мнению зарубежных авторов, некоторые материалы вакуумных пробирок (ПАВ, пробка, активатор сгустка и т.д.) могут взаимодействовать с компонентами крови, что и приводит к различию полученных результатов.

Читайте в ближайших номерах журнала «Справочник заведующего КДЛ»
    Читать >>


    Ваша персональная подборка

      Подписка на статьи

      Чтобы не пропустить ни одной важной или интересной статьи, подпишитесь на рассылку. Это бесплатно.

      Рекомендации по теме

      Мероприятия

      Мероприятия

      Повышаем квалификацию

      Посмотреть

      Самое выгодное предложение

      Самое выгодное предложение

      Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

      Живое общение с редакцией

      А еще...


      Мероприятия








      Наши продукты






















      © МЦФЭР, 2006 – 2017. Все права защищены.

      Портал zdrav.ru - медицинский портал для медицинских работников. Новости и статьи для главных врачей, медицинских сестер, заместителей главного врача, специалистов по качеству медицинской помощи, заведующих КДЛ, медицинских юристов, экономистов ЛПУ, провизоров и руководителей аптек.

      Информация на данном сайте предназначена только для медицинских работников. Ознакомьтесь с соглашением об использовании.
      Свидетельство о регистрации средства массовой информации ПИ № ФС77-64203 от 31.12.2015.

      Политика обработки персональных данных

      
      • Мы в соцсетях
      Сайт использует файлы cookie. Они позволяют узнавать вас и получать информацию о вашем пользовательском опыте. Это нужно, чтобы улучшать сайт. Посещая страницы сайта и предоставляя свои данные, вы позволяете нам предоставлять их сторонним партнерам.Если согласны, продолжайте пользоваться сайтом. Если нет – установите специальные настройки в браузере или обратитесь в техподдержку.
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 9400 статей
      — 4000 ответов на вопросы
      — 80 видеосеминаров
      — множество форм и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные калькуляторы

      Вы также получите подарок — журнал в формате pdf

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 9400 статей
      — 4000 ответов на вопросы
      — 80 видеосеминаров
      — множество форм и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные калькуляторы

      Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      ×
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 9400 статей
      — 4000 ответов на вопросы
      — 80 видеосеминаров
      — множество форм и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные калькуляторы

      Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      ×
      Сайт предназначен для медицинских работников!

      Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
      Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

      — 9400 статей
      — 4000 ответов на вопросы
      — 80 видеосеминаров
      — множество форм и образцов документов
      — бесплатная правовая база
      — полезные калькуляторы

      Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

      У меня есть пароль
      напомнить
      Пароль отправлен на почту
      Ввести
      Я тут впервые
      И получить доступ на сайт Займет минуту!
      Введите эл. почту или логин
      Неверный логин или пароль
      Неверный пароль
      Введите пароль
      ×