text
Портал для медицинских работников

Внутрилабораторный контроль качества неколичественных методов ИФА

  • 11 февраля 2018
  • 392

Построение р - картВ статье приведены результаты построения р-карт для контроля качества по частоте выявления поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg) и антител к вирусу гепатита С (анти-ВГС) в 36 лабораториях – участницах проекта "Организация внутрилабораторного контроля качества неколичественных методов ИФА".

Внимание! Для скачивания доступна новая книга:  «Молекулярно-биологические исследования» ,

Из статьи Вы узнаете:


По результатам проекта установлена средняя частота выявления маркеров: HBsAg – 2%, анти-ВГС – 10%. Использовать для оперативного контроля построенные по ретроспективным данным р-карты частот выявления анти-ВГС и HBsAg возможно соответственно в 63 и 67% лабораторий-участниц.

Если в большинстве аналитических серий маркер не обнаруживается, использование р-карт по частоте выявления маркера для проведения внутрилабораторного контроля качества неинформативно.

В этом случае необходимо увеличить число образцов в одном исследовании или дополнить алгоритм контроля с привлечением контрольного материала, содержащего маркер в низкой концентрации. Контрольный материал позволит подтвердить аналитическую достоверность исследования и принять все первично отрицательные результаты как истинно отрицательные.

Внутрилабораторный контроль качества (ВКК) обязателен для всех видов исследований, выполняемых в лаборатории. Правила ВКК количественных исследований приводят нормативные документы.

Для неколичественных методов применяют оценку по частоте обнаружения с их помощью искомых компонентов биоматериалов, включая компоненты, характерные (по морфологии, химическому или биологическому сродству с определенными хромофорами, флуорофорами, антителами) для специфических форм патологии, для диагностики которых предназначен данный вид исследования.

Опыт централизации лабораторной службы

Опыт централизации лабораторной службы
посмотреть/скачать>>

В проекте «Организация внутрилабораторного контроля качества неколичественных методов ИФА в лаборатории» по частоте выявления лабораторных показателей (маркеров) – поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg) и антител к вирусу гепатита С (анти-ВГС) – участвовали 36 лабораторий:

  1. Курской области (3 лаборатории).
  2. Пензенской области (21).
  3. Приморского края (8).
  4. Республики Бурятии (4 лаборатории).

Для лабораторий был разработан шаблон «частота выявления маркера». В шаблон следовало внести ретроспективные данные хотя бы 20 аналитических серий и указать, сколько образцов исследовали и сколько получили положительных результатов первичного выявления HBsAg в каждой аналитической серии.


Лаборатории Приморского края заполнили еще один шаблон – с ретроспективными данными аналитических серий, в которых исследовались образцы на наличие анти-ВГС.

Р-карты частот выявления HBsAg и анти-ВГС строили согласно. Достоверность различий между двумя выборками вычисляли с помощью U-критерия Манна – Уитни для малых выборок.

Применение оценки частоты выявления HBsAg для организации внутрилабораторного контроля качества

Для проведения ВКК по частоте обнаружения HBsAg использовался метод построения контрольных карт для альтернативных данных.

Альтернативные данные в настоящей работе – наличие или отсутствие HBsAg в каждом образце крови рассматриваемой аналитической серии.

На основании этих данных производится подсчет числа первично положительных образцов, содержащих HBsAg, из числа исследованных. Сотрудники лабораторий-участниц внесли ретроспективные сведения в шаблоны «частота выявления маркера».

Данные 36 шаблонов представлены в табл. 1. Число аналитических серий варьировало от 20 до 61, в среднем 30. Всего исследованы в 1072 аналитических сериях 61 038 образцов, 1215 образцов определены как первично положительные, содержащие HBsAg.

Средняя частота выявления HBsAg по данным 1072 серий составила 2%.

Таблица 1

Данные шаблонов «частота выявления HBsAg» 36 лабораторий – участниц проекта

Лаборатория Частота выявления HBsAg, % Число анали-тических серий Из них без первично положи-тельных результатов Доля аналитических серий без положи- тельных результатов, % Среднее число исследованных образцов в аналити-ческой серии Всего исследовано образцов Всего первично положи-тельных образцов
1 0,9 29 15 52 77 2243 20
2 0,8 28 13 46 71 1976 16
3 0,4 25 22 88 44 1105 4
4 1,6 20 3 15 85 1708 27
5 2,6 29 22 76 11 310 8
6 2,2 29 14 48 33 956 21
7 1,6 29 9 31 84 2435 40
8 0,7 29 20 69 67 1939 14
9 1,3 29 13 45 67 1937 25
10 1,3 29 20 69 24 702 9
11 0,5 34 21 62 90 3067 16
12 0,3 30 26 87 48 1434 4
13 2,1 29 3 10 110 3176 66
14 1,4 20 11 55 41 829 12
15 1,5 29 18 62 36 1033 15
16 0,3 24 20 83 91 2184 6
17 0,4 29 24 83 66 1907 7
18 3,7 56 0 0 77 4288 158
19 1,9 29 26 90 5 159 3
20 1,8 29 15 52 33 949 17
21 1,5 29 8 28 83 2398 35
22 6,2 22 4 18 41 904 60
23 0,9 24 20 83 11 268 4
24 6,3 24 8 33 25 605 38
25 4,1 45 4 9 56 2502 102
26 2,3 29 16 55 60 895 20
27 1,8 40 13 33 76 3053 52
28 4,0 29 4 14 53 1537 71
29 2,3 61 23 38 44 2674 62
30 1,5 27 6 22 68 1830 27
31 3,5 21 0 0 76 1595 56
32 3,1 30 7 23 61 1830 57
33 3,7 43 21 49 23 972 36
34 1,5 20 4 20 130 2600 38
35 2,0 22 0 0 85 1880 38
36 2,7 21 9 43 72 1158 31
Среднее 2 30 13 44 59 1696 34
Сумма 1072 462 61 038 1215

Были построены 36 р-карт частот выявления HBsAg. Данные каждой серии вносились подряд как отражающие непрерывный ход производственного процесса.

р-карта по данным

На рис. 1 Приведена р-карта по данным первых 20 серий из лаборатории № 18, на карту нанесены частоты последующих аналитических серий – с 21-й по 56-ю. Можно видеть отклонение частоты выявления маркера за верхнюю контрольную границу +3s.

Активируйте доступ к журналу «Справочник заведующего КДЛ» и читайте проверенные экспертами статьи:

Рис. 1.Р-карта частот выявления HBsAg в первых 20 установочных сериях шаблона «частота выявления маркера» из лаборатории № 18. Нанесены частоты серий с 21-й по 56-ю

Выход вычисленной частоты выявления HBsAg за верхнюю контрольную границу +3s в 20 аналитических сериях, используемых для построения р-карт, отмечен в 12 (33%) р-картах, не было ни одного отклонения за нижнюю контрольную границу -3s.

В 1 р-карте было 2 выброса, в остальных 11 – по 1 выбросу за верхнюю контрольную границу +3s. Если контрольная карта строится впервые, «то часто оказывается, что процесс статистически неуправляем. Контрольные границы, рассчитанные на основе данных такого процесса, будут иногда приводить к ошибочным заключениям, поскольку они могут оказаться слишком широкими».

Внимание

Прежде чем устанавливать постоянные параметры контрольных карт, необходимо привести процесс в статистически управляемое состояние.

При проведении установочных серий, данные которых используются для построения р-карты, необходимо использовать контрольный материал для слежения за стабильностью процесса.

Построенные по ретроспективным данным р-карты частот выявления HBsAg можно использовать для дальнейшего оперативного контроля в 24 (67%) из 36 (100%) лабораторий – участниц проекта.

Аналитические серии без первично положительных результатов выявления HBsAg

HBsAg выявлялся хотя бы в одном образце во всех аналитических сериях в 3 (8%) из 36 лабораторий. В остальных 33 лабораториях доля серий без первично положительных результатов варьировала от 9 до 90% (табл. 1). HBsAg не был выявлен ни в одном из образцов в 462 (43%) из 1072 (100%) аналитических серий.

В 16 лабораториях доля аналитических серий, в которых HBsAg не выявлялся, составляла от 0 до 40%. Среднее число образцов для исследования в одной серии – 72 ± 26 (Xср ± s). В 20 других лабораториях доля серий, в которых HBsAg не был выявлен, варьировала от 40 до 90%, среднее число образцов для исследования в одной серии – 48 ± 26 (Xср ± s).

Вычисленный U-критерий Манна – Уитни, позволяющий оценить различия между двумя малыми выборками, составил Uэмп = 84,5 при Uкрит р ≤ 0,01 = 87, различия значимы.

Это означает, что в 16 лабораториях с долей аналитических серий без положительных результатов от 0 до 40% в одно исследование берется достоверно больше образцов (в среднем 72), чем в 20 лабораториях с долей аналитических серий без положительных результатов от 40 до 90% (в среднем 48).

Организация ВКК по частоте обнаружения лабораторного показателя предполагает, что маркер выявляется. То есть во всех аналитических сериях должны быть первично положительные результаты его обнаружения.

Если в большинстве серий маркер не обнаружен, то сложно проводить ВКК по частоте его выявления, т. к. невозможно отличить истинно отрицательные и ложноотрицательные результаты. В этом случае необходим контрольный материал, содержащий маркер в низкой концентрации.

Например, МИНИпол-2 (АО «Вектор-Бест»), который позволит подтвердить аналитическую достоверность исследования и принять все первично отрицательные результаты как истинно отрицательные, не содержащие маркер.

К сведению

Таким образом, ВКК по частоте выявления HBsAg выполним при условии выявления этого маркера в большинстве аналитических серий, что можно достигнуть путем увеличения числа образцов в каждой аналитической серии хотя бы до 72.

Применение оценки частоты выявления анти-ВГС для организации внутрилабораторного контроля качества

Получено 8 заполненных шаблонов «частота выявления маркера», данные внесены в табл. 2. Число аналитических серий, в которых исследовался маркер, варьировало в 8 шаблонах от 21 до 61, в среднем 35.

Средняя частота выявления анти-ВГС по данным 280 аналитических серий составила 10%, т. е. в 5 раз выше средней частоты выявления HBsAg.

Всего исследовано в 280 сериях 14 167 образцов, 1373 образца определены как первично положительные, содержащие анти-ВГС. Минимальная частота выявления анти-ВГС – 4% в лаборатории № 27, максимальная – 24% в лаборатории № 33.

Были построены 8 р-карт частот выявления анти-ВГС. На рис. 2 приведена р-карта по данным первых 20 аналитических серий из лаборатории № 29. На карту нанесены частоты последующих серий – с 21-й по 41-ю. При анализе карты можно отметить отсутствие отклонений за контрольные границы ±3s.

Выход частоты выявления анти-ВГС за верхние контрольные границы +3s в 20 установочных сериях, используемых для построения р-карт, отмечен в 3 (38%) р-картах лабораторий № 26, 28, 33, что указывает на случайные ошибки при проведении анализа на анти-ВГС в этих лабораториях. Не обнаружено ни одного отклонения за нижние контрольные границы -3s.

Таблица 2

Данные шаблонов «частота выявления анти-ВГС» 8 лабораторий – участниц Приморского края

Лаборатория Частота выявления анти-ВГС, % Число аналитических серий Из них без первично положи-тельных результатов Доля аналитических серий без положи-тельных результатов, % Среднее число исследо- ванных образцов в аналити-ческой серии Всего исследовано образцов Всего первично положи-тельных образцов
26 8 29 4 14 31 895 68
27 4 41 2 5 75 3078 110
28 14 29 0 0 53 1537 216
29 12 61 1 2 44 2674 323
30 10 27 0 0 68 1827 189
31 9 21 0 0 77 1621 142
32 8 29 1 3 61 1765 142
33 24 43 3 7 18 770 183
Среднее 10 35 1 4 53 1771 172
Сумма 280 11 14 167 1373

Рис. 2. Р-карта частот выявления анти-ВГС в первых 20 аналитических сериях шаблона «частота выявления маркера» из лаборатории № 29. Нанесены частоты серий с 21-й по 41-ю.

Оперативный контроль

При проведении установочных серий, данные которых используются для построения р-карты, необходимо использовать контрольный материал для слежения за стабильностью процесса .

Построенные по ретроспективным данным р-карты частот выявления анти-ВГС можно использовать для дальнейшего оперативного контроля в 5 (63%) из 8 (100%) лабораторий.

Аналитические серии без первично положительных результатов обнаружения анти-ВГС

Антитела к ВГС выявлялись хотя бы в одном образце во всех аналитических сериях в 3 (38%) из 8 (100%) лабораторий. В остальных 5 лабораториях доля серий без первично положительных результатов выявления анти-ВГС варьировала от 2 до 14% (табл. 2).

Маркер анти-ВГС не выявлен ни в одном из образцов в 11 (4%) аналитических сериях из 280, что в 10 раз меньше показателя для HBsAg (43%).

В 2 лабораториях с долей аналитических серий, в которых маркер не выявлялся, 7 и 14%, среднее число образцов для исследования в одной аналитической серии в лаборатории составило 25 ± 9 (Xср ± s).

В 6 лабораториях с долей аналитических серий без положительных результатов от 0 до 5% среднее число образцов для исследования в одной аналитической серии в лаборатории составило 62 ± 12 (Xср ± s).

Вычисленный U-критерий Манна – Уитни, позволяющий оценить различия между двумя малыми выборками, составил для среднего числа образцов в одно исследование в аналитической серии в 2 и 6 лабораториях Uэмп = 0 при Uкрит р ≤ 0,05 = 0, различия значимы.

Это значит, что в 6 лабораториях с долей аналитических серий без положительных результатов от 0 до 5% в одно исследование берется достоверно больше образцов (в среднем 62), чем в 2 лабораториях с долей аналитических серий без положительных результатов от 7 до 14% (в среднем 25).

Фактически видны те же закономерности, что и при анализе связи числа исследуемых образцов и доли аналитических серий без положительных результатов обнаружения HBsAg.

При этом средняя частота выявления анти-ВГС (10%) в 5 раз выше средней частоты выявления HBsAg (2%), а доля аналитических серий без положительных результатов в 10 раз ниже, поэтому ВКК по частоте обнаружения анти-ВГС проводить гораздо проще.

Контрольный материал с низким содержанием маркера типа МИНИпол-2 следует использовать только при повторном исследовании образцов аналитической серии без первично положительных результатов.

Рекомендации по теме

Мероприятия

Мероприятия

Повышаем квалификацию

Посмотреть

Самое выгодное предложение

Самое выгодное предложение

Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

Мы в соцсетях
А еще:
Сайт предназначен для медицинских работников!


Чтобы подтвердить ваш статус, зарегистрируйтесь, и:

Читайте экспертные
материалы

Скачивайте готовые
формы и СОПы

Смотрите
бесплатные вебинары

13 000 статей

1 500 инструкций

200 записей

Абонемент в электронную медицинскую библиотеку в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Сайт предназначен для медицинских работников!


Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, зарегистрируйтесь, и:

Читайте экспертные
материалы

Скачивайте готовые
формы и СОПы

Смотрите
бесплатные вебинары

13 000 статей

1 500 инструкций

200 записей

Абонемент в электронную медицинскую библиотеку в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Сайт предназначен для медицинских работников!


Чтобы подтвердить ваш статус, зарегистрируйтесь, и:

Читайте экспертные
материалы

Скачивайте готовые
формы и СОПы

Смотрите
бесплатные вебинары

13 000 статей

1 500 инструкций

200 записей

Абонемент в электронную медицинскую библиотеку в подарок!

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
×

Сайт использует файлы cookie. Они позволяют узнавать вас и получать информацию о вашем пользовательском опыте. Это нужно, чтобы улучшать сайт. Посещая страницы сайта и предоставляя свои данные, вы позволяете нам предоставлять их сторонним партнерам. Если согласны, продолжайте пользоваться сайтом. Если нет – установите специальные настройки в браузере или обратитесь в техподдержку.