Аналитический обзор литературы по методам лабораторной диагностики ротавирусной инфекции человека

1960
Аналитический обзор литературы по методам лабораторной диагностики ротавирусной инфекции человека

(по материалам, предоставленным компанией ГЕМ  http://www.hemltd.ru/publications)

Дрискелл Дж.Д., Жу Ю., Кирквуд Ц.Д. и соавт. Поверхностная усиленная рамановская спектроскопия — быстрый и чувствительный метод обнаружения молекулярных маркеров ротавируса

(Driskell J.D., Zhu Yu, Kirkwood C. D. et al. Rapid and Sensitive Detection of Rotavirus Molecular Signatures Using Surface Enhanced Raman Spectroscopy. PLoS ONE, 2010, 5, 4, e10222)

Установлена возможность идентификации и дифференциации ротавирусов серогрупп G и P с помощью поверхностной усиленной рамановской спектроскопии. Используемый для проведения анализа субстрат, содержащий наночастицы серебра, позволяет получать прямым путем представление об особенностях структуры вирионов.Ченг В., Джилл M.., Эспозито A. и соавт. Ротавирусы, ассоциированные с компонентами клеточных липидных капель, реплицируются в вироплазме; разрушение этих компонентов или блокирование липидных капель ингибирует образование вироплазмы и репликацию вируса.

(Cheung W., Gill M., Esposito A. et al. Rotaviruses associate with cellular lipid droplet components to replicate in viroplasms, and compounds disrupting or blocking lipid droplets inhibit viroplasm formation and viral replication. J Virol, 2010, 84, 13:6782-98).

Начальные стадии сборки ротавирусов в инфицированных клетках происходят в в определенных частях цитоплазмы (вироплазме). С помощью конфокусной микроскопии установили, что в вироплазме клеток, зараженных ротавирусом человека, аккумулируются липиды и белок перилипин А. Изопротеренол в сочетании с изобутилметилксантином , а также триаксином С снижает объем вироплазмы в клетках и ингибируют репликацию ротавируса, что предотвращает развитие цитопатических изменений или делает их менее выраженными.Блатт С.E., Матсон Д.О., Крауфорд С.E. и соавт. Ассоциированная с виремией ротавирусная антигенемия у детей.

(Blutt S.E., Matson D.O., Crawford S.E. et al. Rotavirus Antigenemia in Children Is Associated with Viremia. PLoS Medicine, 2007, 4, 4, e12)

При исследовании в ИФА (Rotaclone, Meridian Bioscience) сыворотки крови детей с подтвержденной другими методами ротавирусной инфекцией положительную реакцию зарегистрировали в 90 % (51 из 57) случаев. Не отмечено корреляции интенсивности антигеногенемии с генотипом ротавируса, а также возрастом пациентов и сроком взятия от них проб крови для анализов (их брали с 1 по 8 дни болезни). Однако, с повышением титра сывороточных антител (Ig A и G) к ротавирусу закономерно снижалась концентрация вирусного антигена. Ротавирус выделили посредством серийных слепых пассажей на перевиваемой линии клеток HT-29 (из-за отсутствия цитопатического действия о присутствии возбудителя судили по результатам реакции иммунофлюоресценции) из 11 (100%) антигенпозитивных сывороток и 2 из 9 (22%) антигеннегативных сывороток. Результаты проведенного исследования свидетельствуют о том, что в большинстве случаев и независимо от наличия диареи ротавирусная инфекция сопровождается у детей виремией. Этим можно объяснить ранее сделанные наблюдения о развитии этой инфекции в спорадических случаях гепатита, нефрита, пневмонии, экзантемы, диссеминированной внутрисосудистой коагулопатии, гемофагоцитарного лимфогистоцитоза, энцефалита, конвульсий и судорог.Донно А., , Грасси Т., Багордо Ф. и соавт. Появление необычного ротавируса человека в провинции Саленто (Италия) в 2006–2007 гг.

(Donno A., Grassi T., Bagordo F. et al. Emergence of unusual human rotavirus strains in Salento, Italy,during 2006–2007. BMC Inf Dis, 2009, 9:43 doi:10.1186/1471-2334-9-43)

В последние годы с помощью обратно-транскриптазной ПЦР удалось получить большое количество ценной информации о генетическом разнообразии циркулирующих в различных регионах мира штаммов ротавируса. При исследовании этим методом 243 проб фекалий, полученных от больных ротавирусной диареей детей в итальянской провинции Саленто, установили, что 60 % типируемых изолятов ротавируса, из числа циркулирующих в этом регионе, имеют 4 варианта комбинаций антигенов VP7 (G-тип) и VP4 (P-тип): G2P[8], G1P[8], G2P[4] и G9P[8]. Самым распространенным из них оказался вариант G2P[8]. Кроме того, обнаружены необычные варианты — G2P[10], G4P[10], G8P[4], G9P[11] и G10P[8]. Нередко у одних и тех же пациентов в фекалиях обнаруживали несколько антигенных вариантов ротавируса. Вариант G3P[8] не выявили ни в одном случае болезни.МакДональд С.M., Маттийнссенс Дж., МакАллен Дж.K. и соавт. Динамика эволюции ротавирусов человека: соотношение реассортации и превалирующих перегруппировок генов.

(McDonald S.M., Matthijnssens J., McAllen J.K. et al. Evolutionary Dynamics of Human Rotaviruses: Balancing Reassortment with Preferred Genome Constellations. PLoS Pathogens, 2009, 5, 10, e1000634).

Ротавирусы человека являются основными возбудителями тяжелого гастроэнтерита детей. Однако, до настоящего времени очень мало известно о геноме эпидемически опасных и эндемичных штаммов этих агентов, за исключением генов, кодирующих антигены VP7 (G-тип) и VP4 (P-тип). Секвенировали геном 51 штамма ротавируса, изолированных в штате Вашингтон (США) на протяжении 17 лет (1974-1991 гг.). В указанный период превалировал вариант G1P — на его долю приходилось 56 % изолятов ротавирусов. В зимний период этот вариант частично вытеснялся вариантом G3P. Зимой 1976 г. Одновременно циркулировало несколько штаммов, относящихся к различным генетическим клайдам G3P, у которых экспрессировались антигены с небольшими, но значимыми отличиями. У этих генетических линий ротавируса не отмечено обмена генетическими сегментами. Зимой 1991 г. от детей выделяли штаммы ротавируса, относящиеся к одному клайду, сходному с циркулирвавшими в 1976 г. Его геном отличался наличием сегментов, полученных, по всей видимости, в результате реабссортации с ранее циркулировавшими штаммами вируса того же G/P-типа. Получены подтверждения тому, что смена циркулирующих штаммов ротавируса может происходить в результате не только обмена генами, но и перегруппировки генов в РНК.Коджима T., Арай M., Садамото С. И соавт. Оценка диагностической ценности реагентов, применяемых для иммунохроматографического обнаружения ротавируса и аденовируса.

(Kojima T., Arai M., Sadamoto S. et al. Evaluation of the diagnostic reagents which detect rotavirus and adenovirus with the immunochromatographical method. Rinsho Biseibutshu Jinsoku Shindan Kenkyukai Shi, 2000, 11, 2, 93—98).

Японская компания Eiken Chemical Co. начала производить иммунохроматографические дипстики для диагностики ротавирусного и аденовирусного настроэнтеритов. Испытания показали, что порог их чувствительности составляет 50 и 25 нг/мл соответственно. По чувствительности ротавирусный дипстик превосходит реакции латексагглютинации Serodirect Rota и ROTALEX DRY в 10 раз и соответствует иммунохроматографическому тесту Immuno Card ST ROTAVIRUS и иммуноферментному тесту TESTPACK ROTAVIRUS других производителей. Аденовирусный дипстик по чувствительности превосходит реакцию латексагглютинации ADENOLEX DRY в 64 раза. Параллельное исследование 100 проб фекалий ротавирусными дипстиками Rota и Serodirect Rota показало, что их чувствительность составляет 100 %, специфичность — 98 %, совпадение результатов — 97 %. При исследовании 55 проб фекалий с помощью аденовирусного дипстика и реакции латексагглютинации ADENOLEX DRY установили, что перечисленные выше показатели составляют 100; 93,8 и 96,4 %, соответственно.Кларк Ф., Марцелло A.E., Лоули Д. и соавт. Неожиданно высокая интенсивность выделения ротавируса с фекалиями у очень маленьких детей, страдавших гастроэнтеритом

(Clark F., Marcello A.E, Lawley D. et al. Unexpectedly high burden of rotavirus gastroenteritis in very young infants. BMC Pediatrics, 2010, 10:40 doi:10.1186/1471-2431-10-40)

Считается, что ротавирусной диареей страдают преимущественно дети в возрасте 6-24 мес. В первые месяцы жизни они частично защищены материнскими антителами, получаемыми трансплацентарно и/или с молозивом. Исследовали фекалии 1646 детей, заболевших острым гастроэнтеритом в течение 12 лет (до 2006 г., когда начали проводить массовую иммунизацию новорожденных 5-валентной ротавирусной вакциной) в штате Филадельфия (США). 220 (13%) проб, в которых обнаружили ротавирус, были получены от детей в возрасте моложе 3 мес. В этой возрастной группе наиболее часто инфекцию диагностировали у двухмесячных младенцев.Лоррот M., Вассеур M. Почему бактериальные и ротавирусный NSP4 эндотоксины проявляют различные механизмы индукции диареи?

(Lorrot M., Vasseur M. How do the rotavirus NSP4 and bacterial enterotoxins lead differently to diarrhea? Virology J, 2007, 4:31 doi:10.1186/1743-422X-4-31)

Ротавирус инфицирует зрелые энтероциты кишечных ворсинок тонкого отдела кишечника, вызывая водянистую диарею. При этом видимые повреждения тканей часто отсутствуют. Ранее предполагали, что в основе патогенеза ротавирусной диареи лежат изменения обмена дисахаридами, ионами натрия и воды. После обнаружения у ротавируса энтеротоксина NSP4 возникла новая гипотеза относительно того, что в развитии диареи при данной инфекции также принимают участие и секреторные механизмы. Под действием упомянутого токсина на фосфолипаза С-зависимый кальциевую сигнальную систему усиливается реабсорбция ионов Cl-, но их секреция не подвергается заметным изменениям. В отличие от бактериальных диарей Ca2+-зависимый хлоридно-секреторный ответ при ротавирусной инфекции выражен слабо и быстро прекращается.Ким С.-Ю., Свит С., Слихтер Д. Влияние на здоровье детей и экономическая эффективность вакцинации против ротавирусной инфекции в неблагополучных по ней странам.

(Sun-Young Kim, Steve Sweet, David Slichter, Sue J Goldie. Health and economic impact of rotavirus vaccination in GAVI-eligible countries. BMC Public Health, 2010, 10:253)

Ротавирус — один из основных вирусных возбудителей диареи новорожденных и маленьких детей. Для этой инфекции характерны повторные заражения. В связи с этим ВОЗ рекомендовал всем странам, неблагополучным по ротавирусной инфекции, включать в национальные программы борьбы с заразными болезнями вакцинацию детей против этой инфекции. Авторы собрали и проанализировали информацию о такой работе, проведенной в 72 странах. Получены данные, свидетельствуют о том, что охват вакцинацией 70 % детей, позволяет значительно снизить инцидентность ротавирусной диареи и смертность от нее. Вакцинация оказалась экономически эффективной в 68 (94 %) из 72 стран. Расчеты показывают, что осуществление такой схемы вакцинации в экономически отсталых странах на протяжении 10 лет позволило предотвратить госпитализацию 41-107 млн. и смерть по меньшей мере 0,9-2,8 млн. детей в первые 5 лет жизни. Стоимость живой аттенуированной вакцины RotarixR (GlaxoSmith-Kline) и реассортантной 5-влентной вакцины RotaTeqR (Merck & Co. Inc.) составляет $1,5-5,0; первый из названных препаратов применяют двукратно, второй – трехкратно.Пант Н., Маркотте Х., Брюссов Х. и соавт. Эффективность профилактики ротавирусной диареи комбинацией препаратов Lactobacillus rhamnosus GG и антител.

(Pant N., Marcotte H., Brüssow H. et al. Effective prophylaxis against rotavirus diarrhea using a combination of Lactobacillus rhamnosus GG and antibodies. BMC Microbiol, 2007, 7:86 doi:10.1186/1471-2180-7-86).

В настоящее время существует 2 средства профилактики ротавирусной диареи — вакцины и специфические иммуноглобулины. Последние обычно применяют парентерально, причем они оказывают не только профилактическое, но и терапевтическое действия. Испытания пробиотических препаратов на основе Lactobacillus rhamnosus показало, что при их сочетанном с иммуноглобулинами к ротавирусам назначении пациентам предотвращается частота возникновения дисбактериозов и колонизации кишечника патогенными бактериями, что, тем самым, снижает инцидентность осложнений и тяжесть течения ротавирусной диареи.



Подписка на статьи

Чтобы не пропустить ни одной важной или интересной статьи, подпишитесь на рассылку. Это бесплатно.

Мероприятия

Мероприятия

Повышаем квалификацию

Посмотреть

Самое выгодное предложение

Самое выгодное предложение

Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

Живое общение с редакцией

А еще...

Критерии качества 2017: готовимся к оценке по-новому

Интервью

ФФОМС Наталья Стадченко

Председатель ФФОМС Наталья Стадченко в интервью журналу «Здравоохранение»:

Для медработника страховой представитель – это и контролер, и юридический консультант, и помощник одновременно





Наши продукты




















© МЦФЭР, 2006 – 2017. Все права защищены.

Портал zdrav.ru - медицинский портал для медицинских работников. Новости и статьи для главных врачей, медицинских сестер, заместителей главного врача, специалистов по качеству медицинской помощи, заведующих КДЛ, медицинских юристов, экономистов ЛПУ, провизоров и руководителей аптек.

Информация на данном сайте предназначена только для медицинских работников. Ознакомьтесь с соглашением об использовании.
Свидетельство о регистрации средства массовой информации Эл № ФС77-38302 от 30.11.2009


  • Мы в соцсетях
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — журнал в формате pdf

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
×
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
×
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль