Совершенствование тест-систем для лабораторной диагностики в Службе крови

4769
Совершенствование тест-систем для лабораторной диагностики в Службе крови

Лабораторное исследование для выявления маркеров гемотрансмиссивных инфекций – первый шаг на пути снижения риска распространения их возбудителей при переливании крови, оперативном вмешательстве, сексуальных контактах, во время беременности и т.д. Служба крови использует и другие превентивные механизмы как, например, выбор доноров-добровольцев или доноров из группы низкого риска. Но даже при самом тщательном отборе некоторые доноры могут оказаться зараженными, поэтому необходим строгий скрининг всех донаций для обеспечения безопасности переливания крови, не говоря уже о выявлении инфицированных пациентов в ЛПУ для своевременного их лечения. В рамках Службы крови ВОЗ рекомендует проводить лабораторные исследования крови для выявления, как минимум, маркеров ВИЧ, гепатита С, гепатита В и сифилиса, эти же маркеры входят в так называемый “госпитальный профиль” ЛПУ.

Уже разработано большое количество тест-систем для серологической диагностики этих инфекций, но разработка новых, с улучшенными характеристиками, продолжается.

Так в 2010–2011 годах итальянская компания DiaSorin выпустила тест-системы для определения антител и антигенов ВИЧ, антител к вирусу гепатита С и поверхностного антигена вируса гепатита В на новой иммунохемилюминесцентной (ИХЛА) платформе LIAISON® XL. Толчком к выпуску новых тестов стало приобретение компанией продуктовой линейки под маркой Murex®, известной качеством тест-систем для диагностики инфекций, которые используются лабораториями банков крови многих стран мира для скрининга донорской крови (выявление маркеров ВИЧ, вирусных гепатитов В и С, сифилиса). 

Тест-системы DiaSorin

Тест-системы DiaSorin для обнаружения маркеров ВИЧ, вирусов гепатита С и В, производимые на основе антител/антигнов Murex®, обладают характеристиками, необходимыми для использования в лабораториях Службы крови.

Подробнее

Теперь антитела и антигены под маркой Murex® входят в состав тест-систем DiaSorin, которые уже зарекомендовали себя во многих лабораториях, результаты их исследований были опубликованы и представлены на многих научных конгрессах [1–3,5,7]. В 2012 эти три тест-системы получили сертификаты института Пола Эрлиха, рекомендующие их к использованию в системе Службы крови и при производстве стволовых клеток. Только наличие подобного сертификата разрешает использовать диагностические тест-системы в учреждениях Службы крови Германии.

Тест-система LIAISON® XL Murex® HIV Ab/Ag предназначена для комбинированного качественного определения антигена p24 вируса иммунодефицита человека типа 1 (ВИЧ-1) и специфических антител к ВИЧ-1 (группа М и группа О) и/или ВИЧ-2. Для выявления антител (АТ) тест-система содержит антиген (АГ) ВИЧ-1 gp41 и антиген ВИЧ-2 gp-35, для выявления АГ – специфические к нему моноклональные антитела.

Применение тест-системы позволяет одновременно выявлять антитела и антиген в сыворотке крови пациентов с диагностической специфичностью 99,6% и чувствительностью 100% [1]. Аналитическая чувствительность обнаружения p24 антигена в первом международном стандартном препарате ВОЗ, код NIBSC 90/636, составляет 1,26 МЕ/мл. При этом помимо суммарного результата АТ/АГ анализатор выдает также результаты раздельного выявления АТ и АГ, что сокращает количество подтверждающих тестов. Благодаря высокой чувствительности тест-системы к антигену р24 “период окна” сокращается до 3,8 дней (усредненный результат тестирования различных коммерческих сероконверсионных панелей [2,3]), делая возможным раннее обнаружение ВИЧ-инфекции.

Хорошие результаты раннего обнаружения инфекции продемонстрировала тест-система и в условиях низких или недетектируемых концентраций антигена р24 (сероконверсионная панель HIV9017 (Таб. 1)).

Совершенствование тест-систем для лабораторной диагностики в Службе крови

Тест-система LIAISON® XL Murex® HCV Ab предназначена для качественного обнаружения антител к вирусу гепатита С. В состав тест-системы входят неструктурные антигены NS3 и NS4 и ядерный антиген. Ряд современных тест-систем содержат, дополнительно к перечисленным, и антиген NS5, но, как было показано, включение этого антигена снижает специфичность определения анти-HCV ниже допустимых пределов [4]. Редко встречающаяся изолированная NS5-реактивность не коррелирует с наличием специфической РНК вируса.

Диагностическая чувствительность тест-системы LIAISON® XL Murex® HCV Ab составляет 100%, диагностическая специфичность – 99,7% [1]. “Период окна”, определенный анализом 11 сероконверсионных панелей при этом равен 16 и 18,2 дням (медиана и среднее, соответственно, [5]).

Тест-система LIAISON® XL Murex® HBsAg Quant предназначена для качественного и количественного определения поверхностного антигена вируса гепатита B. Это единственная на рынке ИХЛА тест-система, содержащая антитела не только к экспонированной наружу части поверхностного антигена вируса гепатита B (петля “а”), но и к трансмембранной и внутренней его частям, что позволяет ей выявлять так называемые “ускользающие” от диагностики мутанты.

По сравнению с другими ДНК-содержащими вирусами вирус гепатита В обладает более высокой генетической вариабельностью из-за этапа обратной транскрипции в цикле репликации. Одним из факторов, усиливающим мутационную изменчивость, является массовая вакцинация. По разным оценкам частота мутаций среди вакцинированных достигает 28% [6].

Некоторые мутации приводят к конформационным изменениям поверхностного антигена вируса, а значит, могут повлиять на результаты лабораторного скрининга. Подавляющее большинство используемых для диагностики иммунотестов содержат в своем составе антитела только к петле “а”, характеризующейся высокой вариабельностью. Запатентованная методика получения моноклональных антител, специфичных к вариабельному (петля “а”) и консервативным участкам (внутреннему и трансмембранному) молекулы поверхностного антигена и способных связываться с денатурированной молекулой антигена в присутствии высоких концентраций детергента, обеспечивает тест-системе LIAISON® XL Murex® HBsAg Quant высокую способность обнаруживать мутантные формы HBsAg. Сравнительный результат тестирования панели мутантов приведен в таблице 2.

Совершенствование тест-систем для лабораторной диагностики в Службе крови

Способность выявлять мутантные формы является необходимым, но не достаточным свойством качественной тест-системы для обнаружения HBsAg. Она при этом должна обладать чувствительностью, позволяющей обнаруживать антиген в условиях его низкой концентрации («период окна», низкая вирусная нагрузка, коинфекция вирусом гепатита С или D, снижающая репликацию вируса и/или синтеза HBsAg). Наименьшая определяемая тест-системой LIAISON® XL Murex® HBsAg Quant концентрация антигена составляет 0,03 МЕ/мл (0,05 МЕ/мл относительно второго международного стандарта HBsAg, субтипа adw2, генотипа A, код NIBSC 00/588, [7]).

Диагностическая чувствительность тест-системы составляет 100%, диагностическая специфичность – 99,9%. “Период окна” по результатам анализа 32 доступных сероконверсионных панелей составляет 7 и 11,7 дней (медиана и среднее, соответственно, [7]).

В отличие от трех вышеописанных тест-систем LIAISON® Treponema screen, предназначенная для скрининга суммарных антител к бледной трепонеме, была выпущена компанией DiaSorin уже давно и успешно используется с анализатором LIAISON®. С появлением нового анализатора LIAISON® XL она была адаптирована для использования и с ним. Выявление антител IgG и IgM в пробе пациента обусловлено их связыванием с антигеном Tp17s в составе тест-системы. Диагностическая специфичность определения составляет 99,9%, чувствительность – 100%.

Иммунохимический анализатор LIAISON® XL

Иммунохимический анализатор LIAISON® XL полностью удовлетворяет запросам современной лаборатории, совмещая в себе удобство работы и качество выполняемых исследований. Подробнее

Подробнее

Высокие диагностические и аналитические характеристики всех четырех тест-систем для выявления маркеров гемотрансмиссивных инфекций с использованием анализатора LIAISON® XL позволяют рекомендовать их для использования в клинико-диагностических лабораториях и лабораториях Службы крови.

Автоматический ИХЛА анализатор свободного доступа LIAISON® XL рассчитан на одновременную загрузку до 120 проб пациентов, до 25 картриджей с реагентами (методик), обладает производительностью до 180 тестов в час. Дозирование проб осуществляется с помощью одноразовых наконечников, что исключает возможность кросс-контаминации.

Ссылки на литературу

1. De Luca M., Capuano F., Zanin D., Enrietti S., Anrò V., Morena S., Pallavicini L. Assessment of new LIAISON® XL murex automated immunoassays for the detection of HBsAg, anti-HCV and HIV markers in human serum/plasma. 21st International Congresso of the ISBT – Lisbon, June 18–22, 2011.

2. Zanin D, Morena S., Pallavicini L. Development of a combined immunoassay for the detection of HIV–1/2/O antigen and antibodies, for use on the new LIAISON® XL analyzer. XXXIX Convegno Nazionale di Studi di Medicina Trasfusionale – Milano, 9–12 giugno 2010.

3. T. D. Ly; Dautigny M.; Lecuelle C.; Gonsalo S. Sensitivity of p24 Ag detection of four new HIV antigen/antibody combination assays. 14th Annual European Society for Clinical Virology (ESCV) meeting – Madeira, 21–24 September 2011.

4. Sinyoung Kim, Jeong-Ho Kim, Seoyoung Yoon, Youn-Hee Park, Hyon-Suk Kim. Clinical Performance Evaluation of Four Automated Chemiluminescence Immunoassays for Hepatitis C Virus Antibody Detection. Journal of clinical microbiology, Dec. 2008, p. 3919–3923

5. Enrietti S. , De Luca M., Pallavicini L. Development of an immunoassay for the detection of HCV antibodies in human serum/plasma specimens, for use on the new LIAISON® XL analyzer. XXXIX Convegno Nazionale di Studi di Medicina Trasfusionale – Milano, 9–12 giugno 2010.

6. C John Clements, Ben Coghlan, Mick Creati, Stephen Locarnini, Richard S Tedder, Joseph Torresi. Global control of hepatitis B virus: does treatment-induced antigenic change affect immunization? Bulletin of the World Health Organization 2010;88:66–73.

7. F. Capuano, M. Petruzziello, S. Morena, S. Enrietti, L. Pallavicini, F. Garetto. LIAISON® XL murex HBsAg Quant: a novel concept for mutant detection and quantization. 28th Annual NRL Workshop on Infectious Diseases, Canberra, Australia 2 – 5 August 2011

*Текст публикуется в авторской редакции

Перейти к другим публикациям

Узнать о подписке на журнал 



Подписка на статьи

Чтобы не пропустить ни одной важной или интересной статьи, подпишитесь на рассылку. Это бесплатно.

Мероприятия

Мероприятия

Повышаем квалификацию

Посмотреть

Самое выгодное предложение

Самое выгодное предложение

Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

Живое общение с редакцией

А еще...

Критерии качества 2017: готовимся к оценке по-новому

Интервью

Обновить руководящий состав медорганизаций

Есть задача – обновить руководящий состав медорганизаций

Федот ТУМУСОВ: журналу «Здравоохранение». «Есть задача – обновить руководящий состав медорганизаций»





Наши продукты




















© МЦФЭР, 2006 – 2017. Все права защищены.

Портал zdrav.ru - медицинский портал для медицинских работников. Новости и статьи для главных врачей, медицинских сестер, заместителей главного врача, специалистов по качеству медицинской помощи, заведующих КДЛ, медицинских юристов, экономистов ЛПУ, провизоров и руководителей аптек.

Информация на данном сайте предназначена только для медицинских работников. Ознакомьтесь с соглашением об использовании.
Свидетельство о регистрации средства массовой информации Эл № ФС77-38302 от 30.11.2009


  • Мы в соцсетях
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — журнал в формате pdf

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
×
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
×
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль