О проблеме деконтаминации помещений ПЦР-лабораторий

3867
О проблеме деконтаминации помещений ПЦР-лабораторий

Информационное письмо*

Одной из самых актуальных проблем микробиологических отделений лечебно-профилактических организаций во всем мире является контаминация лабораторных помещений микроорганизмами, продуктами их жизнедеятельности, токсинами, и в т. ч. нуклеиновыми кислотами, распространение которых приобретает значимость на участках постановки полимеразных цепных реакций (ПЦР). Реакция ПЦР – высокочувствительный метод, теоретически позволяющий обнаруживать наличие всего одной копии фрагмента ДНК искомого микроорганизма в присутствии миллионов других молекул, что делает совершенно необходимым особенно тщательное устройство ПЦР-лаборатории и выдвигает на первый план проблему попадания из внешней среды в реакционную смесь молекул ДНК, способных служить мишенями в реакции амплификации и давать ложноположительные результаты.

Попадание в реакционную пробирку следовых количеств положительной ДНК (специфических продуктов амплификации ДНК ампликонов; ДНК-стандарта, используемого в качестве положительного контроля; положительной ДНК клинического образца) приводит к амплификации в процессе ПЦР специфического фрагмента ДНК и, как следствие, к появлению ложноположительных результатов.

В процессе работы могут встретиться два вида контаминации:

~ перекрестная контаминация от пробы к пробе (в процессе обработки клинических образцов или при раскапывании реакционной смеси), приводящая к появлению спорадических ложноположительных результатов;

~ контаминация продуктами амплификации (ампликонами), имеющая наибольшее значение, т. к. в процессе ПЦР ампликоны накапливаются в огромных количествах и являются идеальными продуктами для реамплификации.

Как правило, определить источник контаминации бывает очень трудно и требует значительных затрат времени и средств. Существует несколько способов борьбы с этим неприятным явлением. Одним из них является фотохимическое воздействие на молекулы ДНК. Для этого используют псорален или изопсорален, которые активируются кратковременным облучением ультрафиолетовым светом. Модифицированные этими соединениями молекулы ДНК не могут участвовать в реакции амплификации.

Однако, как известно, ни одна биологическая или химическая реакция не идет со 100%-ной эффективностью и, соответственно, после инактивации продуктов амплификации из миллиардов копий амплифицированного фрагмента хотя бы несколько останутся целыми, что существенно снижает ценность такого подхода. Кроме того, всегда остается риск кросс-контаминации от образца к образцу в процессе пробоподготовки. Таким образом, этот метод лишь в некоторой степени позволяет устранить источник контаминации и не гарантирует от ложноположительных результатов.

Накопленный к настоящему времени опыт работы лабораторий, использующих метод ПЦР для диагностики, позволяет сформулировать основные требования к организации таких лабораторий, проведению самих анализов и процессу обеззараживания помещений. В методических указаниях от 04.03.2004 «Организация работы при исследованиях методом ПЦР материала, инфицированного патогенными биологическими агентами III–IV групп патогенности» перечислены мероприятия, которые необходимо осуществить в случае возникновения контаминации в лаборатории:

~ утилизация всех находящихся в контаминированной зоне реактивов;

~ утилизация исследуемых материалов на всех промежуточных стадиях обработки (кроме исходной);

~ генеральная уборка, химическая и ультрафиолетовая дезинфекция всех поверхностей лабораторных помещений;

~ дезинфекция мебели, рабочих поверхностей, а также поверхностей корпусов приборов и оборудования химическим методом и ультрафиолетовым излучением.

Исходя из данных методических указаний, а также Методических указаний по применению бактерицидных ламп для обеззараживания воздуха и поверхностей в помещениях от 28.02.1995 № 11-16/03-06, рабочие помещения лаборатории ПЦР должны быть оснащены ультрафиолетовыми лампами с максимумом излучения в области 260 нм (типа ДБ-60) из расчета 2,5 Вт на 1 м3, облучение которыми, с целью обработки помещений и рабочих поверхностей, необходимо проводить в течение 1 ч до начала работы и в течение 1 ч после окончания работы…

Таким образом, использование импульсных ультрафиолетовых установок с ксеноновыми лампами позволяет:

~ обеспечить безопасность сотрудников бактериологических лабораторий, работающих с биологическими агентами III–IV групп патогенности;

~ проводить деконтаминацию помещений биологических лабораторий от всех видов микроорганизмов, включая их высокоустойчивые штаммы и полирезистентные формы, с эффективностью выше 99,9%;

~ обеспечить качество и надежность проведения пробоподготовки и ПЦР-анализа в результате высокоэффективной инактивации микробиологических загрязнителей;

~ существенно снизить количество ложноположительных реакций при постановке ПЦР-анализов;

~ увеличить пропускную способность (производительность) ПЦР-лабораторий за счет значительного сокращения времени на дезинфекционную обработку.

Очевидно, что новая импульсная плазменно-оптическая технология и установки на ее основе являются значительно более эффективным, надежным и удобным в эксплуатации средством обработки лабораторий по сравнению с другими существующими методами.

*Статья опубликована с сокращениями, полностью публикацию читайте в бумажной версии

Перейти к другим публикациям журнала >> 

Информация об условиях подписки >>



Подписка на статьи

Чтобы не пропустить ни одной важной или интересной статьи, подпишитесь на рассылку. Это бесплатно.

Мероприятия

Мероприятия

Повышаем квалификацию

Посмотреть

Самое выгодное предложение

Самое выгодное предложение

Воспользуйтесь самым выгодным предложением на подписку и станьте читателем уже сейчас

Живое общение с редакцией

А еще...

Критерии качества 2017: готовимся к оценке по-новому

Интервью

ФФОМС Наталья Стадченко

Председатель ФФОМС Наталья Стадченко в интервью журналу «Здравоохранение»:

Для медработника страховой представитель – это и контролер, и юридический консультант, и помощник одновременно





Наши продукты




















© МЦФЭР, 2006 – 2017. Все права защищены.

Портал zdrav.ru - медицинский портал для медицинских работников. Новости и статьи для главных врачей, медицинских сестер, заместителей главного врача, специалистов по качеству медицинской помощи, заведующих КДЛ, медицинских юристов, экономистов ЛПУ, провизоров и руководителей аптек.

Информация на данном сайте предназначена только для медицинских работников. Ознакомьтесь с соглашением об использовании.
Свидетельство о регистрации средства массовой информации Эл № ФС77-38302 от 30.11.2009


  • Мы в соцсетях
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — журнал в формате pdf

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы продолжить чтение статей на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
×
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль
×
Сайт предназначен для медицинских работников!

Чтобы скачать файл на портале ZDRAV.RU, пожалуйста, зарегистрируйтесь.
Это займет всего 57 секунд. Для вас будут доступны:

— 9400 статей
— 4000 ответов на вопросы
— 80 видеосеминаров
— множество форм и образцов документов
— бесплатная правовая база
— полезные калькуляторы

Вы также получите подарок — pdf- журнал «Здравоохранение»

У меня есть пароль
напомнить
Пароль отправлен на почту
Ввести
Я тут впервые
И получить доступ на сайт
Займет минуту!
Введите эл. почту или логин
Неверный логин или пароль
Неверный пароль
Введите пароль